超声波辅助高压法提取金针菇黄酮的纯化及活性测定

为了获知超声波辅助高压法所提取金针菇黄酮的抑菌和抗氧化活性以及D101型大孔吸附树脂纯化金针菇黄酮的最优条件,利用D101型大孔树脂对超声波辅助高压法所提取的金针菇黄酮进行纯化,并对纯化条件进行了优化研究,而后对纯化后黄酮抑制大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的能力进行了检测;又以抗坏血酸(VC)为对照,对黄酮清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(·O2-)、羟基自由基(·OH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS·)的能力进行测定.结果表明,D101型大孔树脂纯化金针菇黄酮的最适条件为:采用浓度为1.2 mg/mL、pH值为5的上样液,在上样流速为0.75 mL/min的条件下进行吸附;吸附饱和后用70％的乙醇60mL以1 mL/min洗脱.在此条件下得到的黄酮纯度是纯化前的2.71倍.超声波辅助高压法所提取的金针菇黄酮对四种菌均有不同程度的抑制作用,其抑菌程度大小顺序为:大肠杆菌＞沙门氏菌＞金黄色葡萄球菌＞枯草芽孢杆菌.金针菇黄酮对DPPH·、·O2-、·OH和ABTS·均具有一定的清除能力,但弱于VC.可知超声波辅助高压法所提取的金针菇黄酮具有抑菌及抗氧化活性,D101型大孔吸附树脂纯化金针菇黄酮效果较好.     

微波辅助高压法提取金针菇黄酮的纯化及活性测定

为了确定微波辅助高压法所制备的金针菇黄酮的生物活性,及其经H103型大孔树脂纯化的最优工艺条件,对此纯化工艺进行了优化,并检测了黄酮的抗菌性,以及它清除2 ,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基（ABTS·）、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（DPPH·）和羟基自由基（OH·）的活性。结果显示,此纯化工艺的最优条件是吸附时,样品液pH值为5,浓度为1.45 mg·mL^-1,流速为0.30 mL·min^-1;洗脱时,溶剂乙醇的浓度为70%,流速为2 mL·min^-1,用量为60 mL,纯化后黄酮纯度可达纯化前的3.27倍。金针菇黄酮对四种菌株皆表现出抗菌性,其中对大肠杆菌（Escherichia coli）的抗菌活性最强,其次是沙门氏菌（Salmonella enteritidis）,金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）第三,枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）最弱。该黄酮可清除三种自由基,但清除率都低于VC。可见微波辅助高压法所制备的金针菇黄酮兼具抗菌和抗氧化能力,H103型大孔树脂可以用作纯化金针菇黄酮的介质。