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采用PCR方法扩增PPV6保守区域基因252bp,将其克隆到pClon007载体,构建重组质粒作为标准阳性质粒。以质粒模板建立PPV6的SYBR GreenⅠreal-time PCR检测方法,并进行敏感性、特异性和重复性等验证。结果表明,重组质粒特异性好;建立的real-time PCR方法Ct值与标准品模板在8.80×109~8.80×101 copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.993,斜率为-4.320。该方法检测灵敏度可达8.80×101 copies/μL。该方法对JEV、PRV、PRRSV、PCV2、FMDV等猪常见病原检测均无特异性扩增;对临床样品的检测结果表明,所建立的荧光定量PCR阳性检测率为40.63%。本试验成功建立了PPV6SYBR Green I real-time PCR检测方法,可实现对PPV6快速灵敏的诊断。 相似文献
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运用供应链管理理论,对农民专业合作组织的市场运营系统,在采购控制、生产控制、分销控制和物流控制等不同层面进行合理规划,可以有效避免农民专业合作组织生产和经营中的盲目性,规避市场风险,实现农民增收,这也是促进农业产业化经营的有效途径。 相似文献
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养殖户在饲养种鸡时,由于某些原因,致使种雏初生重较轻、个体弱小、卵黄吸收不良等,对外界环境的适应能力较差。这种弱雏一般在3日龄陆续出现,到7日龄后开始增多,并出现死亡,死亡率较高,造成重大损失。弱雏表现畏寒怕冷、 相似文献
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痛风是一种嘌呤代谢紊乱所致的慢性代谢紊乱疾病,目前临床上治疗痛风的药物常具有一定的毒副作用,长期服用容易诱发肝肾衰竭等疾病。本文以桑黄菌为研究对象,通过液体发酵的方式得到其子实体和培养液,并利用飞行质谱检测了其相对分子质量为800~850。将桑黄提取液体外作用于LO2细胞,利用qRT-PCR检测尿酸代谢途径中关键酶XO和HGPRT基因的表达,在药物浓度为0.005 g/mL时XO基因的表达受到明显抑制,药物浓度为0.015 g/mL时HGPRT基因的表达得到明显提升。利用ELISA检测HGPRT的酶活,随着药物浓度的增加HGPRT的酶活不断提升。表明桑黄主要通过作用于XO和HGPRT,从而达到降尿酸的效果。本文的研究为开发天然降尿酸药物的发展以及桑黄的应用奠定了一定的理论和实验基础。 相似文献