重组鸡抗菌肽Gallinacin-9的原核表达及其抗菌活性的鉴定

采用RT—PCR方法,从鸡舌组织中扩增到Gallinacin-9（Gal-9）基因,测序表明Gal-9为201bp,其成熟肽由67个氨基酸残基组成。进一步将克隆的Gal-9基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1的EcoR I和Sal I双酶切位点上,构建重组表达质粒pGEX—Gal-9,经序列分析鉴定确证目的基因克隆人载体的预期位点。将重组质粒转化大肠杆菌BL21,于37℃诱导培养不同时间,SDS-PAGE电泳表明该基因在大肠杆菌中高水平表达,表达的重组鸡Gab-9融合蛋白相对分子质量约为32ku。重组蛋白占菌体总蛋白的40％。表达的重组鸡Gal-9融合蛋白以包涵体的形式存在。重组蛋白经纯化后,分别以对数生长中期的大肠杆菌BL21（DE3-）株与致病性链球菌CAB株为检测菌,利用薄层平皿琼脂糖孔穴扩散法测定了重组Gal-9蛋白的抗菌活性,结果表明,重组Gal-9对这2种细菌都具有抗菌活性。     

现代母猪和乳仔猪免疫营养需求和液体饲喂管理技术应用

中国规模化养猪面临严重的疾病挑战,规模猪场疾病流行呈现出明显的特点,尤其是流行性疾病导致免疫抑制疾病明显增加。猪免疫抑制与实际生产中流行的高致病病原体、饲养管理不善和营养不良、疫苗使用过多、抗生素滥用和药物残留等关系密切。现代猪品种发生了很大的变化,而规模化猪场母猪和乳仔猪存在的一系列疾病、营养和管理等问题与品种变化和免疫营养需求改变密不可分。现代养猪要结合"抵抗应激、增强免疫、均衡营养、健康养猪"的理念,并结合"养重于防、防重于治、防治结合"的实践方针。世界先进的小猪配方奶粉可以有几种主要的使用方法,包括代替母乳法、补充母乳法、增强采食法、协助断奶法和饲料原料法等,在本文中有详细的介绍。强化现代养猪实践中的全面营养解决方案和全面健康管理方案,并将现代液体饲喂纳入正常的生产管理范畴,可让规模养猪场达成每头母猪每年增加二头猪上市的整体性能,实现效益的提升。     

鸭肠炎病毒UL51和UL52基因的克隆及序列分析

利用靶基因步行 PCR 方法扩增得到鸭肠炎病毒(DEV Clone-03)5352 bp 基因片段,并进行克隆和测序.序列分析发现,该片段包含2个ORF.Blast 分析表明,这2个ORF分别与单纯疱疹病毒1型(HSV-1)UL51 和UL52 基因同源,命名为DEV Clone-03 UL51和UL52,分别编码252和1124个氨基酸.DEV Clone-03 UL51和UL52基因排列方式与HSV-1同源基因相一致,为"头对头"的转录方向,两个ORF间有236 bp 间隔序列.用DNAStar(Megalign)软件分别对这2个ORF和11株α-疱疹病毒参考毒株进行分析,发现DEV Clone-03 UL51 与HSV-1的氨基酸序列有相对较高同源性,DEV Clone-03 UL52与EHV-4 同源性相对较高.并且DEV Clone-03UL51基因在α-疱疹病毒中比较保守.与HSV-1 UL52 蛋白相似,DEV Clone-03 UL52蛋白C末端存在锌指结构.系统发育分析表明,DEV Clone-03与α疱疹病毒亚科成员的关系比较保守,与Mardivims属的成员具有较近的亲缘关系.     

用地高辛标记的核酸探针检测猪伪狂犬病毒野毒感染的研究

利用PCR技术从带有伪狂犬病毒（PRV）gE基因的重组质粒pMD18-T-gE中扩增回收约304bp大小的片段,并制备出地高辛标记的gE基因核酸探针。特异性检测结果表明,该探针能与重组质粒DNA发生特异性杂交,而与对照的PRVBartha-k61株疫苗毒DNA、猪细小病毒（PPV）DNA、猪圆环病毒（PCV）DNA、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRsV）cDNA、猪瘟病毒（CSFV）cDNA的杂交反应均为阴性;敏感性检测结果表明,该探针对PRV野毒的最低检出量为4pg。应用该探针对11份繁殖障碍病料进行了杂交检测,共检出4份阳性病料,该结果与PCR检测结果一致,表明该核酸探针可用于猪伪狂犬病野毒感染的临床诊断。     

鹅副黏病毒胶体金检测卡的研究

将制备的抗鹅副黏病毒(GPMV)JG04株单克隆抗体3A5标记胶体金颗粒,提纯的鸡IgG(抗JG04株GPMV)喷涂在NC膜上,建立检测GPMV的快速夹心胶体金免疫层析检测卡(ICS)。该检测卡检测鸡减蛋综合征病毒、传染性法氏囊炎病毒、传染性支气管炎病毒、小鹅瘟病毒鸡胚或鸭胚尿囊液和麻疹病毒、犬瘟热病毒细胞培养物呈阴性,与鹅副黏病毒、孔雀源新城疫毒株,鸽源新城疫毒株、新城疫La sota株、鸡源新城疫病毒的尿囊液出现阳性反应。敏感性试验结果表明,该检测卡可检出血凝效价为24以上的鹅副黏病毒尿囊液。     

多年生黑麦草愈伤组织诱导与芽分化的研究

对多年生黑麦草Lolium perenne的2个品种特拉华(Delaware)与尤文图斯(Juventus)进行了愈伤组织诱导以及芽分化的研究.结果表明,在种子和成熟胚2种外植体中,成熟胚的出愈率高,是较好的愈伤诱导材料.愈伤诱导培养基采用MS基本培养基,附加激素4 mg/L 2,4-D 0.025 mg/L 6-BA.特拉华和尤文图斯较适宜的芽分化培养基是MS基本培养基分别附加0.4 mg/L ZT 0.3 mg/L NAA和0.2 mg/L ZT 0.5 mg/L NAA.特拉华在愈伤诱导和芽分化两方面均优于尤文图斯.     

不同乳酸杆菌添加剂对水貂生长性能、营养物质消化率、氮平衡及血清生化指标的影响

本研究选择2株水貂源乳酸杆菌,研究其对水貂的益生作用。挑选160只体重相近的健康冬毛期雄性水貂,随机分为4组,每组40只。Ⅰ组为对照组,饲喂基础饲粮;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别饲喂在基础饲粮中添加5×109CFU貂源植物乳杆菌MDL1118(LP)、屎肠球菌MDF1104(EF)和LP+EF(各2.5×109CFU)的试验饲粮。试验期90 d。结果表明:Ⅲ组体重及平均日增重高于对照组和Ⅱ组,但是差异不显著(P>0.05);Ⅲ组干物质和蛋白质消化率均显著高于对照组(P<0.05);粪氮含量显著低于对照组(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组的血清总蛋白含量均显著高于对照组(P<0.05);Ⅲ组血清免疫球蛋白A含量极显著高于对照组(P<0.01),显著高于Ⅱ组(P<0.05);Ⅲ和Ⅳ组血清高密度脂蛋白胆固醇含量显著高于对照组(P<0.05)。结果提示,饲粮中添加貂源乳酸杆菌添加剂能够提高营养物质消化率,提高机体免疫机能,这2株貂源乳酸杆菌可作为水貂饲料添加剂的备选菌株。     

人工践踏对无土草坪基质的影响

本试验采用人工践踏的方式,研究了不同组合配比的基质对无土草坪耐践踏性的影响。结果表明,良好的无土草坪基质配比及适合的厚度是保证无土草坪优良的耐践踏性及观赏性的关键。本试验中,草坪草生长基质层和弹性材料层均为25 mm,结构合理、厚度适中,克服了现有草坪基质薄、持水力差的缺点。在相同践踏强度下,能维持较高水平的草层高度、草坪盖度和草坪草分蘖数,分别达到了5.14 cm、97.60%和123.97 个·dm-2,且停止践踏后草坪质量能快速恢复。均匀混合的草坪草生长基质层和弹性材料层,在厚度一致的前提下并不耐践踏,实际效果不好。土壤坪床的处理效果最差。因此,具有独立的草坪草生长基质层和弹性材料层且厚度适中的基质,适用于生产耐践踏性好的无土草坪。     

Effect of propylene glycol and undegradable protein source on rumen fermentation, blood metabolism and milk production in lactating dairy cows

Eight lactating Holstein cows were divided into two groups ( n  = 4) and used in a double reversal trial with three periods of 14 days each, to evaluate diets containing propylene glycol (PG) and ruminally undegradable protein (RUP) blend on milk yield and composition, ruminal fermentation and blood metabolism. The control diet contained 20% chopped Sudangrass hay, 20% cubed alfalfa hay, 12% corn silage, and 48% of the respective concentrate mixtures (dry matter basis). The experimental diet (PG + RUP) partially replaced the concentrate mixture from the control diet with 1.4% PG and 2.1% RUP. Both diets contained about 16% crude protein and 71% total digestible nutrients. Dry matter intake was similar between the two diets. Daily production of milk, milk lactose and milk solids-not-fat increased by 9.0%, 11.3% and 9.3%, respectively ( P  < 0.1), for cows fed diets with PG + RUP; milk composition was unchanged. Although the concentration of ruminal total volatile fatty acids was unchanged, the proportion of propionic acid increased, and the proportion of acetic acid decreased with PG + RUP. The concentration of ruminal ammonia nitrogen and number of ciliate protozoa was not significantly affected by PG + RUP. The concentration of glucose in blood plasma increased, the concentration of urea nitrogen was unaffected, and the concentration of some essential free amino acids decreased with PG + RUP. It is suggested that these changes might be caused predominantly by PG, and the addition of PG may exert a favorable effect on milk production through increased metabolism.