球孢白僵菌HsbA蛋白的原核表达及免疫定位

【目的】明确虫生真菌球孢白僵菌（Beauveria bassiana）疏水表面结合蛋白HsbA（hydrophobic surface binding protein A）的致病过程。【方法】对HsbA进行克隆、亚克隆和原核表达,根据纯化后的蛋白制备多克隆抗体并进行抗原性分析,利用免疫电镜对HsbA蛋白进行定位观察。【结果】原核表达系统成功诱导了白僵菌的HsbA融合蛋白,制备多克隆抗体经Western杂交分析表明,该多抗能特异性识别目的蛋白。免疫电镜结果显示,HsbA蛋白在孢子和菌丝中呈随机分布。正常生长状态下,菌丝中的HsbA蛋白数量要明显多于孢子中被标记的数目,此外,孢子在侵染状态和正常生长状态下的HsbA蛋白数量也有显著差异,侵染状态下孢子的HsbA蛋白表达量更高,但菌丝在这2种状态下均呈现高表达。感染虫体中HsbA蛋白被标记的部位集中在体壁。【结论】原核表达实现了HsbA蛋白的高效表达,且制备的多克隆抗体具有较好的免疫原性。此外,免疫定位表明HsbA蛋白与菌丝的生长有关,并在白僵菌致病过程中参与了吸附作用,其作用部位位于昆虫体壁。     

单头饲养和群体饲养的西花蓟马实验种群生命表比较

【目的】对西花蓟马（Frankliniella occidentalis）实验种群生命表的研究大多采用单头饲养（individual-rearing,IR)的方式,研究结果可用于田间自然情况下种群发生的预测。然而西花蓟马在自然情况下常常是群聚发生,而非单头发生。论文旨在比较单头饲养和群体饲养（group-rearing,GR）两种方式建立起的西花蓟马实验种群的生命表参数,探讨何种方式建立起的生命表用于预测自然条件下西花蓟马的发生情况可能更为准确。【方法】分别用单头饲养和群体饲养的方式构建西花蓟马实验种群在菜豆豆荚上的年龄-阶段两性生命表,比较两种饲养条件下西花蓟马的生活史和种群参数;采用bootstrap方法计算种群生长参数的平均数和标准误;应用U 检验（Mann-Whitney test）（Sigmaplot 12.5）估计单头饲养和群体饲养条件下西花蓟马种群参数、发育历期和繁殖力间的差异。【结果】单头饲养和群体饲养对若虫期、蛹期、雄虫寿命、总产卵前期、单雌产卵量、蛹重、成虫体长有显著影响, 对卵期、成虫期、成虫产卵前期、雌虫寿命、蛹长、蛹宽、成虫体宽的影响不显著。单头饲养西花蓟马的若虫期（4.49 d）、蛹期（4.03 d）、雄虫寿命（22.82 d）、总产卵前期（11.37 d）显著长于群体饲养（3.05、3.32、18.64、10.00 d）;单头饲养西花蓟马的蛹重（0.03 mg）、雌成虫体长（203.72 μm）、雄成虫体长（149.74 μm）、单雌产卵量（48粒）显著低于群体饲养（0.07 mg、288.81 μm、203.39 μm、133.39粒）。内禀增长率（r）、周限增长率（λ）、净增殖率（R₀）、总生殖率（GRR）和平均世代时间（T）在单头饲养的情况下分别为0.161 d^-1、1.175 d^-1、20.730、35.699、18.70 d,在群体饲养情况下分别为0.242 d^-1、1.274 d^-1、60.499、102.342、16.88 d。群体饲养的西花蓟马种群增长比单头饲养的快。【结论】相对于单头饲养的西花蓟马,群体饲养的西花蓟马种群增长速度更快、单位时间内产生后代数更多,若使用单头饲养方式建立生命表对西花蓟马种群发生动态进行预测预报可能会延误最佳防治时机,以群体饲养的方式建立的生命表对田间种群的动态预测应该更准确。     

海南三叶斑潜蝇对阿维菌素、阿维·杀虫单和灭蝇胺的敏感性

为了解海南三叶斑潜蝇幼虫对阿维菌素、阿维·杀虫单和灭蝇胺的敏感性现状,采用叶片浸渍法测定了海南省三亚、陵水、乐东和海口4个不同地理种群的三叶斑潜蝇幼虫对3种药剂的敏感性.试验结果表明,不同地区斑潜蝇对阿维菌素、阿维·杀虫单和灭蝇胺的敏感性存在较大的差异.其中,海口种群对3种药剂最为敏感,三亚种群敏感性最差.在生产上应注意对上述药剂的合理使用,以防止其抗性产生.     

三叶斑潜蝇在中国的适生区预测

利用CLIMEX生态气候模型提供的中国87个位点的气候资料和中国气象台649个台站的气候资料,对三叶斑潜蝇在中国的适生区进行了预测,结果表明三叶斑潜蝇能广泛分布于华东、华南、华中和西南等绝大部分地区,特别是以长江以南的广大地区,以及华北的山东、河北、天津和北京、东北的辽宁、西北的陕西等部分地区,其潜在的分布区可达北部纬度较高的地区(内蒙古、黑龙江)以及西部的新疆、西藏个别地区。     

5株绿僵菌对东亚飞蝗的毒力测定

在室内用点滴法测定了 5株绿僵菌对东亚飞蝗的毒力 ,结果表明 ,其毒力效果与菌株种类 ,接种剂量和温度有密切关系 ,菌株对东亚飞蝗的毒力为LA06>LB08>LC11>LF07>LD04。接种LA06菌株孢子量在 2.6×10⁴个/头下 ,对 4龄蝗蝻的LT₅₀为 3.91d。用不同剂量LA06接种 4龄蝗蝻时 ,发现其LD₅₀仅为26.67个/头。在设定剂量下 ,低龄蝻比高龄蝻和成虫更敏感 ,死亡较快。不同菌株在不同温度下的毒力不同 ,LA06在 30℃下比在 24℃下毒力强 ,而LD04和LF07在 24℃下比在30℃下毒力强。     

小菜蛾感染绿僵菌后的病征及组织病理变化

小菜蛾感染绿僵菌后，虫体颜色及外部形态会发生相应变化。组织切片观察表明，绿僵菌菌株LD65处理后36h，附着于小菜蛾体壁的孢子开始萌发入侵。48h后，小菜蛾内表皮被分解，菌丝段进入血腔，并向侵入点附近的脂肪体入侵。3d后感染幼虫死亡，各组织器官均受到侵染。随着绿僵菌继续在死虫体内增殖，各组织器官遭到不同程度破坏。5d后，菌丝突破体表，在虫体外形成菌丝层。菌株LF68侵染过程与LD65相似，但侵染速度快于LD65。     

不同温度下4株白僵菌对西花蓟马的致病力

本文测定了4株白僵菌在18、22、26、30、34 ℃ 5个温度下对西花蓟马成虫和若虫的毒力, 结果表明：白僵菌JMS、HS、MBb、RSB 4个菌株在这5个温度下对西花蓟马成虫均具有很高的致病力,绝大多数西花蓟马在5 d左右死亡,致死率均在97％以上,多数为99％～100％,致死中时为1.4～3.2 d,白僵菌RSB菌株对西花蓟马成虫的致死中时最短,在30 ℃下,仅为1.4 d。在各温度下供试菌种对西花蓟马若虫的致病力明显低于对西花蓟马成虫的致病力,其致死率一般在90％～99％,致死中时也相对较长。     

球孢白僵菌菌丝生长中HsbA基因的表达量变化

球孢白僵菌是一种具有杀虫潜力的生防真菌,菌丝是其重要的结构单位,而疏水蛋白被认为参与了气生菌丝的生长过程。本文以球孢白僵菌疏水表面结合蛋白编码基因HsbA为检测对象,利用荧光定量PCR方法研究了该基因在液生菌丝和气生菌丝中的相对表达量,结果表明,HsbA基因在气生菌丝中的相对表达量显著高于液生菌丝。基于以上结果,我们推断,HsbA基因在气生环境下的上调表达可能会增加其编码蛋白的总量,从而对球孢白僵菌气生菌丝的生长发育起到调控作用。研究结果不仅为菌种的遗传改良提供了一个切入点,也对菌株的商业化生产有一定的指导意义。     

温度对绿僵菌LA菌株孢子萌发、酶活力及毒力的影响

为明确温度对绿僵菌LA菌株生物学特性和毒力的影响,采用微室萌发、酶标仪测定A值以及体外涂抹法,对不同温度下LA菌株孢子萌发率、胞外蛋白酶、几丁质酶活力以及对东亚飞蝗的毒力进行了测定,结果表明:LA菌株在30℃下孢子萌发速率最快,对东亚飞蝗的致死速率也最快;38℃下培养,孢子萌发率开始受到限制,40℃下培养孢子的萌发率接近于0;高温处理转至适温培养,对孢子萌发速率产生一定影响,48℃下处理不同时间,孢子萌发速率、萌发率均显著降低,转至30℃下培养24h仅有10.6%～20.9%的孢子可萌发;LA胞外蛋白酶活力培养至第6天达到最高,为31.37U/mL,不同温度下活力测定表明37℃下胞外蛋白酶活力最高,几丁质酶在培养至第5天酶活力达到最高,为34.62U/mL,最高酶活温度为50℃。     

两种潜叶果蝇简介

在云南和贵州两省调查入侵斑潜蝇时发现两种潜叶果蝇,本文报道它们的形态特征和有关生态资料。