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[目的]旨在筛选出能有效防治棉花枯萎病的化学药剂,减少农户用药盲目性,提高病害防治水平,增强新疆棉花的经济效益。[方法]通过分离纯化、柯赫氏法则和序列分析鉴定4株棉花枯萎病病原菌菌株,并选取4种杀菌剂1000亿/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂、8%宁南霉素水剂、0.3%四霉素水剂、80%代森锰锌可湿性粉剂,分别对编号为DD64、DD89、DD11和DD22病原菌菌株进行防治药剂室内毒力测定。[结果]经鉴定,4株病原菌菌株均为强致病性菌株。抑菌率结果表明,测定北疆地区DD64和DD89菌株定,1000亿/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂抑菌率最好为96.47%和95.29%,四霉素次之。南疆地区DD11和DD22菌株经测定,0.3%四霉素水剂抑菌效果理想为97.91%和99.35%,其次是1000亿/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂。在DD64和DD89毒力测定时发现,8%宁南霉素水剂毒力最强,EC50值为0.044 mg/L和0.046 mg/L。[结论]0.3%四霉素水剂在生产上建议在病害发生初期使用以防止病害的扩展和蔓延,1000亿/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂和8%宁南霉素水剂可作为轮换药剂对该类病害进行有效防治。 相似文献
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[目的]通过RT-PCR获得拟南芥AtCOR15a基因的ORF全长,经酶切、连接,以pET-28a(+)为原核表达载体.构建成pET28a-COR15a的重组表达载体,研究该基因在大肠杆菌中的表达情况,为进一步研究该基因的功能奠定基础.[方法]根据拟南芥AtCOR15a基因序列设计特异引物,利用RT-PCR的方法扩增目的基因,构建原核表达载体pET28a-COR15a,并将此重组质粒转化到大肠杆菌菌株BL21(DE3)中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷( IPTG)诱导表达,SDS-PAGE电泳分析,验证其蛋白表达量,并对其体系进行优化.[结果]AtCOR15a在大肠杆菌中成功表达,在37℃条件下诱导表达量最大,而30和16℃条件下蛋白表达量降低,IPTG浓度0.2~1.0 mmol/L对蛋白的表达量影响不大,并没有明显差异.但通过在不同诱导时间取样分析,结果发现加入IPTG后诱导5 h蛋白表达量最大,而8 h后逐渐降低.[结论]构建的原核表达载体在大肠杆菌中能高效表达,AtCOR15a融合蛋白分子量大约为19 kD,为进一步研究该基因的功能奠定了基础. 相似文献
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低温胁迫对三种早春短命植物生理生化指标的影响 总被引:2,自引:1,他引:1
[目的]以三种新疆早春短命植物绵果荠、卷果涩荠和粗果庭荠苗期叶片为试验材料,分别测定4℃低温胁迫处理对各材料抗冷性生理生化指标的影响,鉴定三种植物的抗冷能力.[方法]在苗期对三种植物进行4℃低温胁迫处理,分别测定处理0、3、6、9、12、15、18、21和24 h时各材料叶片内相对电导率、丙二醛含量、游离脯氨酸含量、可溶性蛋白含量、可溶性糖含量和相关酶活性的变化,使用隶属函数法确定各植物的抗冷性大小.[结果]随着胁迫时间的延长,三种植物苗期叶片中相对电导率、丙二醛含量、游离脯氨酸含量、可溶性蛋白含量、可溶性糖含量、SOD酶活性及POD酶活性变化趋势相同,均呈逐渐上升的趋势,但变化率存在差异;使用隶属函数值分析,三种植物的抗冷性从大到小依次为:卷果涩荠>绵果荠>粗果庭荠.[结论]单一生理生化指标很难反映植物抗冷能力,试验所选指标中相对电导率、游离脯氨酸含量、可溶性糖含量、SOD酶活性及POD酶活性能较好反映各材料的抗冷性大小,可作为早春短命植物抗冷性鉴定的参考指标,对抗冷种质资源发掘及抗逆育种有一定指导意义. 相似文献
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[目的]分析梭梭同化枝及其叶苞状虫瘿的转录组差异,为揭示梭梭叶苞状虫瘿形成的分子机制及梭梭害虫防治提供理论参考.[方法]以梭梭同化枝及其叶苞状虫瘿为材料,利用Illumina HiSeq 2000高通量测序平台对其进行转录组测序及差异表达基因分析,并通过测定可溶性糖和叶绿素含量验证分析结果.[结果]转录组测序共获得159147条Unigenes,平均长度为551 bp,N50为752 bp,在Swissport、GO、Pfam、NR、NT、KOG/COG和KEGG等数据库均被注释的Unigenes有8521条(5.35%),至少在1个数据库注释的Unigenes有66714条(41.91%),共有49066条Unigenes(30.83%)与物种匹配成功.以q value<0.005且|log2FoldChange|>1为条件,共筛选出3444条差异表达的Unigenes,其中,有1299条上调表达,2145条下调表达.与梭梭同化枝相比,梭梭叶苞状虫瘿上调表达差异基因富集在代谢过程、有机物代谢过程、催化活性、碳代谢作用和核糖体代谢等通路,下调表达基因富集在细胞、细胞组成、胞内细胞成分和细胞器、嘧啶代谢、细胞周期、DNA复制、光合作用及苯丙烷和类黄酮生物合成等过程.不同发育期梭梭叶苞状虫瘿中的可溶性糖含量高于梭梭同化枝,而叶绿素含量均低于梭梭同化枝,进一步验证梭梭叶苞状虫瘿的糖代谢相关基因上调表达而光合作用相关基因下调表达的转录组分析结果.[结论]梭梭叶苞状虫瘿中核糖体数量增加,翻译过程加快,代谢水平提高,糖代谢产物积累,但其光合作用降低,伸长与生长减慢,推测其通过吸收利用同化枝的养分以满足自身需求. 相似文献
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用CTAB法提取了6种鹰嘴豆品种总DNA,使用RAPD技术对其进行了品种鉴定.从113种随机引物中筛选出7种扩增较稳定的引物.来扩增6种嘴豆品种总DNA,共扩增出29条带,每种引物扩增出3~7条带;多态性条带共16条,多态性比例为55.17%.利用DPS软件所做的统计分析和聚类分析结果表明6个品种间的相似系数在0.4286~0.8462,平均相似系数为0.6416;可聚成2类:165号、阿克苏号、阿瓦提号可聚为A类;88-1号、176号、185号可聚为B类,同一类品种间体现了一定的相关性. 相似文献
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提取高质量的植物基因组DNA是顺利开展RAPD分析研究的一项重要基础工作,在目前比较广泛使用的植物基因组DNA的提取方法中,改进的Doyle和Doyle等人的CTAB植物基因组DNA提取法被证实为一种简单、高效的方法,值得推荐. 相似文献
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植物能够对经历过的高温胁迫产生"胁迫记忆",从而更好地适应反复发生的高温胁迫。鉴定梭梭热激因子基因HaHsfA5序列和结构特征,分析其在梭梭幼苗高温胁迫记忆中的表达规律,对梭梭高温胁迫适应性研究有重要理论价值。本研究内容包括:以反转录PCR克隆HaHsfA5读码框全长序列;以在线生物信息学工具预测HaHsfA5的蛋白理化参数、蛋白结构域和基元;进行HaHsfA5的序列比对和进化树分析;以qRT-PCR分析HaHsfA5在高温胁迫记忆中的表达。生物信息分析显示HaHsfA5为分子量较小、不稳定、亲水的HSFs家族A亚族蛋白,与甜菜、菠菜、藜麦的Hsf A5有较近亲缘关系。qRT-PCR分析显示经过高温胁迫锻炼的梭梭幼苗在高温胁迫处理下HaHsfA5表达显著上调,而正常条件下生长的梭梭幼苗在高温胁迫处理下其表达并未显著上调。综合Ha HsfA5的结构特征和表达规律,提示HaHsfA5功能可能与梭梭幼苗的高温胁迫记忆有关。本研究为进一步分析Ha Hsf A5在梭梭幼苗高温胁迫记忆中的功能提供研究基础,对梭梭耐高温品系选育和耐逆机制研究可能具有推动作用。 相似文献
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为深入分析 HaNAC20转录因子在梭梭抗逆机制中的作用,以梭梭[Haloxylon ammodendron(C.A.Mey.) Bunge] HaNAC20转录因子为对象,克隆其编码基因,对其基本理化性质、所属亚族及同源基因进行生物信息学分析,使用qRT-PCR方法对 HaNAC20在模拟干旱、高盐、模拟地表高温、IAA、ABA处理下的表达量进行分析,构建表达载体,进行亚细胞定位及转录激活活性分析。结果表明:克隆得到1个编码区全长为822 bp的梭梭NAC转录因子家族基因,命名为 HaNAC20(登录号:KU845314),编码273个氨基酸。系统发育树显示 HaNAC20属于NAC家族中与非生物胁迫相关的SNAC亚族。核定位信号预测及亚细胞定位结果表明 HaNAC20定位于细胞核内。表达量分析结果显示:在模拟干旱、高盐、模拟地表高温、IAA、ABA处理下, HaNAC20表达量均显著上调。转录激活分析结果显示该转录因子C端具有转录激活活性。表明 HaNAC20基因在梭梭响应非生物逆境胁迫、提高梭梭抗逆性中发挥重要作用。 相似文献