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华东葡萄白河-35-1株系抗霜霉病基因cDNA文库构建及EST分析 总被引:1,自引:0,他引:1
以中国原产抗霜霉病葡萄野生种华东葡萄(Vitis pseudoreticulata)白河-35-1为材料,用SMARTTM技术构建葡萄霜霉菌(Plasmopara viticola)诱导的葡萄叶片cDNA文库。经检测,原始文库滴度0.92×106 pfu/mL,重组率97%,插入片段500~2 200 bp,扩增文库滴度为5×109 pfu/mL。随机挑取克隆5'端测序,获得254条有效EST序列(GenBank登录号:FG269201~FG269449和FG396006~FG396010)。经BlastX分析,有56.3% ESTs与GenBank中功能已知基因有较高同源性,14.6%ESTs与功能尚未确定的假设蛋白或未知蛋白同源性很高,20.9%ESTs在GenBank中无匹配的同源产物。 相似文献
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中国野生华东葡萄抗霜霉病抑制消减文库构建及初步分析 总被引:3,自引:0,他引:3
【目的】分离和获得中国野生华东葡萄抗霜霉病相关基因片段的EST序列。【方法】以高抗霜霉病的中国野生华东葡萄(V.pseudoreticulata)白河-35-1 株系为材料,以田间接种葡萄霜霉菌的幼嫩叶片为处理,以田间自然生长的未接种幼嫩叶片为对照,分别提取RNA,采用抑制消减杂交技术构建抗霜霉病基因的消减正交和反交两个文库,在文库中,选择3个EST序列,用半定量PT-PCR检验构建文库中EST片段的表达情况。【结果】构建的文库中EST片段的大小在150~900 bp,经筛选文库,得到正交库有效的ESTs 85条,反交库ESTs 29条,所获序列经过BLASTn和BLASTx网上序列比对,其中有78条ESTs与GenBank中其它植物相关基因序列有较高的同源性,31条为未知功能序列,已登录GenBank 114条ESTs,登录号:FG106789-FG106902。进一步利用半定量RT-PCR 对文库中3个基因的表达情况进行了分析,证明这些EST序列是可以表达的。【结论】经初步分析这些序列的功能,涉及抗病信号传导、能量代谢、蛋白质代谢、核酸代谢、光合作用及膜运输和代谢等方面,其中获得与抗病直接相关的ESTs 23条,下一步是通过对获得的EST序列进行末端快速分析(RACE)技术,获得抗霜霉病基因全长序列,并进行原核和真核表达研究验证基因全长序列功能,为研究葡萄抗霜霉病的基因提供依据。 相似文献
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以9种葡萄砧木嫁接的红地球葡萄一年生盆栽植株为材料,研究了不同葡萄砧木对嫁接苗叶柄中N、P、K 3种大量元素质量分数水平的影响,从而筛选大量元素高效吸收和利用砧木。研究结果表明,不同葡萄砧木对嫁接苗叶柄中大量元素均有影响,5BB、1103P、140Ru、3309C、SO4、188-08、101-14等7种砧木嫁接后可显著提高红地球葡萄氮素的吸收和利用效率,5BB、188-08、101-14、1103P、SO4等5种砧木嫁接后可提高红地球葡萄磷素的吸收和利用能力,其中以5BB砧木的N和P吸收和利用能力最强;3309C、140Ru、1103P、5BB、188-08等5种砧木嫁接后可提高红地球葡萄K的吸收和利用能力,其中以3309C砧木的K吸收和利用能力最强。 相似文献
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激素对杜仲幼茎愈伤组织诱导及生长的影响 总被引:5,自引:1,他引:5
以MS为基本培养基,添加不同浓度的2,4-D,NAA,IBA,BA,KT或其组合,研究杜仲嫩茎愈伤组织的诱导及生长情况。结果表明,3种生长素均可100%诱导出愈伤组织,以0.5mg/L2,4-D,0.5~1.0mg/LNAA,1.0mg/LIBA效果较好;2,4-D和BA及KT的组合均不利于愈伤组织诱导,低浓度的BA与NAA和IBA组合能促进愈伤组织的诱导和生长,其中1.0mg/LNAA+0.3~0.5mg/LBA,1.0mg/LIBA+0.5mg/LBA诱导出的愈伤组织生长旺盛,富有光泽,适合进一步继代培养,而高浓度则起抑制作用;KT的加入对愈伤组织的诱导及生长均起抑制作用。 相似文献
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以常规施肥方法为对照,通过大田试验研究牛皮纸包装缓释施肥、无纺布包装袋式缓释肥、活性腐殖酸葡萄专用冲施肥及"葡萄株平衡施肥"几种施肥方式及N、P、K不同施肥量对红地球葡萄光合特性、叶片叶绿素SPAD值、产量和品质等的影响。结果表明,4种施肥方式比较,牛皮纸包装缓释施肥的使用效果最好,红地球葡萄叶片叶绿素SPAD值同期相比最高,净光合速率(Pn)提高8.3%,果实硬度提高4.85%,可溶性固形物质量分数提高8.0%,糖酸比提高8.43%,还原性维生素C提高67.59%,可滴定酸质量分数降低3.83%,产量比对照提高24.111%,在4种施肥方式中施用效果最优,而且使果实品质得到明显改善。因此,牛皮纸包装缓释施肥在红地球葡萄生产上有较好的缓释效果,保肥能力强,可以作为当地红地球生产的有效缓释施肥措施。 相似文献