用于药用蛋白生产的外源表达系统

利用外源蛋白表达系统生产具有重要价值的药用蛋白是现代生物技术产业的核心内容和研究热点,也是各国政府和制药企业竞相巨额资助的研究领域之一。本文综合分析了目前用于重组药用蛋白生产的原核表达系统、酵母表达系统、昆虫表达系统、哺乳动物表达系统和植物表达系统在表达产量、翻译后加工能力、生产周期、生产成本、适用范围等方面的优劣以及研究现状和最新研究进展,揭示出植物表达系统将在未来重组蛋白大规模生产中占据重要地位。但是现有的各种表达系统都无法单独实现各种重组蛋白高活性、低成本、安全系数高的大规模生产。在相当长时间里,各种表达系统在重组蛋白生产上将长期共存。而通过遗传改造、基因组学、蛋白质组学等研究方法不断改进各种外源蛋白表达系统的性能,不断建立更加优越的外源蛋白表达系统则是大家共同努力的目标。     

农牧业机械化技术推广项目实施技术要点

农牧业机械化技术推广项目实施技术要点内蒙古农机推广站郝建国农牧业机械化技术推广项目是农牧业科技和推广计划的重要组成部分，对加速农牧业科技成果转化、促进农牧业生产发展、提高农牧业机械化水平有十分重要的意义。因此。规范化的实施农牧业机械化技术推广项目是推...     

奶牛生产性能监测信息管理系统

奶牛生产性能监测信息管理系统○天津市奶牛育种站（３０００６０）田雨泽郝建国窦红刘景喜郭秀英奶牛生产性能监测是奶牛生产的基础性工作，既为育种提供可靠的数据，又为指导生产提供科学依据。我们在中日技术合作奶业项目的基础上，于１９９２年开始奶牛生产性能监测...     

种公牛精囊腺炎的诊治

<正>种公牛的利用经常受到种公牛的繁殖能力障碍所制约,据报道,世界上种公牛的繁殖障碍疾病情况是:美国和加拿大肉用26%、奶用36%;欧洲20%;澳大利亚9.3%;非洲21%[1]。其中,精囊腺炎成年种公牛发病率约0.8%~4.2%,育成青年公牛的发病率约占2.4%[2]。     

农牧交错区保护性耕作技术试验研究

主要论述了保护性耕作技术在农牧交错区实施的农艺与机械化技术方案、措施及实施效果.以农牧交错区的典型代表武川地区为例,分析了农业机械化技术模式,总结了实施效果.经检测,麦类增产75～90kg/hm2,增幅为7%左右;油菜籽增产45～120kg/hm2,增幅为4%～7%;马铃薯由于带状保护而增产约900kg/hm2,增幅为6%左右;节省作业费50～255元/hm2;增收节支效益为270～480元/hm2.实施保护性耕作技术可减少风蚀30%～60%,减少地表径流30%左右,对防治沙尘暴、改善农牧业生态环境和实现农牧业可持续发展起到了重要作用.     

农牧业机械化技术推广项目实施技术要点

农牧业机械化技术推广项目实施技术要点内蒙古农机推广站郝建国（上接第２期）３项目技术文件的编制３．１技术文件目录推广项目结束所需技术文件主要有：项目工作总结（含技术总结）、经济效益分析报告、实施方案、作业技术规范４部分，附件有现场验收报告或测产报告、用...     

根癌农杆菌介导转褪黑素基因草莓的获得

为建立根癌农杆菌介导的草莓褪黑素基因高效遗传转化体系,以草莓品种“早红”叶片和叶柄为外植体,优化了影响根癌农杆菌遗传转化的因素,包括农杆菌菌液浓度、侵染时间、共培养时间和预培养时间等,建立了适宜草莓“早红”的农杆菌遗传转化体系。结果表明,“早红”草莓适宜的转化条件是：外植体的最适预培养时间为2～3 d,农杆菌侵染的最佳菌液浓度为OD600 0.3～0.5,最适侵染时间为15 min,最适共培养时间为3 d。在此基础上,通过根癌农杆菌介导法将褪黑素合成关键酶N -乙酰转移酶（AANAT）和羟吲哚-氧甲基转移酶（HIOMT）基因AANAT和HIOMT转入草莓基因组,并对获得的抗性植株进行PCR和PCR-Southern blot检测分析,结果表明外源基因已经整合进草莓基因组中。RT-PCR分析证明外源基因已经在转录水平表达。     

黑河地区高粱田封闭处理除草剂筛选

为筛选出安全、有效的高粱田播后苗前土壤处理除草剂,以绥杂7号高粱为试验材料,采用随机区组试验比较了960 g·L~(-1)异丙甲草胺EC和38%莠去津SC两种除草剂及其混配制剂的除草效果和对高粱的安全性。结果表明:960 g·L~(-1)异丙甲草胺EC+38%莠去津SC(45.6 mL·667m~(-2)+115.2 mL·667 m~(-2))和38%莠去津SC 355 mL·667 m~(-2)对高粱田杂草防除效果好。综合考虑除草剂的防除效果和对后茬作物的影响,推荐使用960 g·L~(-1)异丙甲草胺EC+38%莠去津SC(45.6 mL·667 m~(-2)+115.2 mL·667 m~(-2))。     

AtNHX1基因对菊苣的转化和耐盐性研究

用农杆菌介导法将AtNHX1基因导入菊苣中,共获得42株卡那霉素(Kan)抗性再生植株。经过PCR检测、Southern杂交和RT-PCR检测表明,AtNHX1基因已成功整合到菊苣基因组中,并且能够正常转录。野生型和转基因植株诱发的愈伤组织进行耐盐生长试验,结果显示,相同盐胁迫条件下,转基因愈伤组织的相对生长率显著高于野生型愈伤组织。施加梯度NaCl胁迫后,植株叶片K⁺和Na⁺含量测定结果显示,转基因植株叶片比野生型积累更多的Na⁺和K⁺,维持较高的K⁺/Na⁺;叶片相对电导率测定结果表明,转基因株系叶片相对电导率显著低于野生型。上述结果表明,AtNHX1基因的导入和表达在提高菊苣耐盐性的同时减轻了盐胁迫对植物细胞膜的伤害。     

青稞HvBADH1基因的克隆及其转化烟草的初步研究

应用RT-PCR结合RACE技术, 从青稞总RNA中扩增得长度为1 512 bp的甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因cDNA全长编码序列。通过氨基酸同源性比对, 发现该序列的推定表达产物与大麦BADH同工酶BBD2的同源性为98.4%, 而与小麦、玉米和水稻等禾本科作物的BADH同源性分别为97.0%、84.7%和85.1%。将克隆到的青稞cDNA序列命名为HvBADH1, 投递到GenBank, 获得收录号EF492983。HvBADH1可以在原核表达系统TB1-pMAL c2x中正常表达出分子量为54.2 kD的多肽链。将HvBADH1的编码ORF, 插入到添加了植物表达CaMV 35S启动子和Nos polyA终止子调控元件的植物表达载体pCAMBIA1301质粒相应的克隆位点中, 构建了HvBADH1基因的农杆菌植物转化系统LBA4404(pCAM-ba)。进而采用农杆菌介导法, 将HvBADH1基因导入烟草中, 对所获得的潮霉素抗性烟草株系进行PCR、Southern blot和RT-PCR等分子生物学检测, 结果表明, 在得到的2个转基因株系中, HvBADH1基因已整合到受体植物基因组中, 并且可以在mRNA水平上进行转录。