根癌农杆菌介导苜蓿遗传转化体系的建立

以建立的苜蓿高频再生体系为基础，利用GUS染色组织分析法，研究了影响根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens Conn)LBA4404菌株介导的苜蓿（Medicago sativa L)遗传转化的若干因素，建立了苜蓿快速有效的遗传转化体系，获得了转BADH基因植株。苜蓿的不同基因型、附加乙酰丁香酮的浓度、预培养与否、菌液浓度、共培养时间和卡那霉素浓度等对转化频率都有一定影响。最高转化频率可达43.3％，抗性植株经PCR和PCR-Southern blot检测表明，目的基因已整合进苜蓿基因组中。     

早熟辣椒新品种京椒6号的选育

早熟辣椒新品种京椒6号是以0373-1-4为母本,以0421-8-3为父本配制而成的一代杂种。植株生长势中等,始花节位第8～9节,果实长羊角形,基部褶皱重,纵径23～25 cm,果肩宽2.8～3.3 cm,商品成熟果绿色,生理成熟果红色,平均单果质量63 g。连续结果能力强,每667m2产量3 500 kg左右,适宜西南、西北露地及保护地栽培。     

种猪耳号编制存在的问题及对策

种猪耳号的科学合理编制 ,对种猪生产管理和养猪业发展有重要意义。笔者发现 ,在实际操作过程中存在要求不严 ,规则不一 ,方法各样等问题。1　种猪耳号编制存在的问题1 1　编制规则不一致　无论是剪耳法 ,还是耳标法 ,通常是公猪奇数 ,母猪偶数 ;采用耳标法时 ,通常公猪挂左耳 ,母猪挂右耳。但许多猪场不分公、母 ,不分奇、偶数 ,也不分左、右耳。1 2　编制要求不严格　操作不认真 ,剪耳法的缺口或大或小 ,或深或浅 ,间距不匀 ,排列不齐 ;有的过浅 ,模糊不清 ,不易辩认 ;有的过深 ,严重损伤耳廊边缘 ,影响美观。1 3　缺口位置过于靠近耳根或…     

叶片淋洗对盐胁迫下玉米全磷含量的影响

研究了不同pH淋洗液对NaCl胁迫下玉米上部叶片、中部叶片、下部叶片、茎鞘、茎叶和根系全磷含量的影响。结果表明：随NaCl胁迫的增加，玉米不同部位的全磷含量明显增加，叶片完全磷含量随叶龄增加而降低；无盐胁迫和100mmol/L NaCl胁迫时，叶片淋洗对全磷含量未产生明显影响，但在150mmol/L NaCl胁迫时，淋洗处理的全磷含量降低，说明叶片淋洗可降低高盐胁迫下植物体磷的多量积累。     

国槐SSR-PCR反应体系的建立与优化

利用单因素试验结合L₁₆（4⁵）正交试验设计对国槐SSR-PCR反应体系中的5个主要影响因素(Mg²⁺、引物、dNTPs、ExTaq酶、模板DNA用量)进行优化,确定最佳反应体系为（10μL）:25 mmol/L Mg²⁺1.0μL,2.5 mmol/L dNTPs 0.2μL,10μmol/L上下游引物共0.5μL,5 U/μL ExTaq酶0.05μL,30 ng/μL模板DNA 1.0μL,10×PCR Buffer 1.0μL,ddH₂O 6.25μL。随机挑选4对SSR引物和8个国槐种质对试验确定的最佳反应体系进行验证,均能获得清晰、稳定的条带。该优化反应体系的建立为利用SSR标记对国槐种质资源进行深入研究和利用奠定了基础。     

水分逆境对果树脯氨酸和叶绿素含量变化的影响

以盆栽二年生富士苹果、玉杏、肥城桃和巨峰葡萄为试材,研究了水分逆境对果树脯氨酸和叶绿素含量的影响。在干旱和多水处理初期,杏、桃脯氨酸含量急剧上升,然后下降;而苹果在水分逆境下脯氨酸含量变化不大。认为逆境下脯氨酸累积仅是一种受害反应特征,树种间反应各异。干旱和水涝均使果树长枝中部成熟叶片的叶绿素含量下降,水涝使正在成熟(长枝上部)的叶片叶绿素含量明显下降。三种果树抗涝性的顺序是:苹果>桃>杏。可以把叶绿素含量下降看作是水分胁迫发展中由功能性影响到器质性伤害的一个中间过程。     

基因枪介导红叶石楠遗传转化因素分析

以红叶石楠（Photinia fraseri）的胚性愈伤组织为受体材料,利用基因枪法导入外源抗寒基因 rd29A,以期建立基因枪转化红叶石楠的技术体系。结果表明,基因枪转化红叶石楠的最佳组合条件为：胚性愈伤组织在诱导培养基 MS + 6-BA 2.0 mg ·L-1+ NAA 5.0 mg ·L-1+ 2,4-D 0.5 mg ·L-1+ 琼脂 5.0g ·L-1+ 蔗糖 20 g ·L-1里,用 0.3 mol ·L-1甘露醇处理 15 ~ 16 h;基因枪轰击时添加 12.5 mol ·L-1氯化钙50 μL+0.1 mol ·L-1亚精胺 50 μL,每枪含金粉 300 μg + 质粒 DNA3.0 μg,轰击距离 9 cm,轰击压力 1 100psi,轰击次数 1 次。经多次筛选获得了 6 株转基因植株,转化植株经 PCR 检测和 Southern 分析,证实了rd29A 已经整合到红叶石楠基因组中。     

红叶石楠RAPD反应体系的优化

建立并研究适合红叶石楠的RAPD的最佳反应体系,为以后开展红叶石楠的遗传多样性研究、物种资源研究和亲缘关系鉴定等提供重要的参考。采用改进后的CTAB法,成功地提取了红叶石楠基因组DNA,通过单因素试验,研究了Mg2+、dNTP、引物的浓度和模板DNA,Taq酶的用量对RAPD反应的影响,建立适合于红叶石楠的RAPD反应体系。结果表明,在25 μL的RAPD反应体系中最佳反应条件分别是10×PCR Buffer 2.5 μL、Mg2+ (25 mmol/L) 2.0 μL、引物(20 μmol/L) 2.0 μL、dNTPs (2.5 mmol/L) 1.8 μL、DNA模板(49.5 μg/mL) 2.0 μL、Taq聚合酶0.3 μL (5 U/μL)。适宜的PCR循环程序为94℃预变性4 min,然后44个循环（94℃变性30 s,36℃退火30 s,72℃延伸2 min）后,72℃延伸10 min,最后16℃保存。改进的CTAB法能成功地提取红叶石楠基因组DNA,利用单因素试验设计所建立的RAPD反应体系,通过重复试验证明了该体系稳定可靠,可应用于红叶石楠遗传多样性、亲缘关系等方面的研究中,为红叶石楠在分子生物学研究奠定了基础。     

尾穗苋凝集素（ACA）基因植物表达载体的构建

尾穗苋凝集素（Amaranthus caudatusagglutin in,ACA）是一种存在于尾穗苋种子中的贮藏蛋白,属苋菜凝集素家族,对同翅目害虫如蚜虫、褐飞虱、叶蝉等有明显的致死作用。植物表达载体pCAMB IA2300-35S-OCS带有35S启动子及终止序列、卡那霉素（Kan）抗性基因NPTⅡ。载体pGEMT-ACA含有ACA基因,通过PCR扩增出ACA基因。把植物表达载体pCAMB IA2300-35S-OCS和扩增后的ACA基因用KpnⅠ和SalⅠ双酶切后经连接酶连接,得到植物表达载体pCAMB IA2300-ACA。将该载体分别导入农杆菌GV3101和LBA4404进行保存。     

转BADH基因苜蓿T1代遗传稳定性和抗盐性研究

采用分子生物学检测和不同浓度的NaCl对转BADH基因苜蓿T1代2个株系进行遗传稳定性和抗盐性研究。结果表明,2个株系的T1代PCR阳性植株和阴性植株分离比例都符合孟德尔遗传规律;在0.8%NaCl胁迫下,转基因植株Northern杂交表达量明显增加,BADH酶活性和甜菜碱含量分别比对照植株增加2～4和4～5倍;不同浓度NaCl胁迫下转基因株系脯氨酸和可溶性糖含量、抗氧化酶活性都显著高于对照植株,而电导率和丙二醛含量显著低于对照植株。表明转入的BADH基因可以稳定遗传,转基因苜蓿植株耐盐性明显高于对照。