慢病毒载体介导成纤维细胞高效稳定表达绿色荧光蛋白

试验尝试建立稳定表达外源基因的人成纤维细胞系。取成年男性包皮皮肤的皮下组织,分离培养人皮肤成纤维细胞,分别采用脂质体和慢病毒载体介导转染人皮肤成纤维细胞表达绿色荧光蛋白。结果显示,来自成年人包皮皮下组织的成纤维细胞呈梭形,具有快速的增殖和稳定的生长性能。脂质体介导转染的人皮肤成纤维细胞绿色荧光蛋白表达不稳定,阳性细胞表达率低,转染后的人成纤维细胞变得更为细长,细胞生长速度降低。慢病毒载体介导人皮肤成纤维细胞高效稳定表达绿色荧光蛋白,转染后细胞生长性能和形态没有变化,经过多次传代和冻存复苏对人皮肤成纤维细胞绿色荧光蛋白的表达没有影响,通过流式细胞仪对慢病毒介导表达绿色荧光蛋白的人皮肤成纤维细胞检测显示,绿色荧光蛋白表达阳性率为99.85%,并且表达绿色荧光蛋白的人皮肤成纤维细胞细胞均一程度为76.05%。试验证实了慢病毒载体能够高效稳定介导人皮肤成纤维细胞表达绿色荧光蛋白。     

洞庭湖湿地与洞里萨湖湿地保护对比分析

考察了中国洞庭湖湿地和柬埔寨洞里萨湖湿地,在实地调查的基础上,对两处湿地面临的问题、社会作用、经济地位、保护措施等方面进行对比,结果表明:两处湿地面临比较相似的环境问题,但洞庭湖主要以工业污染为主,而洞里萨湖则是生活污染比较严重.针对湿地污染问题提出了保护洞庭湖湿地的具体意见.     

去势对公猪生殖轴上Ghrelin和功能性Ghrelin受体mRNA的影响

【目的】探讨手术去势(阉割)、免疫去势对公猪下丘脑-垂体-睾丸轴上Ghrelin mRNA和功能性Ghrelin受体1a mRNA表达的影响。【方法】将21头公猪随机均分为免疫去势组、未去势组和手术去势组,免疫去势组于9周龄初次接种免疫去势疫苗,17周龄加强免疫;手术去势组在仔猪出生7d内进行阉割去势;未去势组不作任何处理。25周龄时屠宰所有公猪,取下丘脑、垂体和睾丸组织,以β-actin为内参基因,采用实时荧光定量PCR法检测公猪下丘脑-垂体-睾丸轴Ghrelin及其受体mRNA基因的相对表达量。【结果】手术去势、免疫去势和未去势公猪下丘脑Ghrelin及其功能性受体mRNA基因相对表达量的差异不显著(P0.05),未去势公猪垂体Ghrelin mRNA的相对表达量显著低于手术阉割去势公猪(P0.05),免疫去势公猪睾丸中Ghrelin受体mRNA的相对表达量显著高于未去势公猪(P0.05)。【结论】公猪生殖轴存在Ghrelin mRNA和功能性Ghrelin受体mRNA,且手术阉割去势导致垂体中Ghrelin mRNA的相对表达量增加,免疫去势增加了睾丸Ghrelin受体mRNA的相对表达量,提示Ghrelin可能对生殖轴有调节功能。     

慢病毒载体介导成纤维细胞高效稳定表达绿色荧光蛋白

 试验尝试建立稳定表达外源基因的人成纤维细胞系。取成年男性包皮皮肤的皮下组织,分离培养人皮肤成纤维细胞,分别采用脂质体和慢病毒载体介导转染人皮肤成纤维细胞表达绿色荧光蛋白。结果显示,来自成年人包皮皮下组织的成纤维细胞呈梭形,具有快速的增殖和稳定的生长性能。脂质体介导转染的人皮肤成纤维细胞绿色荧光蛋白表达不稳定,阳性细胞表达率低,转染后的人成纤维细胞变得更为细长,细胞生长速度降低。慢病毒载体介导人皮肤成纤维细胞高效稳定表达绿色荧光蛋白,转染后细胞生长性能和形态没有变化,经过多次传代和冻存复苏对人皮肤成纤维细胞绿色荧光蛋白的表达没有影响,通过流式细胞仪对慢病毒介导表达绿色荧光蛋白的人皮肤成纤维细胞检测显示,绿色荧光蛋白表达阳性率为99.85%,并且表达绿色荧光蛋白的人皮肤成纤维细胞细胞均一程度为76.05%。试验证实了慢病毒载体能够高效稳定介导人皮肤成纤维细胞表达绿色荧光蛋白。     

猪体外受精技术研究进展

猪体外受精是动物胚胎工程中的关键辅助生殖技术,利用屠宰场卵巢卵子资源,可实现优质胚胎规模化体外生产.结合胚胎移植和基因编辑技术,可生产出试管猪和基因编辑猪,科研和产业前景巨大.然而,与其他物种相比,猪体外受精技术方案还不完善,胚胎发育效率和质量仍旧低下,尤其是卵子多精子受精问题仍然没有得到解决.本文总结了卵母细胞成熟、...     

表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对哺乳动物生殖影响的研究进展

表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）是茶多酚中含量最多的一种儿茶素类物质,它具有良好的抗氧化、抗突变、防癌抗癌等一系列生物活性。本文就近几年EGCG对动物生殖影响研究进行了综述,以期为EGCG在动物生殖方面的开发和利用提供理论依据。     

转基因山羊研究进展

近年来,动物转基因技术发展日淅完善,在牛、羊、猪等家畜上的应用日益增多.为全面了解山羊转基因技术的研究进展,论文简要回顾了国内外转基因山羊生产的里程碑事件,总结了生产转基因山羊的方法和原理,并对转基因山羊研究状况、应用前景及存在问题进行了较为系统的概括和分析,从而为借助现代生物技术丰富我国山羊育种手段,加快山羊新良种培...     

羔羊超数排卵与胚胎体外生产技术研究进展

自从幼畜体外胚胎移植(JIVET)技术问世以来,因其在优秀种畜快繁、育种世代间隔缩短、遗传资源保护等方面具有广阔的应用前景,引起了很多科研机构的关注.为提高JIVET的生产效率,研究人员对该技术的多个环节进行了探索,但总体效率还不是很高.论文就羔羊超数排卵与胚胎体外生产技术实施中的关键环节,即羔羊超排供体的年龄、超排季...     

水电站金属结构施工质量控制

水电站工程的施工质量不仅影响着自身效能的发挥,也关系到下游地区人民群众的生命财产安全,因此,历来是重点控制对象。而金结安装工程则是水电站工程中的重要组成部分,其质量对工程的整体质量有着决定性的影响。本次研究以某水电站工程为例,对如何做好金结工程施工质量控制工作进行了分析和讨论。     

MiR-143在山羊卵巢组织中的表达及功能分析

旨在分析miR-143在妊娠与非妊娠山羊卵巢组织中的表达情况,并探讨其在山羊卵巢功能发挥以及其他生物学过程中所起的作用。采用Solexa测序及荧光定量PCR技术在妊娠和非妊娠山羊卵巢组织中检测miR-143的表达水平,并对其进行靶基因预测和GO富集分析。Solexa测序在山羊卵巢中检测到miR-143的表达,共发现miR-143及其异构体1 074个,总拷贝数为109 523,平均拷贝数为102;定量结果显示miR-143在妊娠山羊卵巢中的表达量是非妊娠山羊的12倍且差异显著(P<0.05);GO分析表明miR-143广泛参与机体生殖发育、细胞增值分化等多个生物学过程。miR-143在妊娠山羊卵巢中的表达水平显著高于非妊娠山羊,而且其可能在卵巢激素分泌与作用应答、妊娠维持等生殖生物学过程中发挥潜在作用。