FSH 、LH对猪卵母细胞核成熟及体外成熟时间对去核效率的影响

克隆动物(核移植)的原理就是将卵裂球或体细胞核移人去核的卵母细胞或受精卵中,采用各种激活方法使之激活,发生卵裂,移植受体后产生个体。猪的体细胞克隆效率与其他动物(牛、羊)相比较低,需     

大通牦牛三个功能基因部分序列的PCR-RFLP研究

采用PCR-RFLP技术,检测了大通牦牛α_(S1)-酪蛋白(α_(S1)-casein,α_(S1)-CN)基因、κ酪蛋白(κ-casein,κ-CN)基因和生长激素(growth hormone,GH)基因部分序列的遗传多态性。结果表明大通牦牛群体中α_(S1)-CN基因PCR-RFLP位点呈单态;κ-CN基因和GH基因2个PCR-RFLP位点均呈多态性。κ-CN基因PCR-RFLP位点等位基因A和B的基因频率分别为0.1117和0.8883;GH基因PCR-RFLP位点等位基因A和B的基因频率分别为0.1755和0.8255。适合性卡方检验结果表明,大通牦牛GH基因和κ-CN基因PCR-RFLP位点的基因型分布均极显著偏离Hardy-Weinberg平衡定理(P<0.01);该3个位点平均基因一致度和基因多样度分别为0.8374和0.1626。     

哺乳动物胚胎生物技术应用中线粒体的命运

胚胎生物技术是生命科学的重要组成部分,包括体外受精、显微受精、细胞核移植技术等。线粒体是真核细胞中的重要细胞器,是机体的能量代谢中心。作者系统地就线粒体在体外受精与显微受精、细胞核移植技术等胚胎生物技术应用中的命运作一概述。     

牛体外成熟卵母细胞的孤雌激活及其胚胎体外培养方法的研究

本试验比较了在SOFaa培养体系下化学激活(5 μmol/L离子霉素5 min,2mmol/L 6-DMAP 4h)与电激活(1.3 kv/cm,60 μ s,1次脉冲)方法对囊胚率的影响,结果表明化学激活囊胚率显著高于电激活(12.30% vs 2.4%,p＜0.01),而二者的卵裂率(90.61%vs 94.40%)和囊胚细胞数(48.24±13.12 vs 38±3.56)均没有显著性差异(p＞0.05);同时比较了在SOFaa培养体系下第4天更换添加10% FBS的SOFaa液与在SOFaa液中连续培养7天对囊胚率的影响,结果更换添加FBS的培养液使囊胚率显著降低(3.69% vs 11.64%,p＜0.01).     

辽宁绒山羊和内蒙古绒山羊CSN3基因遗传多态性的比较分析

试验以辽宁绒山羊和内蒙古绒山羊为实验动物,采用PCR-RFLP技术对κ-酪蛋白基因(CSN3)的TaqⅠ酶切多态性进行分析,结果表明:辽宁绒山羊和内蒙古绒山羊2个山羊群体中均存在CSN3基因TaqⅠ酶切位点的多态性,且均有A和B 2个等位基因。辽宁绒山羊群体等位基因A和B的基因频率分别为0.46和0.54;内蒙古绒山羊群体中等位基因A和B的基因频率分别为0.31和0.69。CSN3基因TaqⅠ酶切位点的基因型分布在辽宁绒山羊群体中极显著(P<0.01)偏离Hardy-Weinberg平衡定理,在内蒙古绒山羊群体中符合Hardy-Weinberg平衡定理(P>0.05),但在辽宁绒山羊与内蒙古绒山羊2个群体间存在极显著(P<0.01)差异。     

辽宁绒山羊不同季节超排效果的研究

将28只辽宁绒山羊随机分成2组即繁殖季节组(9~11月,17只)和非繁殖季节组(4~7月,11只),采用CIDR FSH PG超数排卵处理方法进行超数排卵处理。结果表明:辽宁绒山羊在非繁殖季节、繁殖季节的超排效果即供体羊平均黄体数、平均回收胚数、平均可用胚数分别为15.88±1.33枚、11.18±0.93枚、9.53±0.75枚和13.45±1.77枚、11.91±1.64枚、8.00±1.00枚,非繁殖季节超排效果稍低于繁殖季节,两个处理组间差异不显著(P>0.05)。     

供体核和受体胞质在核移植重构胚重编程中的研究进展

供体核和受体胞质是影响核移植重构胚重编程的主要因素.文章讨论了供体细胞中的成熟促进因子、形态、核仁结构、组蛋白变化及其DNA甲基化和受体胞质在核移植重构胚重编程中的作用,并且综述了几种促进核移植重编程的方法.     

喹乙醇对小鼠生精细胞Bax基因表达的影响

喹乙醇具有一定的蓄积毒性、遗传毒性和诱变性等毒理作用。试验用2%吐温-80将喹乙醇配成悬浊液,对小鼠进行灌喂,分别于4 d,8 d,12 d颈椎脱臼处死小鼠取其睾丸组织;采用免疫组织化学方法,检测喹乙醇对小鼠睾丸生精细胞凋亡调控基因Bax蛋白表达的影响,进而研究喹乙醇对小鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。结果表明,Bax蛋白的表达随着药物浓度的升高而呈显著变化,即呈现一定的剂量—效应关系。     

辽宁绒山羊SRY基因编码区的分子特征研究

根据GenBank中山羊SRY基因序列设计一对引物,采用PCR在雄性辽宁绒山羊个体中扩增出了包含SRY基因整个编码区的特异片段,将特异PCR产物克隆到pMD18-T 载体中,转化DH5α菌,筛选出SRY基因的阳性克隆,进行了测序,将其序列与GenBank中部分偶蹄目动物的SRY基因序列进行同源性比较,用NJ法构建了系统进化树.结果表明,辽宁绒山羊SRY基因编码区长度为723 bp,共编码240个氨基酸,其中包含长度为231 bp 的HMG-box,位于编码区的第190至420位核苷酸之间,编码77个氨基酸(H64-A140).辽宁绒山羊SRY基因编码区序列与GenBank中山羊、绵羊、牛、牦牛、水牛、梅花鹿、麝香鹿及猪等偶蹄目动物的同源性分别为100%,97.09%,89.21%,89.21%,88.38%,87.55%,86.16%和68.04%;基于SRY基因编码区的核苷酸序列,构建的物种间系统树结果基本上与这些偶蹄目动物的传统系统分类相一致.     

促卵泡素与促黄体素对猪卵母细胞体外成熟的影响

探讨了促性腺激素(FSH、LH)对猪卵母细胞体外成熟的影响,最终找到了其合理的使用剂量。在成熟液中添加LH浓度分别为1,5,10 IU/mL时,与没有添加FSH与LH的对照组(15.9%)相比,成熟率有显著提高,成熟率分别为49.1%,30.0%,36.3%。LH浓度为1 IU/mL的实验组成熟率最高,显著高于对照组(p<0.05);然后以成熟液中只添加1 IU/mL LH为对照组,实验组分别添加1,5,10 IU/mL FSH。试验结果表明:添加FSH浓度为5和10 IU/mL时其成熟率分别为40.1%,27.6%,低于对照组(49.0%)。添加FSH浓度为1 IU/mL时其成熟率(49.1%)高于对照组(49.0%),但差异不显著。两组试验同时得出,随着LH与FSH添加浓度逐渐增加,成熟率呈下降趋势。通过本试验结果得出,在体外成熟培养猪卵母细胞时,各添加1 IU/mL LH与FSH时,得到最佳的成熟效果。