小鼠各器官表皮生长因子表达丰度的研究

应用定量竞争RT-PCR技术检测表皮生长因子mRNA在小鼠(Mus musculus L.)体内各部位的表达丰度,结果显示颌下腺和腮腺是小鼠体内表达表皮生长因子mRNA的主要器官,肾脏、肺和肝脏中也有明显表达,心脏和骨骼肌中则未检测到表皮生长因子的表达.如以颌下腺中mEGFmRNA的平均相对表达丰度为1.00,则腮腺、肾脏、肺和肝脏中mEGFmRNA的平均相对表达丰度分别为0.86±0.14、0.62±0.18、0.14±0.03和0.09±0.02.     

猪链球菌的鉴定及其PCR分型方法的建立

自2001年7月份,浙江省和周边地区大面积爆发了一种主要表现为病猪持续高温、食欲废绝、皮肤发红为主要特征的“猪高热综合症”,给养殖业带来了巨大的经济损失.经研究,“猪高热综合症”是一种多病原参与的传染病,其中包括PRRSV、PCV-2等,此外细菌在其中也起一定的作用.最近,我们分离到了2株细菌,分别命名为zj1株和zj2株,经鉴定均为猪链球菌,然后参考文献设计了一对引物,用于对常见血清型进行分型PCR,结果表明zj1株猪链球菌为血清2型,而zj2株不是所设计引物可以分辨的血清型.     

兔大肠杆菌异位感染的诊断及病原鉴定

随着养兔业规模的扩大．气候变化、环境污染等的加剧．兔的条件性细菌病也越来越多。同时．异位感染、继发感染等流行形式和菌株耐药性的出现．也使兔病的流行和防治变得越来越复杂，给养兔业造成较大的经济损失。现将浙江省2例兔大肠杆菌异位感染的诊治情况报道如下。     

捕获输出蛋白编码基因的小分子量质粒载体的构建与验证

自行设计一对引物,从质粒pUC18上扩增一段无启动子和信号肽的β-内酰胺酶基因(△P△SP Amp),经pGEM-T-EASY载体克隆到pET-28衍生质粒pKan的EcoRⅠ和XbaⅠ间,得到在Kan平板中生长而在Amp和Kan双抗平板中不能生长的转化子pMBL-E质粒.经部分酶切补平自连,筛选得到消除HindⅢ位点端EcoRⅠ位点的质粒,即为用于输出信号基因片段捕获的目的载体pMBL,大小为 3.46 kb.经酶切鉴定和测序分析,表明构建的载体与预期设计的一致,并应用四环素抗性基因(Tetr)对载体的有效性进行了验证,证明构建的载体pMBL能有效捕获含启动子和信号肽序列的输出蛋白编码基因.     

猪场空气细菌数量与猪高热综合征的相关性研究

自2001年入夏以来,浙江、上海等许多地区的猪群中流行以持续高热、气喘、皮肤发红为主要特征的猪"高热综合征",给养猪业带来了巨大的损失.但到目前为止,其主要病原依然未被确定.为了研究空气中细菌含量与该病的发生和严重程度之间的关系,我们对浙江省几个不同规模、不同发病情况的猪场的空气细菌含量进行了测试.结果发现:该病的发生及严重程度与猪舍内空气的细菌含量存在着明显的正相关性.     

蜂粮酿制过程中细菌的变化规律

采用营养琼脂培养基、改良"LB"培养基、MRS(4.5)、MRS(6.5)培养基分别对中国茶(Camelliasinensis)的手采花粉(floral pollen)、蜂花粉(corbicular pollen)和不同酿制时间的蜂粮(bee bread)样品中的细菌进行菌落计数和分析.酿制初期的蜂粮样品在MRS(4.5)培养基和MRS(6.5)培养基上生长的细菌菌落数占优势,随酿制时间的延长而迅速下降;5、10、15、21 d蜂粮样品在改良"LB"培养基上生长的细菌菌落数占优势;60 d蜂粮样品在营养琼脂培养基上生长的细菌菌落数占优势.     

花粉和蜂粮中细菌的分离和鉴定

对中国茶(Camellia sinensis O.Ktze.)的手采花粉(floral pollen)、蜂花粉(corbicular pollen)和不同酿制时间的蜂粮(bee bread)样品中的细菌进行分离和鉴定.从样品中分离出207个菌落,鉴定出4个属的12种细菌,即詹氏乳杆菌(Lactobacillus jensenii)、果糖乳杆菌(Lactob.fructosus)、旧金山乳杆菌(Lactob.sanfrancisco)、绿色乳杆菌(Lactob.viridescens)、唾液乳杆菌(Lactob.salivarius)、微小乳杆菌(Lactob.minor)、干酪乳杆菌鼠李糖亚种(Lactob.casei subsp.rhamnosus)、植物乳杆菌(Lactob.plantarum)、无害利斯特氏茵(Listeria innocua)、格氏利斯特氏茵(List grayi)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和植物乳球菌(Lactococcusplantarum).     

耐热鸡新城疫V4苗对高母源抗体雏鸡的口服免疫试验

用两个剂量分别以拌料和连续添加的方式，对具新城疫高母源抗体的雏鸡进行耐热新城疫弱毒Ｖ４苗的口服免疫试验，并用Ⅳ系苗滴鼻滴眼免疫作对照．血清ＨＩ抗体测定结果显示，４个试验组的ＨＩ抗体水平在全程的８次测定中均较低且消长平缓，攻毒试验显示试验组与对照组相当，均具有较高的保护率．在进行免疫试验的同时，对试验鸡进行称重，经Ｖ４苗免疫的试验组的体重比对照组增加．     

嗜水气单胞菌细胞提取物特性的分析

对六株嗜水气单胞菌的全细胞和外膜成份在不同的培养条件下进行SDS-PAGE、免疫转印分析.在同一培养条件下6个供试菌株全细胞的蛋白质电泳图谱不同.同一菌株在五种不同的培养条件下,其蛋白质电泳图谱相似但有差异.6株菌株的细菌外膜提取物的蛋白质电泳图谱不同,同一菌株在5种不同的培养条件下,其蛋白质电泳图谱相似但有差异,但所有的图谱均具有34 kDa和30 kDa的条带.用Schiff's试剂,银染及生物素标记(BS-1,ConA,UEA-1)法测定及分析提取物中糖或碳水化合物的特征.生物素标记及经蛋白酶K处理后的所有菌株的提取物均显示不同分子量碳水化合物的条带,但具有相同分子量的条带,其中32 kDa条带被三种生物素及银染所显示,而34 kDa仅被生物素BS-1和UEA-1所识别.经Schiff's试剂染色后,仅出现少量的条带.用免疫转印法测定菌体提取物的抗原性,结果显示,提取物有多条不同的条带被两种血清所识别,且用活菌制备的血清比死菌的要强得多.所有菌株在不同培养条件下的提取物均具35 kDa条带被鱼血清所识别.所以,35 kDa条带可能是嗜水气单胞菌的共同抗原.同时,用ELISA法测定,证明鱼血清与其它菌株间有较强的交叉反应.