小龙虾养殖病害综合防治（下）

<正>3.细菌病小龙虾感染的细菌性病原多为气单胞菌属,如嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌、维氏气单胞菌等。由于气单胞菌具有几丁质分解能力,刚感染的病虾甲壳局部会出现一些颜色较深的斑点,接着斑点边缘溃烂,严重时出现空洞。小龙虾烂壳、烂尾、黑斑、水肿等常见病均为此类细菌感染引起。     

河蚬微卫星引物筛选及洪泽湖野生群体遗传结构分析

利用磁珠富集法筛选了河蚬10对中高度多态性的微卫星引物,并分析了洪泽湖河蚬4个野生群体的遗传结构.结果表明,每个群体至少有4个位点经Bonferroni校正后显示杂合不足,显著偏离了Hardy -Weinberg平衡(P＜0.013);4个群体平均期望杂合度均大于0.752,显示出较高的遗传多样性水平,蒋坝、临淮群体遗传多样性高于高良涧和老子山群体;突变-漂移平衡分析结果显示,4个群体在IAM模型下偏离了突变-漂移平衡,高良涧群体在TPM模型下偏离了突变-漂移平衡,且表现杂合过剩,说明少数群体即将或曾经经历瓶颈效应,群体数量已出现波动;群体间AMOVA分析表明,洪泽湖河蚬群体间遗传分化程度较低(FST=0.017 7＜0.05),仅有1.77％的变异来自群体间,并没有形成显著的遗传结构,在种质资源保护和管理上可视作一个单元,这为河蚬种质资源保护和合理开发利用提供了理论指导.     

患病异育银鲫中嗜冷黄杆菌的分离鉴定及组织病理学观察

为确定越冬期内江苏多地异育银鲫 (Carassiusauratus gibelio)暴发性死亡的原因,本研究利用高通量测序比较了健康样品和患病样品的微生物群落多样性和结构组成的差异,分析了异育银鲫病害暴发过程中的细菌类型及特性。结果表明：在属水平上,患病样品中黄杆菌属丰度最高。在种水平上,患病样品中嗜冷黄杆菌 (Flavobacterium psychrophilum)的丰度显著增加,分别达到63.01%和61.31%,显著高于健康组的1.55%（P < 0.05）。根据微生物群落特征分析结果,从患病样品体表的病灶处分离出优势病原菌NJ01,通过细菌形态学、生理生化分析、16S rDNA 序列比对确定 NJ01 菌株为嗜冷黄杆菌。人工感染NJ01菌株14d后,1.7×106～1.7×107 CFU/mL两组的死亡率达到100%,感染症状和自然发病症状一致。组织病理学观察发现,病鱼的肌细胞坏死,间质中充满了淋巴细胞;肝脏中细胞溶解坏死,细胞核消融;在脾脏中发现脾细胞散在坏死,伴随着充血的症状;肾小管上皮脱落,肾间质存在大量淋巴细胞。药物敏感试验结果表明,NJ01菌株对头孢西叮、头孢哌酮、庆大霉素和克拉霉素等敏感。本研究首次报道了嗜冷黄杆菌在异育银鲫中的致病性,这将为大宗淡水鱼“越冬综合征”的药物防治及其致病机理研究提供参考依据。     

噻虫嗪暴露对克氏原螯虾的病理损伤和生化反应的影响

为了探究噻虫嗪对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)的影响，开展噻虫嗪对克氏原螯虾的急性毒性试验和14 d的慢性暴露试验，对克氏原螯虾的肝胰腺进行病理损伤和生化酶活分析。结果显示，噻虫嗪对克氏原螯虾的24、48、96 h的半致死浓度(LC50)分别为3.611,3.014和2.100 mg/L；噻虫嗪对克氏原螯虾的安全浓度(SC)为0.21 mg/L；通过14 d的噻虫嗪暴露试验，当暴露在52.5μg/L(1/4 LC₅₀)和105.0μg/L(1/2 LC₅₀)时，克氏原螯虾的肝胰腺都发生管腔扩大、上皮空泡化的损伤，总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性和丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和还原型谷胱甘肽(GSH)的浓度显著上升，表明肝脏中有大量活性氧(ROS)，肝胰腺发生氧化应激反应。     

微囊藻毒素暴露对河川沙塘鳢病理损伤、生化反应的影响

开展了微囊藻毒素暴露对河川沙塘鳢病理损伤、生化反应的影响试验。设置3个试验组（D3、D5、D7）1个对照组（CK），每组设3个重复组，于试验的第0、3、5、7天，随机取每组3尾河川沙塘鳢的肠道和肝脏组织，进行生化分析和组织病理学观察。结果表明，微囊藻毒素会导致肠道黏膜肌层空泡化，同时引起隐窝结构异常，影响肠道营养物质吸收。肝脏同时出现严重损伤，主要包括肝细胞溶解和充血等症状。随着暴露时间的增加，肠道总超氧化物歧化酶活性受到抑制，过氧化氢酶活性和丙二醛的浓度变化，呈现先下降后上升的趋势，谷胱甘肽过氧化物酶和还原型谷胱甘肽的浓度呈现相反的趋势。这些结果表明了微囊藻毒素对河川沙塘鳢的肠道的损伤可能是通过产生过量活性氧引起的。     

高铁酸钾对斑点叉尾鮰幼鱼和南美白对虾的急性毒性研究

为了明确高铁酸钾对养殖动物的安全性，采用静水生物测试法研究了高铁酸钾对斑点叉尾鮰幼鱼和南美白对虾的急性毒性效应并进行了安全评估。结果表明，高铁酸钾对斑点叉尾鮰幼鱼和南美白对虾表现出不同的毒性作用，但均为低毒性，对斑点叉尾鮰幼鱼和南美白对虾的96 h LC50值分别为95.01 mg/L和609.45 mg/L。对斑点叉尾鮰幼鱼的毒性主要表现在鱼体接触染毒物质后的24 h内，而南美白对虾的累积死亡率则与暴露时间呈正比。研究结果将对斑点叉尾鮰和南美白对虾养殖过程中的高铁酸钾使用具有一定的指导意义。