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51.
Single-molecule DNA sequencing of a viral genome 总被引:4,自引:0,他引:4
Harris TD Buzby PR Babcock H Beer E Bowers J Braslavsky I Causey M Colonell J Dimeo J Efcavitch JW Giladi E Gill J Healy J Jarosz M Lapen D Moulton K Quake SR Steinmann K Thayer E Tyurina A Ward R Weiss H Xie Z 《Science (New York, N.Y.)》2008,320(5872):106-109
The full promise of human genomics will be realized only when the genomes of thousands of individuals can be sequenced for comparative analysis. A reference sequence enables the use of short read length. We report an amplification-free method for determining the nucleotide sequence of more than 280,000 individual DNA molecules simultaneously. A DNA polymerase adds labeled nucleotides to surface-immobilized primer-template duplexes in stepwise fashion, and the asynchronous growth of individual DNA molecules was monitored by fluorescence imaging. Read lengths of >25 bases and equivalent phred software program quality scores approaching 30 were achieved. We used this method to sequence the M13 virus to an average depth of >150x and with 100% coverage; thus, we resequenced the M13 genome with high-sensitivity mutation detection. This demonstrates a strategy for high-throughput low-cost resequencing. 相似文献
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