链格孢菌苹果致病型的ATMT转化体系的建立

【目的】链格孢菌（Alternaria alternate）苹果致病型是苹果上的重要致病菌,可以侵染苹果叶片和果实。论文旨在建立农杆菌介导的链格孢菌苹果致病型高效稳定的分子转化体系,为在分子水平上研究链格孢苹果致病型病菌的致病机制提供技术支持。【方法】质粒pKO1-HPH是以pCAMBIA1300骨架为基础构建的穿梭质粒,含有潮霉素抗性基因,并在其多克隆位点上插入了绿色荧光蛋白基因,这个质粒在大肠杆菌和农杆菌细胞中都能够稳定地复制繁殖。将质粒pKO1-HPH采用冻融法转化到农杆菌菌株AGL1中,然后与链格孢苹果致病型菌株XP-1的分生孢子在诱导培养基上共培养进行基因转化,转化子在含有潮霉素的马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基上进行筛选;在含有50 μg·mL^-1潮霉素的马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基上检测转化子细胞中抗性基因在转化子中的表达情况;用荧光显微镜检测绿色荧光蛋白基因在转化子细胞中的表达情况。在初步确认可以将绿色荧光蛋白和潮霉素B磷酸转移酶基因转入链格孢苹果致病型菌株中后,对菌落培养时间、转化前分生孢子的预处理方法对转化效率的影响进一步优化。转化子的稳定性采用分生孢子5次继代培养后,能否在含有潮霉素的马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基上稳定生长来检测;采用PCR方法检测绿色荧光蛋白外源基因和潮霉素B磷酸转移酶基因是否存在于转化子基因组中;用Southern杂交检测外源基因在转化子基因组中插入的拷贝数;在苹果果实和叶片上接种检测转化子致病性的变化。【结果】将100 μL孢子悬浮液（含10⁵孢子）涂布于马铃薯-胡萝卜-琼脂平板上菌落培养36-48 h后,链格孢苹果致病型菌株XP-1可以产生足量的孢子用于农杆菌介导的分子转化。将分生孢子用无菌水洗下,在4℃处理6 h,再与含质粒pKO1-HPH的农杆菌进行诱导共培养,转化子在含有50 μg·mL^-1潮霉素的马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基上进行筛选,转化效率较好,10⁷个分生孢子转化可获得约200个转化子。转化子经过5次继代培养,对潮霉素B的抗性没有改变。特异性引物PCR检测表明外源基因能够成功地整合到供试菌株的基因组中;Southern杂交表明外源基因多以单拷贝形式随机插入到链格孢苹果致病型菌株XP-1细胞的基因组中;转化子的菌丝和分生孢子在荧光显微镜下可以观察到明显的绿色荧光,说明荧光蛋白基因在菌丝及孢子中均能够成功表达。通过部分转化子的致病性试验,筛选获得数个在苹果果实和叶片上致病性都显著降低的菌株。【结论】建立了农杆菌介导的链格孢菌苹果致病型稳定高效的分子转化体系,为进一步开展此病菌与其寄主的分子互作研究打下基础。     

等氮条件下不同氮磷钾比例对烟叶产量与质量的影响

为研究在等氮条件下不同氮磷钾比例配施对高黎贡山绿色生态优质烟叶生物学性状、经济学性状以及内在质量的影响,于2016年在腾冲市界头镇,以K326为研究材料,设氮、磷、钾比例为0∶0∶0(不施肥作空白对照)、1∶1∶1(常规施肥)、1.0∶1.0∶1.5、1.0∶1.0∶2.5、1.0∶1.5∶2.5共5个处理,研究了等氮条件下不同氮、磷、钾比例配施对烤烟农艺性状、经济性状和化学成分的影响。结果表明,提高氮、磷、钾肥的比例均能增加烤烟的产量、产值以及提高烤烟的内在质量,但合适的氮磷钾配比,能使烟叶外观质量、产量、产值、内在化学成分达到最优。通过试验得出最佳施肥方案为N∶P_2O_5∶K_2O=1.0∶1.0∶2.5,在此比例下,各农艺性状达最佳,产量达到2 175 kg/hm~2,产值为67 745.7元/hm~2,均价为31.15元/hm~2,上等烟比例达到81.33%,具体施肥量为氮肥120 kg/hm~2、磷肥120 kg/hm~2、钾肥300 kg/hm~2,为试验烟区合理施用肥料具有重要的指导意义。     

快速黏度仪分析燕麦粉的理化性质

燕麦粉作为一种谷物,加工后可广泛应用于饮料体系。应用快速黏度仪研究燕麦粉的淀粉糊化特性,同时,通过面筋蛋白醇溶指数法及稀乳酸法分别研究燕麦粉的面筋蛋白质特性,探讨不同工艺条件对淀粉糊化特性及面筋蛋白质黏度特性的影响,测定燕麦粉中β-葡聚糖含量。结果表明：β-葡聚糖含量对燕麦粉的快速黏度仪稀酸法面筋蛋白质黏度特性的测定无明显影响。另外,稀乳酸法中峰值黏度及最终黏度与醇溶指数法中最终黏度间分别存在相关性,相关系数分别为0.8103、0.8364,而与醇溶指数法中醇溶指数无相关性。     

《食品试验设计与统计分析》课程教学改革与实践

通过对《食品试验设计与统计分析》的教学改革,包括合理选用教材、提高学习兴趣、采用案例教学方式、培养综合能力和改革考核方式等,使学生的学习兴趣得到了提高,加深了对理论知识的理解,并通过多种途径最终达到了掌握这门课程的目标,为今后的学习和工作打下了坚实的基础。     

固态发酵饲料在畜禽生产中的研究进展

固态发酵是一种操作简单、效果显著的饲料处理方法,这种方法在提高饲料利用率的同时,还能对畜禽产生有益影响。国内外对畜禽饲喂固态发酵饲料的应用进行大量研究,文章主要从不同原料和不同菌种的固态发酵饲料对畜禽影响作以综述。     

南极磷虾羧肽酶的适冷特性及蛋白质结构预测

【目的】南极磷虾作为一种变温动物生活在极寒环境,其体内的酶普遍具备适冷特性,这为其适应极寒环境起到关键作用。研究南极磷虾羧肽酶的适冷特性,并探讨其在催化反应过程中应对低温环境的机理,对酶类分子改造等基础学研究及实际生产应用具有一定意义。【方法】本研究首先通过对南极磷虾羧肽酶及牛羧肽酶的动力学比较,对其适冷性进行分析,接着采用生物信息学方法,对其理化性质、氨基酸序列比对并进行二级、三级结构预测,对南极磷虾羧肽酶的结构与适冷性关系进行探讨。【结果】研究结果显示,在4℃和30℃下,南极磷虾羧肽酶催化效率及对底物的亲和性均高于常温牛羧肽酶,显现出更适应低温环境的能力。通过结构分析预测,南极磷虾羧肽酶氨基酸序列与河鳌虾（Astacus astacus）等物种同源性较高,活性位点、Zn结合位点等存在保守性;不同的是与其它常温动物相比南极磷虾羧肽酶含有更高比例的Asp和较低比例的Pro、Arg和Phe,可能致使其蛋白质分子内相互作用减弱,分子柔性增强;二级元件中松散的无规则卷曲占比相对较高,使得南极磷虾羧肽酶三级结构呈现活性中心更暴露、整体结构更松散的状态。【结论】南极磷虾羧肽酶具有一定的适冷性,酶分子各级蛋白结构基于降低分子间作用力、提高分子柔性和减少活性位点空间位阻等,为其应对低温环境保持较高效的催化能力做出了一定的贡献。     

甜菜夜蛾成虫监测技术及应用

甜菜夜蛾是太仓市夏秋季蔬菜上的主要害虫,自2000年以来发生程度均在中等偏重.甜菜夜蛾一年发生5～6代,第3～5代为主害代,重发时严重影响蔬菜产量和质量.由于甜菜夜蛾具有成虫产卵量大、卵期短、中高龄幼虫抗药性强的生物学特性,因而防治难度大.     

袋栽猴头菇高产技术要点

猴头菇目前国内外市场需求量大,为了适应大规模发展猴头菇生产,我县在原来瓶栽的基础上推广了袋栽猴头菇。袋栽猴头菇,具有成本低,产量高,容易种,效益好等优点。现将其高产栽培技术介绍如下:(一)栽培季节菌种为常山猴头菇99,子实体的适宜生育温度是9～15℃,因此我县可在10月中旬至翌年的1月中旬栽培。其它地方应根据当地的气候条件,适当提前或推迟播种。     

葡萄根癌病研究进展

阐述葡萄根癌病的历史和现状、症状和侵染循环、防治方法以及早期预警的方法等.     

肉毒碱与鱼虾增重关系的研究

本文研究了肉毒碱对不同种类的鱼虾生长的影响.试验表明,在鱼虾饲料中添加100×10~(-6)肉毒碱,鱼增重效率提高11%～63%,平均增重提高27.38%,节约饲料9.00%～52.84%,平均节约饲料19.00%;虾类增重提高10.70%～100.00%,平均增重率提高39.48%,节约饲料6.87%～50.00%,平均节约饲料20.87%.对补充肉毒碱的鲤鱼肉质进行了评价,鲤鱼粗蛋白质提高3.02%,含脂率下降5.42%,必需氨基酸比例、必需氨基酸指数、蛋白价3项指标试验组高于对照组,差异极显著(P<0.01),并且可食部分比例也提高4.7%.