高效液相色谱—串联质谱法测定鲍鱼中硝基呋喃类代谢物残留量

本文用高效液相色谱-串联质谱法测定鲍鱼中3-氨基-2-噁唑烷基酮(AOZ)、5-甲基吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮(AMOZ)、氨基脲(SEM)、1-氨基-2-内酰脲(AHD)4种硝基呋喃类代谢物残留量的方法。0.2mol/L盐酸溶液水解鲍鱼组织中与蛋白结合的硝基呋喃类代谢物,用0.05mol/L的2-硝基苯甲醛溶液(2-NBA)37℃衍生16小时。用1.0mol/L磷酸氢二钾溶液调节pH至7.0~7.5,乙酸乙酯萃取。采用电喷雾电离,正离子扫描,选择反应监测模式(SRM)监测,内标法定量。本方法对4种硝基呋喃类代谢物标准曲线的线性回归系数均在0.99以上,线性范围为0.5μg/kg~20μg/kg。方法定量限为0.5μg/kg。在添加浓度0.5μg/kg~5μg/kg,回收率在75.2%~102.1%之间,相对标准偏差为3.56%~12.6%。说明本方法简单、灵敏,结果可靠,可满足实验室大量、快速分析的需求。     

高效液相色谱法测定鲈鱼体中喹烯酮的残留

本文建立了用高效液相色谱法测定鲈鱼中喹烯酮残留量的方法。样品采用乙酸乙酯提取,正己烷净化,高效液相色谱法进行定量分析。结果表明,在0.02～1.0μg/mL范围内喹烯酮的响应值与浓度呈良好线性关系,线性回归方程为Y=4.96×104X?6.15×10-1,相关系数R=0.9998,方法定量限为50μg/kg。在添加浓度20μg/kg～200μg/kg,回收率在70.0%～92.6%之间,相对标准偏差为1.86%～3.30%。该方法前处理过程简便快捷,准确性高,结果可靠,可满足实验室大量、快速分析的需求。     

闽南地区斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)神经坏死病毒的基因型与分子进化研究

本研究以闽南地区具有典型神经坏死病症状的斜带石斑鱼为材料,采用RT-PCR法对其进行病毒检测,对检测到的阳性序列进行双向测序和构建系统发育树,对病毒颗粒进行分离纯化,并通过分子进化模型分析病毒衣壳蛋白基因所受的选择压力。结果显示,采集到的6个石斑鱼样品均呈NNV阳性,系统树分析发现6个样品的PCR扩增片段均为RGNNV基因型序列,表明闽南地区感染石斑鱼的神经坏死病毒主要为RGNNV基因型病毒;通过PEG法对病毒进行分离提纯,获得直径为25~28 nm、呈二十面立体对称结构的无囊膜病毒颗粒;分子进化分析显示NNV外壳蛋白基因经历了纯化选择,表明病毒在进化过程中没有出现遗传变异并以相对恒定保守的速率进化。     

10种免疫相关基因在斜带石斑鱼组织中的表达分析

采用相对实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)技术,以β-肌动蛋白(β-actin)的表达量作为内参,对健康养殖斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)不同组织(头肾、心脏、肝脏、脾脏、鳃、肌肉、鳍、眼、肠道)中的10种免疫相关基因:免疫球蛋白(IgM)、CD4、MHCIIa、TCRβ、CD8a、MHCIa、ISP16、Mx、TNFR14、HSP90的mRNA表达量进行了研究。结果显示,10种免疫相关基因在斜带石斑鱼的10种组织中均有表达。其中体液免疫相关基因[免疫球蛋白(IgM)、CD4和MHCIIa]在鳃中的表达量最高,在其他组织部位的表达量相对较少。细胞免疫相关基因(TCRβ、CD8a和MHCIa)也是在鳃中的表达量最高,在眼、肌肉、肝和肠的部位表达量相对较少。ISP16在鳃和肝中的表达量较高,在肌肉和肠中的表达量较低。Mx在鳃中的表达量较高,在肌肉和肠的表达量较低。TNFR14在眼的表达量较高,在肠的表达量较低。HSP90在鳃和肝中的表达量相对较高,在心和肌肉的表达量较低。     

地黄花叶病毒河南分离物的CP基因克隆及序列分析

为探究地黄花叶病毒(rehmannia mosaic virus, ReMV)在河南地黄上的发生与分布及其基因变异情况,从河南温县中草药园采集若干疑似受病毒侵染而呈现出花叶、枯萎等症状的地黄样品,用酚仿法提取地黄样品总RNA,通过PCR扩增目的基因地黄花叶病毒外壳蛋白(coat protein,CP)基因片段,经过回收纯化后,克隆至pMD19-T载体中,转化大肠杆菌DH5α,随机挑选4个阳性单克隆测序,最后将结果与NCBI数据库中已有的核苷酸序列进行比对,并结合NCBI数据库中已发布的不同地区ReMV分离物的CP基因序列,构建基于CP^ReMV核苷酸序列的ReMV不同地区分离物的系统进化树。结果表明：成功克隆出ReMV河南分离物的CP基因,将该序列上传至NCBI后获得GenBank登录号为OM964874;通过构建系统发育进化树,该分离物与郑州、山西、韩国报道的ReMV分离物亲缘关系较近,可能有相近传染源,而与美国、日本的分离物亲缘关系较远,存在一定的遗传分化,序列一致性分析结果与此一致。综上,这一研究扩大了ReMV群体的传播范围,丰富了其基因信息,为揭示ReMV的...     

茄子嫁接技术探索

茄子是人们喜食的大宗蔬菜之一 ,但生产上土传性病害较重 ,影响了茄子的生产和消费 ,由于目前尚无抗病品种 ,国内外主要采用嫁接技术来进行防治。因此对茄子嫁接技术的研究显得非常必要。1　 材料和方法1.1　材料　　云南野生茄、本地野生茄作砧木 ,三月茄、渝早茄 1号作接穗。1.2　方法　　用作砧木的云南野生茄、本地野生茄经催芽后于 1998年 9月 2 8日播种于塑料大棚内营养钵中 ,用作接穗的三月茄、渝早茄 1号经催芽后于 1998年10月 8日播种于塑料大棚内营养钵中。待砧木幼苗长到 4～ 5叶 1心 ,接穗幼苗长到 3～ 4叶 1心时 ,采用切接法、…     

矮化密植苹果梨园效益分析

苹果梨是喜温凉、耐寒冷的中温带果树，适于年平均气温４℃以上，≥１０℃积温２４００℃以上，最低气温在－３０℃以内，无霜期１３５ｄ以上的地区栽培。苹果梨含有丰富的营养物质，口味鲜美，便于贮存，是辽宁省梨产区主栽果树品种之一。果树生产逐步发展，栽培、管理技...     

浅谈杂交稻再生制种技术

如何充分利用光温资源提高杂交稻制种效益,近年来做了许多探讨,1990年将乐县有三个乡进行了试验。本文着重对杂交稻再生制种技术做些粗浅分析。一、杂交稻再生制种现状及潜力据1989年建宁、明溪、建瓯和1990年将乐县大源乡等地制种的情况(表1)看,1989年的三个县杂交稻制种,头季平均亩产     

加入世界贸易组织对中国家禽业的影响及其对策

一、中国家禽业生产和消费的现状及特点中国现代化的家禽业生产得益于改革开放,自80年代初以来不断地引进并快速地吸收了国外先进技术和经验如:家禽品种、生产设备、饲养管理经验和一系列实际操作规程,使得中国现代化的家禽业生产从无到有,发展到禽蛋和禽肉生产量位居世界前列的水平,我们称之为中国家禽业横切入世界家禽业发展的潮流,并努力保持了同步发展。(一)中国家禽业现状中国是世界家禽业生产和贸易大国,l998年禽蛋和禽肉产量达到2223.6万吨和118.7万吨,分别占世界总产量的41.5%和8.4%,禽肉的进出口贸易量一直位居世界前列,1998年的出…     

中药治疗马驹溶血病

笔者收治马驹溶血病6例,用中药治愈4例;其中生后8小时发病1例,10到30小时发病2例,4 天发病1例,现报道如下.