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猪2型圆环病毒ORF1基因的克隆及表达 总被引:3,自引:1,他引:3
根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)的ORF1基因序列,设计合成了1对引物,对PCV-2广东株(GD)ORF1基因进行PCR扩增,将扩增的ORF1基因克隆入pMD18~T载体,获得的重组质粒命名为pMD-ORF1。将ORF1的Kpn Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切产物插入原核表达载体pBAD/gⅢ C得到重组子,命名为pBAD/gⅢ—ORF1。序列分析表明,克隆的ORF1与德国分离株AF201897核苷酸序列的同源性高达99.5%;与其他PCV-2株的核苷酸序列同源性为92.1%~99.9%,推导的氨基酸序列同源性为90.2%~99.5%。同时,测序结果表明,克隆的ORF1准确插入了pBAD/gⅢC的多克隆位点,未改变读码框。用L-阿拉伯糖诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE和Western—blotting分析,结果表明PCV-2ORF1在pBAD/gⅢC中获得了高效融合表达,其表达蛋白的分子质量约为41ku。 相似文献
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针对水文时间序列多时间尺度分析问题,分别应用经验模态分解(EMD)与总体经验模态分解(EEMD)方法进行对比研究。论文首先将EMD与EEMD进行测试函数仿真对比分析,结果表明EEMD较EMD能较好的解决模态混叠现象。将其应用于湖北省降雨序列演变特性分析,并引入基于LSSVM信号延拓方法以消除水文序列的端点效应,结合小波分析结果对比验证表明,EEMD作为一种新的信号处理方法,较EMD能更精确地获取降雨时序的多时间尺度特性,可为水文时间序列演变规律分析提供依据。 相似文献
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国家经济安全审计是指审计机关依赖有效的审计制度对被审单位财政、财务收支和经济活动的真实性、合法性和效益性进行审计的基础上,针对经济安全的关键领域,识别、评估、预警和报告危害经济安全的风险,确保财产权益安全完整的一种审计模式。该模式奠定了审计监督在国家经济安全体系中的基础性地位。创新审计模式及审计策略、变革国家审计体制、构建以审计监督为基础的新型国家经济安全体系是国家经济安全审计的三大实施路径。 相似文献
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基于公众视角,研究影响公众参与城市生活垃圾管理的因素及影响程度。通过设计调查问卷获得相关数据,利用主成分分析和回归分析方法对环境保护需求、法律制度保障等因素影响公众参与城市生活垃圾管理的程度进行实证研究。研究结果表明:相较于权利的追求、公众的利益追求、个人修养这些内部因素,环境保护需求、法律制度保障、环保组织推动这些外部因素对公众参与城市生活垃圾管理的推动作用要小。而社会监督力量和信息技术发展对公众参与城市生活垃圾管理的推动作用则表现不明显。研究可为城市市政相关部门制定政策提供指导和借鉴。 相似文献