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131.
以pcDNA3.1-pIL-18为模板,采用PCR技术扩增到了猪白细胞介素18(IL-18)的成熟蛋白基因,通过KpnⅠ+SacⅠ双酶切及连接反应,构建了pET32c—pIL—18原核表达质粒。经过限制性内切酶分析、PCR鉴定及DNA序列测定证实,重组质粒中的基因片段连接正确。之后,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),于37℃、1.0mmol/L IPTG条件下诱导表达。菌体裂解产物经SDS—PAGE分析,在分子质量约为33ku处出现了预期的目的蛋白。用8mol/L脲对表达产物变性,经Ni^2+NTA柱纯化,透析复性,得到了纯化的IL-18蛋白。Western—blot分析证实,纯化的重组IL-18蛋白具有反应活性。上述研究结果为重组IL-18的应用奠定了基础。 相似文献
132.
133.
134.
沂蒙山区境内野生羊肚菌资源的调查结果表明.该区分布有3种羊肚菌:粗柄羊肚菌、尖顶羊肚菌和普通羊肚菌。依据调查情况,结合室内观察分析,介绍了其生物学特征、生境条件、分布规律并提出开发建议。 相似文献
135.
136.
中小型饲料企业的困局与出路 总被引:1,自引:0,他引:1
饲料企业之间发展是不均衡的,有专家戏称大型企业为“国家队”。凭借资源整合和联合兼并,实现快速发展;中型企业属于“地方队”,凭借产业链建设和盈利模式来竞争:小型企业属于“游击队”,凭借低成本和灵活经营与国家队或地方队打价格战、人才挖掘战、区域服务战、赛质比量竞争战、有奖销售促销战等多种战术。饲料行业的激烈竞争与销售困难也反映了中小企业所面临的困局。[第一段] 相似文献
137.
猪白细胞介素-18基因表达及重组蛋白的纯化 总被引:1,自引:0,他引:1
以pcDNA3.1-IL18为模板进行PCR扩增获得猪白细胞介素-18(IL-18)的成熟肽基因,以KpnⅠ、SacⅠ双酶切PCR产物作为供体,KpnⅠ、SacⅠ双酶切的pET41c和pET32c作为载体,连接载体供体,转化DH5α,经双酶切、PCR鉴定及测序筛选出阳性重组质粒,并命名为pET41c-IL18和pET32c-IL18。将pET41c-IL18和pET32c-IL18转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),用1 mmol/L IPTG 37℃诱导表达。SDS-PAGE及W estern-blotting分析结果表明,所表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在,pET32c-IL18重组蛋白分子质量约33 ku,与预期大小相符。将包涵体提取物用8 mol/L脲变性,经N i-NTA柱纯化,透析复性,得到了纯化的IL-18蛋白。 相似文献
138.
139.
以107个/ml微小根毛霉(Rhizomucorpusilus)孢囊孢子悬液颈静脉接种2月龄山羊,每只5ml,每日1次,连续3日,经88d观察3/4只山羊死亡。病羊临床表现精神沉郁,消瘦,体温升高,腹泻,后肢瘫痪,白细胞总数及嗜中性白细胞成倍增加,全血GSH-PX活性降低,S-GOT、S-GPT和AKP活性升高,血清胆固醇值上升,但以上各项血液生化指标变化与对照羊相比差异不显著(p>0.05)。病理变化为全身扩散性毛霉菌病,其典型病变在肺脏,整个肺脏遍布灰白色圆形小结节。镜险肺结节中心为毛霉菌丝或碎片,周围淋巴细胞、单核细胞包绕。腿肌大部分肌束呈凝固性坏死,周围微血管内形成血栓 相似文献
140.
生产实践中,常常有母猪窝产活仔数多于有效乳头数的现象,如何对高产母猪的仔猪进行补养,以期能够均衡健康生长,长期以来,诸多学者、专家和饲养者积累了不少的经验,如仔猪寄养法等,在大中型猪场中起了举足轻重的作用。但是,对于小型猪场及农户饲养的母猪来说,由于... 相似文献