看麦娘对甲基二磺隆靶标抗性的快速检测

甲基二磺隆是防除小麦田看麦娘Alopecurus aequalis等禾本科杂草的主要除草剂品种之一,但目前中国山东、江苏及安徽等地已有部分看麦娘种群对其产生了抗性。ALS基因197位点突变是看麦娘对甲基二磺隆产生抗性的重要机理,根据突变型和野生型看麦娘在197位点处碱基序列的不同,本研究设计出了一种衍生性酶切扩增多态性序列(dCAPS)分子标记方法,可用于197位点突变的快速检测。通过在引物D197F序列的3′ 端引入一个错配碱基,扩增所得不同种群看麦娘的ALS片段经限制性内切酶BamH I酶切后表现出多态性:野生敏感型分别产生了200和36 bp的2个条带;纯合突变型因无法被切开,只有236 bp的一个条带;而杂合突变型则同时产生了上述3个条带。该dCAPS检测结果准确、可靠,与经典的整株水平测定结果一致,并且可同时检测197位点上任一形式的突变。研究结果可为看麦娘等禾本科杂草对甲基二磺隆靶标抗性的快速检测提供理论依据。     

氯吡嘧磺隆与烟嘧磺隆混用对玉米田杂草防除效果及安全性

为明确氯吡嘧磺隆与烟嘧磺隆混用对玉米田杂草防除效果及安全性,采用田间药效试验方法对其进行了研究。研究发现:氯吡嘧磺隆(15、17.5、20、22.5、25 g a.i./hm2)与烟嘧磺隆(45、52.5 g a.i./hm2)混用对香附子、藜、铁苋菜、苘麻、马唐均有较高的防效,总体鲜重防效大于95%,尤其对香附子鲜重防效大于97%。氯吡嘧磺隆和烟嘧磺隆混用对玉米是安全的,通过氯吡嘧磺隆与烟嘧磺隆的混用,玉米产量增产率均高于10%。本研究结果表明,氯吡嘧磺隆与烟嘧磺隆混用可有效防除香附子、藜、铁苋菜、苘麻、马唐等夏玉米田常见杂草,尤其是对香附子具有优异的防除效果,并且对玉米安全。     

抗精噁唑禾草灵和甲基二磺隆看麦娘ACCase和ALS基因突变

为明确看麦娘Alopecurus aequalis抗性种群YL的靶标抗性机制,采用基因克隆法对看麦娘抗性和敏感种群间乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)和乙酰乳酸合成酶(ALS)基因序列进行扩增、克隆和测序,比对二者ACCase和ALS基因序列的差异,探寻其产生抗药性突变的基因位点,同时测定该突变型抗性种群YL对不同ACCase和ALS抑制剂类除草剂的交互抗性。结果显示,与看麦娘敏感种群TL相比,抗性种群YL的ACCase基因CT区域第2 041位氨基酸由异亮氨酸(ATT)突变为天冬酰胺酸(AAT),ALS基因Domain A区域第197位氨基酸由脯氨酸(CCC)突变为精氨酸(CGC)。看麦娘抗性种群YL对ACCase抑制剂炔草酯产生了高水平抗性,抗性倍数为43.96,对高效氟吡甲禾灵和精喹禾灵产生了中等水平抗性,抗性倍数分别为18.33和15.87,对唑啉草酯、烯草酮和烯禾啶较敏感;对ALS抑制剂氟唑磺隆产生了低水平抗性,抗性倍数为8.39,对啶磺草胺和咪唑乙烟酸较敏感。表明ACCase基因第2 041位和ALS基因第197位氨基酸突变是导致看麦娘抗性种群YL对精噁唑禾草灵和甲基二磺隆同时产生抗性的重要原因之一。     

牛筋草ISSR-PCR反应体系的建立与优化

以牛筋草地上组织为材料,采用正交优化和单因子试验两种方法对影响牛筋草ISSR-PCR体系的Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度和DNA模板浓度5个因素进行优化试验,建立适合牛筋草ISSR-PCR的反应体系.结果表明,牛筋草ISSR-PCR反应体系的最佳条件为:Mg2+1.75 mmol/L,dNTP 0.4 mmol/L,Taq DNA聚合酶1 U/25 μL,引物0.3μmol/L,模板DNA 80 ng/25μL,10×PCR Buffer 2.5 μL/25 μL.利用优化体系进行牛筋草的ISSR-PCR反应,可获得稳定性高、重复性好、背景清晰的电泳结果.     

不同小麦品种对双氟磺草胺的耐药性差异及机理

室内采用平皿法和酶活力测定法探讨了不同小麦品种对双氟磺草胺的耐药性差异及其机理。结果表明,不同小麦品种根对双氟磺草胺的耐药性差异较大,其中济宁13对该药剂最为敏感,IC50值仅为0.221 2 μg/mL,烟农15、枣20-28、济南17与之相当(耐药性倍数为1.09~1.99),泰山9818、山农6号和潍麦8号耐药性较强(耐药性倍数为10.33~13.92)。酶活力测定结果表明:虽然耐药型品种潍麦8号和敏感型品种济南17对双氟磺草胺的耐药性差异显著,但其靶标酶乙酰乳酸合成酶(ALS)在离体条件下对该药剂的敏感性却无显著差异;在活体条件下,二者ALS活力均可很快恢复,其中潍麦8号恢复较快。经双氟磺草胺处理后,与济南17相比,潍麦8号的代谢酶谷胱甘肽- S -转移酶(GSTs)相对活力变化幅度较大且反应时间较短,在第2 d即可达到峰值1.460,而济南17在第3 d才达到峰值1.398。研究表明,不同小麦品种对双氟磺草胺的耐药性存在差异 的原因之一可能是由于GSTs对双氟磺草胺的代谢差异,而与靶标酶ALS对药剂的敏感程度无关。     

甲酯化植物油助剂对除草剂的药效增强作用

为明确不同甲酯化植物油助剂对除草剂活性的影响,采用温室盆栽法测定了甲酯化油菜籽油、棉籽油、花生油、玉米油、大豆油、葵花籽油、亚麻籽油和蓖麻油8种甲酯化植物油助剂对磺草酮、莠去津、烟嘧磺隆和精喹禾灵4种常用茎叶处理除草剂防除稗草、反枝苋的影响.结果表明,8种助剂对供试4种除草剂均有不同程度的药效增强作用,其中对磺草酮和莠去津的药效增强幅度大于对烟嘧磺隆和精喹禾灵的药效增强作用,前者为30%～70%,后者则小于20%.相对而言,在供试8种助剂中,以甲酯化油菜籽油、棉籽油和花生油助剂对除草剂的药效增强效果较好,甲酯化玉米油、大豆油和葵花籽油助剂次之,而甲酯化亚麻籽油和蓖麻油助剂对除草剂的药效增强效果较差.     

不同玉米品种对烟嘧磺隆的敏感性差异

烟嘧磺隆是玉米田重要的芽后除草剂,采用温室盆栽和皿内生测法比较了32种不同玉米品种对烟嘧磺隆的敏感性差异。温室盆栽测定结果表明,在烟嘧磺隆大田常规用量60g/hm2下,各品种对药剂的敏感性差异显著,泰玉2号(正交)、金珍珠、泰玉15号、紫糯等7个品种对烟嘧磺隆表现较为敏感,株高抑制率均在40.4%以上,鲜重抑制率在31.37%以上,表现为植株生长受到抑制、叶片黄化、新叶牛尾状扭曲不能正常抽出;淄玉2号、泰玉2号(反交)、聊玉18、鲁原单33、鲁原单14、郑单958等品种的株高抑制率在30.6%～38.1%,敏感性略低,植株外部形态无明显变化;而农大2008、农大108、鑫玉958和泰玉12号生长正常,耐药性相对较高,无明显药害症状。其它品种介于豫单2002和鑫玉958之间。皿内生测法测定表明,烟嘧磺隆对玉米幼苗主根长的抑制存在较大差异,根据IC50值,各品种敏感性依次为:泰玉2号(正交)>金珍珠>泰玉7号>紫糯>泰玉2号(反交)>泰玉15>费玉5号>新单23>户单2000>聊玉19>泰玉12>鲁原单33>聊玉18>农大108>农大2008。     

烟嘧磺隆的研究与开发进展

本文概述了烟嘧磺隆除草剂的发现过程、作用机理、合成研究及其应用开发进展和市场前景。     

泰安市主要草坪杂草种类、发生危害及防除适期的调查

泰安市草坪地常见杂草有52种，分属20个科，以菊科、禾本科和十字花科杂草为多。主要杂草有牛筋草、马唐草、莎草、荠菜、苦荬、反枝苋、藜。7－9月是杂草危害的关键时期。草坪杂草的防除应坚持的原则是“土壤处理为主，茎叶处理为辅”，第一次土壤处理时间宜在5月上中旬。     

十三种杀虫剂对七星瓢虫的毒力研究

本文分别采用微量点滴法和玻璃药膜法测定了6种杀虫单剂及7种杀虫混剂对七星瓢虫4龄幼虫及其成虫的室内毒力。结果表明：6种单剂对七星瓢虫成、幼虫的毒力顺序完全一致，即高效氯氟氰菊酯＞辛硫磷＞灭多威＞甲基对硫磷＞甲胺磷＞硫丹；7种混剂对以上2种虫态的毒力顺序有所差别，但其中均以甲胺磷 硫丹表现最为安全；联合毒力以甲基对硫磷 辛硫磷、高效氯氟氰菊酯 辛硫磷一致表现为拮抗，灭多威 硫丹、甲胺磷 硫丹一致表现为增毒，高效氯氟氰菊酯 灭多威一致表现为相加作用，而灭多威 甲基对硫磷、高效氯氟氰菊酯 硫丹对2种虫态的联合毒力表现不一。