河南省规模化猪场支气管败血波氏杆菌的流行病学研究

为了解河南省规模化猪场支气管败血波氏杆菌的流行病学情况,2015—2017年应用染色镜检、生化试验和PCR检测等方法进行支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)的分离与鉴定,从全省规模化猪场有明显萎缩性鼻炎症状猪的1 022份样品中,共分离鉴定到82株Bb,总分离率为8.0%。其中,有30份组织病料只分离出波氏杆菌,52份共感染病料以S.suis,HPS,E.coli,Pm居多,且鼻拭子分离率低于肺脏组织。说明Bb在河南省猪群的感染十分普遍,且与其他细菌协同感染情况非常普遍,在猪萎缩性鼻炎的发生中具有重要作用。     

猪流行性腹泻病毒CH-HeNXX-2017株全基因组序列测定与分析

为了解猪流行性腹泻病毒在河南流行毒株全基因组遗传进化水平,应用RT-PCR方法从疑似猪流行性腹泻病毒感染的病料中扩增出全基因组序列,并将PCR产物纯化后连接pMD20-T载体,转化JM109感受态细胞,挑选单克隆进行测序,获得的序列经过DNA STAR中Edit Sequence软件对全基因组序列进行拼接。结果表明,猪流行性腹泻病毒CH-He NXX-2017株全长28 038 nt(除去poly A);进化树分析显示,该毒株与IA1,USA Colorado2013,MN和PC22A等毒株亲缘关系较为接近,与国内外早期分离株如CV777,LZC,DR13等毒株亲缘关系较远。揭示猪流行性腹泻病毒一直处于不断的进化中,需要一直密切监控病毒进化趋势,为临床诊断以及疫苗研发等提供理论参考。     

猪圆环病毒病的血清学调查及防治措施

猪圆环病毒病是由猪圆环病毒引起的一种新的病毒性传染病.自1974年Tischer首次发现猪圆环病毒以来,随着对该病毒研究的深入,根据其致病性和基因组的差异,将其分为无致病性型PCV-1和有致病性型PCV-2.     

携带新德里金属β-内酰胺酶的猪源大肠杆菌全基因组测序及植物提取物药物筛选

为了解大肠杆菌携带新德里金属β-内酰胺酶（New Delhi metallo-β-lactamase，NDM）NDM耐药基因情况及筛选敏感植物提取物，为携带NDM的超级耐药大肠杆菌的防控和药物研究奠定基础。采用16S rRNA菌种鉴定，PCR筛查菌耐药基因，blaNDM、blaTEM和AmpC酶耐药基因的确认，全基因组测序，BLAST和MEGA软件对序列进行生物信息学分析、系统进化树分析、NDM亚型鉴定和6种植物提取物药敏药物筛选研究。结果表明，从2021年（1-12月）临床猪腹泻病例中分离鉴定的91株大肠杆菌（Escherichia coli，E.coli）中鉴定出1株同时携带新德里金属β-内酰胺酶NDM4、NDM5和β内酰胺酶blaTEM、AmpC酶的大肠杆菌（HN2187）。对其进行11种抗生素和6种植物提取物药物敏感性测试，结果显示HN2187菌株对其均耐药。而HN2187对血根碱、贯叶连翘提取物敏感，对黄芩、姜黄素、千里光和大蒜提取物耐药。HN2187产B类酶，携带NDM4、NDM5、blaTEM、AmpC酶耐药基因，其中blaNDM-4位于质粒pNDM4-HN2187（Plasmid B）上，blaNDM-5位于质粒pNDM5-HN2187（Plasmid A）上，blaTEM1位于质粒pTEM1-HN2187（Plasmid B）上，AmpC酶耐药基因位于染色体上，分别介导blaNDM-4、blaNDM-5、blaTEM和AmpC耐药基因，是耐药菌传播的重要载体。以上研究表明，携带NDM4和NDM5的多重耐药菌已在养殖场传播和流行，应加强该类耐药基因的流行调查、监测和新药物研究，为临床超级细菌和多重耐药菌感染的流行和防治提供理论基础。     

胸膜肺炎放线杆菌多重耐药菌株与敏感菌株的差异蛋白质组学分析

为了解猪接触传染性胸膜肺炎放线杆菌临床分离菌株与标准菌株蛋白质差异表达情况，采用定量差异蛋白质组学研究策略，以临床分离菌株(HN201616)与标准株(CVCC261)的细菌全蛋白质为研究对象，鉴定差异表达蛋白质及生物信息学分析。结果显示：共鉴定出1 373个蛋白质，其中显著差异的蛋白质数为395个[显著性差异蛋白质数目按照差异倍数(FC)≥1.5和FC≤0.67,P≤0.05进行相应的筛选],包括上调蛋白质205个，下调蛋白质190个；鉴定出的与抗生素耐药相关的蛋白质主要有二氢叶酸还原酶、外膜蛋白、麦芽糖蛋白、二氢蝶酸合成酶、谷胱甘肽转移酶、丙酮酸激酶、谷氨酰水解酶、ATP-结合盒家族蛋白等。这些结果将有助于深入探索猪接触传染性胸膜肺炎放线杆菌多重耐药机制，为研发新型抗菌药剂和筛选潜在药物靶点提供思路。