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991.
LU Na BAI Rui-ying WEI Lin-yu LI Chao-kun LI Xin-juan ZHAO Hong-gang LI Dong-liang 《园艺学报》2014,30(8):1388-1393
AIM:To examine the effects of high concentration of extracellular ATP on human neuroblastoma SH-SY5Y cell injury. METHODS:Cultured SH-SY5Y cells were grouped according to the concentrations of ATP and treatment time. The cell viability was detected by CCK-8 assay. The variation of autophagic vacuoles was observed with monodansylcadaverine staining. The cell apoptosis was analyzed by Hoechst 33258 staining. Meanwhile, apoptotic rate was detected by flow cytometry. The levels of caspase-3 and microtubule-associated protein 1 light chain 3-Ⅱ (LC3-Ⅱ) were determined by Western blotting. RESULTS:Compared with control group, the survival rate of SH-SY5Y cells was significantly reduced by ATP at different concentrations (3, 6, 9, 12 and 15 mmol/L for 3 h) and different treatment time (1, 2, 3 and 6 h with 6 mmol/L ATP, peaking at 3 h). The autophagic vacuoles of SH-SY5Y cells were significantly increased at 1 h with ATP treatment, trended to decrease over time and returned to control level at 6 h. The protein expression of LC3-Ⅱ was significantly increased at 1 h with ATP treatment, which was consistent with the time points of increasing autophagic vacuoles. LC3-Ⅱ expression level gradually decreased at 2~3 h with ATP treatment, and returned to control level at 6 h. Compared with control group, the apoptotic rate and the expression level of caspase-3 were enhanced synchronously. The peak of apoptotic rate occurred at 3 h, and kept until 6 h.The level of cleaved caspase-3 expression peaked at 6 h. CONCLUSION:High concentration of extracellular ATP induces the autophagy and apoptosis of SH-SY5Y cells. The increased autophagy shows up, followed by the climax of apoptosis until 6 h. With the prolonged duration of ATP, apoptosis is the main process in the cells. 相似文献
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利用牡蛎制作海鲜调味汁的试验 总被引:2,自引:0,他引:2
研究了混合酶水解牡蛎蛋白质的技术条件,并和单酶水解结果进行了比较。结果表明,混合酶水解可提高水解率和水解液中氨基态氮(AAN)的含量,同时改善了水解液风味。 相似文献
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试验旨在优化Smad泛素化调节因子2(Smurf2) siRNA最佳转染条件,筛选最佳siRNA干扰片段,进而实现对Smurf2基因的瞬时沉默,为研究Smurf2基因在马兜铃酸肾病(aristolochic acid nephrohathy,AAN)中的作用奠定基础。本研究通过培养小鼠原代肾小管上皮细胞(renal tubular epithelial cells,RTECs),并以脂质体LipofectamineTM 2000为转染介质,将Smurf2 siRNA转染入RTECs;通过观察绿色荧光的表达量及Real-time PCR反应优化转染条件,转染后Real-time PCR检测mRNA表达抑制率。CCK-8法检测Smurf2 siRNA复合物对RTECs活性的影响;同时,用Real-time PCR和Western blotting检测不同位点Smurf2 siRNA对Smurf2 表达的影响。结果显示,当Lipofectamine TM 2000与siRNA比例为1.5 μL∶30 pmol时,转染效率最高,为70%~80%;Smurf2-619 siRNA干扰效果最明显;与正常组相比,转染siRNA组的Smurf2蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。最终确定了Smurf2 siRNA最佳转染条件,其中Smurf2-619 siRNA对Smurf2 表达的抑制率最高。 相似文献
1000.
试验旨在探讨硫化氢供体硫氢化钠改善疲劳状态下肌力减退的作用。采用脉冲式电流直接刺激腓肠肌作为疲劳模型,对比硫氢化钠和任氏液分别对蟾蜍腓肠肌疲劳的影响。结果表明,硫氢化钠在浓度为5×10-4、1×10-3、2×10-3 mol/L时,离体腓肠肌达到最大收缩幅度90%、50%和10%的时间极显著长于在任氏液作用下的离体腓肠肌(P<0.01);5.6 mg/kg硫氢化钠也极显著延长了在体腓肠肌达到最大收缩幅度90%、50%和10%的时间(P <0.01)。表明外源性硫化氢具有延缓肌肉疲劳的作用。 相似文献