共转化获得无抗性标记的转反义蜡质基因籼稻

【目的】利用转基因技术将反义蜡质基因导入籼稻成熟胚愈伤组织中,改良籼稻稻米直链淀粉含量。【方法】用根癌农杆菌介导的方法将p13W8质粒（含反义蜡质基因）和pCAMBIA1300质粒（含抗潮霉素抗性基因）对2个籼稻品种的成熟胚愈伤组织进行遗传共转化。【结果】供试材料愈伤组织继代培养18～24 d后具有较高的转化频率和分化频率,可作为共转化的良好受体;抗性愈伤组织PCR检测结果表明,抗潮霉素抗性基因的阳性检测率为97.6%,反义蜡质基因的阳性检测率为27.1%。在46株转基因潮霉素抗性植株中,反义蜡质基因阳性株为5株,占转基因植株的10.9%。经PCR检测,发现上述4个株系T1群体中发生抗潮霉素抗性基因和反义蜡质基因片段的分离,从286个T1单株中筛选到了39个单株只带反义蜡质基因片段,而无潮霉素抗性基因的转基因植株,占T1单株总数的13.6%。部分转反义蜡质基因植株种子的直链淀粉含量有不同程度的降低。【结论】通过农杆菌介导的遗传共转化方法,将反义蜡质基因Waxy导入籼稻成熟胚愈伤组织,获得了直链淀粉含量明显降低的仅含反义蜡质基因籼稻株系。     

超级杂交稻两优培九剑叶叶鞘叶绿体光化学活性的初步研究

以超级杂交稻两优培九及其父本9311、母本培矮64S和三系杂交稻组合汕优63为研究材料,采用光合膜人工反应体系和32Pi同位素标记等技术,初步研究了超级杂交稻两优培九剑叶叶鞘的光化学活性。结果表明,两优培九剑叶叶鞘及其叶片光系统Ⅰ还原能力的均值分别比汕优63高6.35和15.31 μmol/(mg·h),光系统Ⅱ放氧活性的均值分别高出616和9.89 μmol/(mg·h),且大多数时期达显著或极显著水平;两优培九剑叶叶鞘及其叶片浸出液钙含量均显著或极显著高于汕优63;两优培九剑叶叶鞘及其叶片叶绿体膜上Mg2+ ATPase活性的均值均高于汕优63,大多数时期达显著或极显著水平;两优培九剑叶叶鞘及其叶片循环光合磷酸化活性的均值也均高于汕优63,近一半时期达显著或极显著水平;非循环光合磷酸化活性的均值分别比汕优63高0.25和0.31 μmol/(mg·h),也近一半时期达显著或极显著水平;两优培九剑叶叶鞘及其叶片的光化学活性大多数时期显著或极显著高于亲本,具有平均优势或超亲优势;与叶片相比,剑叶叶鞘完全具有同剑叶一样的光化学活性,两者没有质的区别;两优培九剑叶叶鞘具有较高的光化学活性可能是它具有超高产特性的重要原因之一。     

碧冬茄花特异表达基因启动子PchsA的克隆与序列分析

根据Ingrid M．报道的碧冬茄花特异表达基因CHSA启动子的序列设计并合成一对特异引物，以碧冬茄总DNA为模板，通过PCR扩增出约370bp大小的DNA片段，回收后克隆到pUCm—T质粒载体上，经转化、筛选确定重组子，酶切鉴定后送上海生工生物工程公司测序，得到片段长度为370bp．采用DSgene分析软件进行序列分析发现其基本具有启动子的所有保守序列，TATAbox，CCAATbox，Anther box，G—box，TACPyAT box，box1，box2，Capsite等，且经InternetBLAST程序和DSgene分析软件进行同源性对比和序列分析，显示序列与已报道序列同源性为96％，登陆GenBank，ID号为AY360358。     

不同加工型马铃薯品种光合特性的比较

本文通过对4个加工型马铃薯品种在块茎形成期和块茎增长期的光合作用参数、叶片的SPAD值等光合特性的测定与分析,结果表明:4个加工型马铃薯品种光合作用能力大小依次为大西洋(A tlantic)>利云6号(PB06)>利云4号(PB04)>利云8号(PB08)。     

干旱胁迫对烤烟产量和某些化学成分的影响

为提供制定烤烟生产中抗旱保收策略以及保险理赔业务的量化指标．在盆栽条件下，采用二因素随机区组设计，研究了不同生长时期干旱和不同干旱时间胁迫对烤烟品种G80产量和一些化学成分的影响．结果表明：干旱胁迫下的烤烟产量和含钾量等化学成分均明显下降，移栽20d后的烟株对干旱胁迫最敏感，此期烤烟产量和一些化学成分受影响最大，尤其是永久干旱处理对烤烟产量和一些化学成分的影响最严重．     

结果期温州蜜柑吸磷机理的研究

以温州蜜柑为试验材料,应用同位素示踪技术对磷的吸收机理进行了研究.结果表明,柑桔无论是根部还是叶面施用~(32)P,其吸收运转速率在7月和9月有两个吸收高峰,8月份较低,根外喷施的~(32)P 以两条途径进入果实,一是通过果皮吸收直接进入果实,一是经叶片吸收后再转运至果实.7月份以果皮直接吸收为主,8月份二者相当,9月份则以叶吸收后转运为主,果皮吸收的~(32)P大多以蛋白质和核酸的形式滞留于果皮中.果皮和叶于喷施~(32)P1周以后.其累积吸收率均达90%以上.     

渗透胁迫下植物脯氨酸积累的研究进展

通过对植物在渗透胁迫下脯氨酸的大量积累情况的阐述，就脯氨酸在植物体中的合成与降解，脯氨酸积累的生物学意义以及与植物抗渗透胁迫的关系等进行综述。     

拟南芥钴胺素合成相关蛋白CSRP基因克隆及其功能分析

以拟南芥为研究对象,根据已知的生物信息数据,通过反向遗传学的方法,对与钴胺素合成相关蛋白CSRP基因进行分子克隆,得到该基因的基因组序列和cDNA序列,构建二元重组质粒,利用根癌农杆菌介导的花浸泡转基因方法分别转化突变体和野生型植株,进行互补试验和过表达试验,筛选转基因植株,并进一步预测其编码蛋白的亚细胞定位于叶绿体中.结果表明,在突变体中转入该基因后,转基因植株恢复野生型的表型,而在过表达的转基因植株中表型更为明显,即生长旺盛,晚花.说明该基因对于拟南芥的营养生长起促进作用,由于其功能预测与钴胺素合成相关的蛋白,推测其可能在植物营养生长中起作用.     

低钾胁迫对不同基因型水稻光合特性的影响

以水稻(Oryza sotiva L.)受体N27(对照)和来源于N27的耐低钾基因型水稻N18和N19为材料.采用溶液培养试验,研究了低钾胁迫对其光合特性的影响.结果表明,在低钾胁迫下,水稻叶片叶绿素a、叶绿素b以及叶绿素(a+b)含量均降低,且均是N18、N19的叶绿素含量高于N27.在低钾条件下,水稻叶片净光合速率、呼吸速率、气孔导度和胞间CO2浓度以及蒸腾速率均降低,且均是N18、N19的下降幅度小于N27.     

拟南芥IAA7的原核表达及稳定性分析

以p GEX–KG为基本骨架,构建了拟南芥IAA7蛋白的原核表达载体,用IPTG诱导IAA7在3种大肠杆菌表达菌株Rosetta、BL21和Tuner中表达,利用GST SefiroseTM resin亲和树脂分离纯化GST–IAA7融合蛋白,并分析重组蛋白在体外保存时的稳定性。结果表明:GST–IAA7融合蛋白在Rosetta菌株中于25℃和0.4 mmol/L IPTG诱导下表达较好;蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟(PMSF)可显著延长GST–IAA7在体外保存的时间,最后利用凝血酶切除GST标签后获得了纯化的IAA7蛋白质。