粉红聚端孢菌胞外几丁质酶纯化、特性及抗菌活性

 粉红聚端孢菌(Trichothecium roseum)在SMCS中恒温摇床(200 r/min,28℃)上培养12 d,诱导产生了大量的胞外几丁质酶。培养滤液经(NH₄)₂SO₄分级沉淀、DEAE-Sepharose FF阴离子交换柱层析和CM-Sepharose FF阳离子交换柱层析获得了SDS-PAGE纯的胞外几丁质酶,分子量约为39k Da。几丁质酶最适作用温度为40℃,最适pH范围为4.0~7.0。抗菌活性显示,纯酶对供试病原菌都有不同程度的抑菌作用,其中对棉花黄萎菌的抑制作用最强。     

菌生真菌Olpitrichum africanum寄生性初步研究

对Olpitrichum africanum (Saccas)Zhang et Li com. nov.的寄生性研究结果表明:(1)O.africamm是一种接触性活体营养菌生真菌,它产生球形或指形的吸收细胞从寄主真菌上取得营养;(2)O.africanum的寄主范围较广,能在镰刀菌属、链格孢属和芽枝霉属的17种真菌上寄生;(3)O.africaunm不能生长在缺乏寄主的GYA培养基上,当在GYA培养基上加寄生菌的菌丝提取液时,可以在GYA培养基上获得它的纯培养;(4)O.africanum对营养的要求较特殊,它仅在酵母浸汁和葡萄糖或果糖为氮源和碳源的培养基上生长.     

玉米穗粒腐病的病原菌鉴定及致病性测试

在陕西省25个县调查玉米穗粒腐病,采集病穗标样570份。霉坏籽粒达到果穗面积1/3以上的发病严重果穗占35.61％。分离得到1308个菌株,鉴定为17个种,分属14个属,其中串珠镰刀菌出现频率最高,占42.58％,其次为禾谷镰刀菌,占20.34％。对串珠镰刀菌、禾谷镰刀菌等10种主要病原菌进行致病性测试,平均病级1.14～2.41,病情指数22.9～48.4。串珠镰刀菌是玉米穗粒腐病的优势病原菌,禾谷镰刀菌为次优势菌种。     

疏绵状嗜热丝孢菌糖化酶基因（gla）的克隆及在毕赤酵母中的表达

本研究以疏绵状嗜热丝孢菌(Thermomyces laltltginosus)cDNA为模板,克隆了糖化酶基因(gla),序列分析表明gla的开放阅读框由1854个核苷酸组成,编码617个氨基酸.根据氨基酸序列推算该酶的分子量为64 kD,属于糖苷水解酶第15家族,具有该家族催化保守区的典型特征.PCR扩增gla的成熟蛋白编码基因,构建表达载体,经线性化后电击转化导入巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris GS115),并成功进行了表达.重组酶经摇瓶发酵后酶活可达11.6 U/mL,经硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换等步骤纯化了该重组蛋白,SDS-PAGE显示该重组蛋白大小约为67kD,比推测的蛋白分子量稍大,可能与该蛋白的糖基化有关.该重组酶的最适反应温度和最适pH值分别为60℃和5.0,该酶具有较高的热稳定性,70℃保温20 min后剩余酶活为54%.     

黄蓝状菌一种几丁质酶的纯化、性质及抗菌活性

黄蓝状菌Talaromyces flavus在SMCS液体培养基中置于恒温摇床(200r/min,27．5℃)上培养13d，诱导产生大量的几丁质酶。培养滤液经硫酸铵分级沉淀，DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析、Phenyl-Sepharose Fast Flow疏水层析、Sephacvl S—100分子筛层析得到了凝肢电泳(SDS-PAGE)谱带单一的几丁质酶，其分子量为41kD。其最适反应温度为50℃，最适pH值是5。Mn^2 对其有明显的激活作用，Cu^2 、Fe^2 对其有强烈的抑制作用。抗菌活性显示，其对供试病原菌具有明显的抑菌作用。     

玉米穗粒腐病接种技术及品种抗病性鉴定研究

以玉米穗粒腐病的主要高原菌串珠镰刀菌ＦｕｓａｒｉｕｍｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅＳｈｅｌｄ为菌源，采用４种接种方法比较结果，以针刺果穗较深处（籽粒与穗轴间）发病最重，花丝喷雾法发病最轻；接种时期以乳熟期接种为好；接种浓度以１０×４０倍，每视野６０个分生孢子接种效果最好；接种量以每果穗接种２．５ｍＬ孢子悬浮液发病重，效果好。     

菌寄生菌物与寄主菌物相互作用的研究进展

80年代以来,菌寄生菌物与寄生菌物的相互作用研究取得较大进展,主要表现在以下几个方面:(1)菌寄生菌物到达寄主菌物之前通常存在趋向性;(2)菌寄生菌物与寄主菌物的相互识别是通过”凝集素一糖“实现的;(3)菌哥生菌物与寄主菌物识别和接触之后,菌丝间的相互作用是多种多样的,不同类型的菌寄生菌物有不同的表现形式;(4)菌寄生茵物产生的细胞壁降解酶在菌寄生过程中起重要作用.     

嗜热真菌Thermomyces lanuginosus热稳定蛋白酶的纯化及特性

嗜热真菌Thermomyces lanuginosus在液体培养基中于50℃振荡培养1周后，培养液经硫酸铵分级沉淀、DEAE－Sepharose离子交换层析、Phenythl-Sepharose疏水层析，得到了凝胶电泳均一的蛋白酶。用SDS－PAGE测定分子量为55kD，该酶的最适反应温度为70℃，最适作用pH值为6.0。该酶具有很好的耐热性，在pH值6.0 50℃条件下酶是稳定的；60℃保温1h，仍保留92％的原酶活性；90℃时酶活半衰期为6min，抑制剂试验证明，该酶为丝氨酸蛋白酶。     

一株茶树冰核细菌拮抗菌的筛选及鉴定

从茶园土壤中分离出菌株TS1,通过含菌平板测定,确定其对茶树冰核细菌具有拮抗作用。通过菌株的形态特征观察、生理生化指标测定、16 S rDNA序列测定及序列同源性分析,将TS1菌株鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。明确了拮抗菌的种属,为茶树霜冻害的生物防治奠定了基础。     

嗜热毛壳菌多糖单加氧酶的性质及协同作用研究

多糖单加氧酶(polysaccharide monooxygenases, PMOs)可以氧化裂解纤维素,为纤维素酶提供更多的结合位点,对提高纤维素酶的活性具有重要意义。本研究旨在探索嗜热毛壳菌(Chaetomium thermophilum)AA9家族PMO5456的氧化方式,以及与不同类型纤维素酶的协同作用。通过对PMO反应产物进行鉴定,确定PMO5456具有C1、C4、C6位氧化。设置时间梯度,以PMO5456预处理的磷酸膨胀纤维素(PASC)为底物,测定PMO5456与嗜热毛壳菌三种纤维素酶EG1、CT2、CBH1的协同作用,结果显示随着PMO5456预处理纤维素时间的增加,纤维素酶的活性随之增加。PMO5456对三种纤维素酶EG1、CBH1、CT2的降解效率分别提高了3.6、2.2倍和60%。