云南2008～2009年H9N2亚型禽流感病毒血凝素和神经氨酸酶基因序列分析

禽流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)是病毒粒子表面抗原,是亚型划分的重要依据。从云南分离的H9N2亚型禽流感病毒感染鸡胚尿囊液中提取总RNA,采用特异性引物经RT-PCR分别扩增云南毒株10个HA和9个NA基因,纯化后克隆至pMD18-T载体,并对其进行测序。序列比对及系统发育分析结果表明:云南H9N2毒株HA基因核苷酸序列同源性为95.0%～99.7%;NA基因核苷酸序列同源性为86.2%～99.6%。在进化分枝中HA基因均属于欧亚分枝的类CBJ194亚分枝,与CBJ194的核苷酸序列同源性为92.0%～99.1%,NA基因属于CK/BJ/1/94和QaHKG1/97两个分枝。云南毒株HA裂解位点结构具有低致病性病毒分子特征;HA受体结合位点143、145、198和234位氨基酸存在变异,尤其234位氨基酸全部变为L,呈现了人流感受体结合特性。NA糖基化位点61～63、86～88部分毒株存在缺失,部分毒株在143～145位出现新的糖基化位点。     

黑龙江西部地区奶牛临床型乳房炎病原菌分离鉴定及耐药性分析

将从黑龙江西部地区部分奶牛场采集的临床型乳房炎奶牛的22份奶样进行细菌培养、分离鉴定和药敏试验。共分离到葡萄球菌,无乳链球菌,大肠杆菌3种主要病原菌56株。金黄色葡萄球菌32株,占分离菌株的57．14％;大肠杆菌15株,占分离菌株的26．79％;无乳链球菌3株,占分离菌株的5．36％,多为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的混合感染。主要病原菌对头孢噻呋、达诺沙星、新霉素敏感,对大多数抗生素产生了不同程度的耐药性,对氨苄青霉素已经产生完全耐药性。     

猪热应激的防制措施

猪生长的适宜温度为１５ -２５℃ ,环境温度升高时 ,猪就表现为活动量减少 ,饮水增加 ,生长变慢 ,甚至出现减重的现象。高温降低机体甲状腺素、肾上腺素等调节物质代谢的激素分泌量 ,从而引起机体糖类、脂类和蛋白质的代谢活动降低 ,继而降低猪的增重速度。高温还降低肉猪的免疫功能。在大部分高温潮湿的南方夏季对养猪业构成巨大冲击 ,造成巨大的经济损失。本文就如何防制猪热应激的措施进行了综述。１加强育种工作选育抗应激品种是减少应激的根本点和出发点。只有对气候应激具有良好的遗传适应性 ,才有助于畜禽在不适气候条件下保持良好的…     

京津冀禽屠宰场禽流感流行病学调查及风险防控

中国养殖业的发展趋势是规模化和集约化养殖,在一些疫病的传播过程中,屠宰企业处于关键的节点性位置,是禽产品从养殖场流向消费者餐桌的必经途径。禽屠宰场是禽流感病毒感染的易发地,是禽流感监测的薄弱环节,因此对禽屠宰场进行禽流感监测并对屠宰场的无害化处理机制开展评估,能有效防止疫病的传播和流行,对养禽业的生产和公共卫生安全意义重大。     

不同免疫方式对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响

为探索鸡新城疫疫苗的最佳免疫方式,通过3组不同的试验对14日龄雏鸡进行新城疫疫苗接种,采用间接酶联免疫吸附试验方法检测不同时间段鸡血清中的抗体水平,并利用SPSS16.0软件对各组数据进行方差分析。结果显示:肌肉注射新城疫疫苗7~21天时鸡血清NDV特异性HI效价与滴鼻试验组相比有较大的差异(P≤0.05),30天后两者差异变小(P≥0.05)。肌注组的抗体水平始终大于滴鼻组,肌注与滴鼻叠加免疫组的抗体水平一直大于肌注组,且90天后两者数值差异显著,肌注与滴鼻叠加免疫后效果最好且持续时间最长。     

猪囊虫病的早期诊断方法

关于猪囊虫病的诊断方法,国内外有过不少报道,如“变态反应”,“环状沉淀”,“间接血凝”和“炭凝集反应”等。但是均因存在“交叉反应”和所制抗原本身所造成的假阳性而影响在实际工作中的应用。为探索诊断猪囊虫病的方法,我们在流行病学调查的基础上,于１９９１年...     

含非洲猪瘟病毒核酸序列病毒样颗粒的研制及其在检测方法中的应用

非洲猪瘟（African swine fever,ASF）是由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）引起的烈性传染病,为了保证其检测结果的准确性和可靠性,需要研制试剂盒中使用的阳性标准质控品。本试验旨在研制含ASFV核酸序列的病毒样颗粒,并探究其在检测方法中的应用。首先扩增p72基因的全长片段,利用昆虫杆状病毒系统,包装出含有p72基因的ASF DNA病毒样颗粒。为了进一步验证该病毒样颗粒在应用中的可靠性,本研究将病毒样颗粒与ASF的组织毒及细胞毒同时进行DNA核酸提取,进行实时荧光定量PCR。结果表明,本研究制备的病毒样粒子能很好的取代ASFV在实时荧光定量PCR检测方法中作为阳性质控品,且能对核酸提取过程进行质控,实时荧光定量PCR检测试剂盒中,病毒样粒子的最低包装浓度为10² TCID₅₀。进一步研究发现该病毒样颗粒也适用于普通PCR及LAMP检测方法中,最低浓度分别为10³和10¹ TCID₅₀。本试验结果将为规范ASF检测方法,促进ASF检测方法的转化应用及保证检测结果的准确度和可靠性提供科学依据。     

病害动物及基产品无害化处理与建议

病害动物及其产品是动物饲养、屠宰加工等经营和动物检疫、监督管理过程中的客观产物,能否按规定对其进行无害化处理,直接关系到人畜安全,甚至影响社会安定.     

快速石蜡切片技术在病理检验中的应用

在日常病理检验工作中,常常要求在较短的时间里做出准确的病理报告,但是目前兽医临床上使用的快速诊断方法存在诸多弊端,为满足诊断的需要,作者通过摸索和反复实践,利用超声波组织脱水机制作石蜡切片,可以快速制出与常规制片无明显差异的病理切片,该方法经济、安全,操作简单、适合于在基层兽医机构推广应用.     

猪乙脑RT-PCR快速诊断方法的建立

根据猪乙脑病毒SA14-14-2毒株的基因组序列,采用Primer5.0引物设计软件,设计1对乙脑病毒特异性引物,建立了检测猪乙脑病毒的的RT-PCR方法,利用合成的引物对乙型脑炎病毒（JEV）、猪瘟病毒（CSFV）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）进行RT-PCR扩增,结果仅JEV能扩增出819bp大小的特异性片段,证实了建立的RT-PCR对乙型脑炎病毒具有较高的特异性。灵敏试验表明,检测JEV的RT-PCR的最小灵敏度能够达到纳克（ng）级别。该方法的建立,对于准确快速检测JEV提供了依据。