生长素及其mRNA在大鼠性腺中的分布

【目的】阐明生长素(Ghrelin)及其mRNA在大鼠卵巢和睾丸中的分布。【方法】取成年SD大鼠的睾丸和卵巢,制成石蜡切片,采用免疫组化和原位杂交方法,分别检测Ghrelin和Ghrelin mRNA在大鼠性腺组织中的定位。【结果】雄性大鼠睾丸间质细胞、支持细胞、初级精母细胞、次级精母细胞中均有Ghrelin分布,而精原细胞、精子细胞、肌样细胞中均无Ghrelin分布;Ghrelin mRNA的分布规律与Ghrelin一致。在雌性大鼠卵巢中,Ghrelin主要分布在黄体细胞、卵巢门间质细胞、卵母细胞上;Ghrelin mRNA在黄体细胞、卵巢门间质细胞、原始卵泡、初级卵泡的颗粒层细胞、次级卵泡的卵泡膜层细胞和颗粒层细胞中均有分布。【结论】Ghrelin及其mRNA在大鼠性腺中均有分布,可能对大鼠性腺的发育及其功能有一定的调控作用。     

哺乳动物体细胞核移植胚胎发育中表观重编程的研究进展

体细胞核移植（somatic cell nuclear transfer,SCNT）是一种能将已分化的体细胞重编程为全能胚胎的繁殖生物技术,在良种扩繁、濒危物种保护和治疗性克隆等方面有着广泛的应用前景,但极低的克隆效率、克隆动物胎盘异常、出生后胎儿畸形等严重限制了该技术的实际应用。造成克隆效率低和胚胎发育异常的主要原因是供体核表观遗传重编程错误或不完全。1958年,将非洲爪蟾（Xenopus laevis）幼体肠细胞核移入去核卵母细胞,获得了第1例SCNT动物个体;1986年,通过电融合1个卵裂球与去核卵母细胞成功获得了3只存活的羔羊;1997年,将成年母羊的乳腺上皮细胞与去核卵细胞电融合,获得首个SCNT哺乳动物"多利",开启了克隆时代,目前牛、小鼠、山羊、猪、欧洲盘羊、家兔、家猫、马、大鼠、骡子、狗、雪貂、狼、水牛、红鹿、单峰骆驼、食蟹猴等相继成功克隆,其中最引人瞩目的是2018年食蟹猴的成功克隆。作者通过将SCNT胚胎与受精胚胎的发育进行对比,阐述了SCNT过程中DNA甲基化、组蛋白修饰、基因组印迹、染色体状态等的重编程过程和缺陷,并从表观修饰剂、组蛋白去甲基化酶、抑制Xist表达、补充鱼精蛋白和精子RNA方面探讨单独或联合消除表观遗传重编程障碍对克隆效率的影响。随着低样本量测序技术的发展和完善,人们能够在SCNT胚胎中检测到更详细的全基因组表观遗传修饰图谱,进一步揭示SCNT胚胎表观遗传重编程中的缺陷,为提高克隆效率提供了线索。通过上述内容的阐述,希望为后续开发联合消除多种表观遗传障碍而提高克隆效率的策略和思路。     

TMPD降解菌Klebsiella oxytoca的鉴定

从疯草生长的土壤环境中分离并筛选出一株TMPD降解菌LF-1,通过形态学观察、生理生化特征测定和16S rDNA序列同源性分析对其进行了鉴定.结果表明:LF-1的形态及主要生理生化特征与产酸克雷伯氏杆菌一致,而且与产酸克雷伯氏杆菌(DQ226215)的16S rDNA序列同处于一个最小的分支,同源性达到99.52%.由此确定TMPD降解菌LF-1属于产酸克雷伯氏杆菌(Klebsiella oxytoca).     

小鼠皮肤成纤维细胞与早期胚胎共生体系的构建

【目的】构建小鼠早期胚胎与皮肤成纤维细胞共生的微环境体系。【方法】分离培养EGFP纯合阳性成年ICR小鼠皮肤成纤维细胞。取激素超排合笼后2.5 d小鼠8-细胞胚胎,通过显微操作系统将4~6个EGFP阳性小鼠皮肤成纤维细胞注射到小鼠早期8-细胞胚胎中,转移发育到囊胚阶段的共生胚胎至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上,在小鼠胚胎干细胞分离培养条件下进行培养。【结果】EGFP阳性小鼠成纤维细胞注射到小鼠胚胎后,荧光显微镜下显示,EGFP阳性小鼠成纤维细胞分布到小鼠囊胚组成细胞中,参与小鼠囊胚组成。在发育到囊胚的共生胚胎中,EGFP阳性小鼠成纤维细胞分布到小鼠囊胚细胞中的比例为93.73%(269/287)。在小鼠胚胎干细胞的分离培养条件下,2.60%(7/269)共生胚胎中EGFP阳性小鼠成纤维细胞参与小鼠胚胎内细胞团的组成。【结论】小鼠皮肤成纤维细胞与小鼠早期胚胎能够形成共生的微环境体系。     

茶文化在当代园林艺术中的创新性应用研究

我们必须认识到,虽然茶文化对整个当代园林艺术的创新发展有着重要的推动力,但是整个元素应用之间并不能盲目的叠加,应该从弄清其真实内涵的前提之下,实现两种文化理念和价值元素的有效融合。本文拟从当前当代园林艺术的设计状况与诉求分析入手,结合茶文化体系的价值内涵表达,通过融入当代园林艺术设计过程中的创新性不足,从而分析当代园林艺术中茶文化的创新性应用思路。     

fat-1基因脂肪组织特异性表达载体的构建及其山羊转基因细胞系的建立

旨在构建一种筛选标记可全部去除的脂肪组织特异性表达fat-1基因的载体,将其转染山羊胎儿成纤维细胞,筛选出稳定整合fat-1基因的转基因细胞系。首先将人工合成的fat-1基因连接至L28-Wnt10b载体(1种带有小鼠脂肪组织特异性启动子Fabp4的载体)上,构建成fat-1基因脂肪组织特异性表达载体L28-fat1;同时经多次克隆构建成1种筛选标记可全部去除的骨架载体MCS-3s-LoxP-RFP;然后,利用Hind III和Not I对上述2种载体进行双酶切,接着进行连接,构建出筛选标记可全部去除的脂肪组织特异性表达fat-1基因的表达载体。采用脂质体介导的方法转染山羊胎儿成纤维细胞,通过G418筛选转基因细胞。酶切鉴定及PCR检测结果表明,成功构建了3s-LoxP-RFP-FABP4-fat1表达载体,并首次获得了脂肪组织特异性表达fat-1基因的山羊胎儿成纤维转基因细胞系,为将来通过体细胞核移植创制脂肪组织特异表达fat-1基因的优质肉用转基因山羊新材料奠定了基础。     

泌乳期小尾寒羊5种生殖激素的变化规律研究

【目的】研究泌乳期小尾寒羊血清中5种生殖激素(FSH、LH、PRL、P4、E2)质量浓度的变化规律。【方法】分别在春、秋季于小尾寒羊产羔0～60d内,每隔5d采血1次,共采13次,颈静脉采集试验羊全血10mL,离心后收集血清,再用放射免疫分析法(RIA)测定血清中FSH、LH、PRL、P4和E2的质量浓度。【结果】春、秋季小尾寒羊母羊在产后泌乳初期(0～5d),血清中FSH、LH、E2和P4的质量浓度均处于较低水平。春、秋季小尾寒羊产后第10天,外周血中FSH质量浓度开始上升,第40天分别达到各自平均水平,春季为(29.61±12.40)ng/mL,秋季为(32.60±12.59)ng/mL;LH质量浓度在产后5d开始上升;PRL浓度在产后前5d保持较高水平,之后缓慢下降直到试验结束(60d);E2质量浓度总体均呈波动上升趋势,在45d时均出现峰值,春季为(73.84±59.46)pg/mL,秋季为(65.33±35.09)pg/mL,之后维持在较高水平直到试验结束;P4质量浓度总体均呈现出波动上升的变化趋势,并分别在45和55d出现最高峰((0.55±0.31)和(0.70±0.43)ng/mL)。泌乳母羊产后血清中P4质量浓度变化在个体间的差异较大,产后60d内每个试验羊均有卵巢活动,最早出现卵巢活动的时间为产后第10天。【结论】小尾寒羊在产后40d内生殖器官的各项功能均已得到基本恢复,此时对小尾寒羊进行诱导发情可以得到较好的效果。     

我国高速公路边坡植被防护技术初探

随着我国高速公路建设快速发展以及人类环境保护意识的不断增强,植被护坡技术越来越受到重视,在高速公路建设中被广泛应用.综合我国高速公路边坡植被防护技术现状,就我国高速公路植被护坡的方法和存在的问题进行分析,在此基础上提出了高速公路边坡植被防护的可持续发展对策;并认为灌、草结合,加快人工植物群落向自然群落演替是实现边坡稳定...     

对高校新校区植物景观设计的思考——以河南工程学院新校区植物景观建设为例

近年来,高校新校区植物景观建设虽然取得了一些宝贵的经验,其中也不乏有经典案例,但总的来讲,还是有一些可以改进的地方,本文结合河南工程学院新校区建设实际,分析了在植物景观建设中的不足,并提出了一些建议,以期为高校新校区的植物景观建设贡献绵薄之力。