弓形虫疫苗研究进展

弓形虫是细胞内寄生的一种原虫,弓形虫病是由弓形虫引起的一种重要人兽共患寄生虫病,弓形虫疫苗作为防控弓形虫病的重要措施是目前研究的热点。弓形虫进入机体后以细胞免疫为主,使得疫苗可以发挥最大功用。疫苗的免疫效果与候选抗原和佐剂的使用密切相关,不同类型的抗原和佐剂用于疫苗中能够产生不同的免疫效果。目前,弓形虫疫苗的候选抗原主要以虫体特异组分蛋白和新型表位基因为主,佐剂也从传统的弗氏佐剂拓展到了霍乱毒素、透明质酸酶和CpG-ODN等。综合考虑各方面因素进行疫苗研制,将成为生产具有理想保护性弓形虫疫苗的研究方向。     

苏州生态景观林土壤微生物生物量及其化学计量特征

为了调查苏州市不同生态景观林土壤微生物生物量及其化学计量特征,分析林分差异对土壤微生物生物量的影响,以便为城市生态景观林的构建提供微生物方面的基础数据。以苏州市香樟人工林（Cinnamomum camphora plantation）、喜树人工林（Camptotheca acuminata plantation）、水杉人工林（Metasequoia glyptostroboides plantation）、栾树人工林（Koelreuteria paniculata plantation）和池杉人工林（Taxodium distichum var. imbricatum plantation）等5种生态景观林为研究对象,测定分析了各林分的0～20 cm、20～40 cm、40～60 cm、60～80 cm、80～100 cm等5个土壤层次全碳（TC）、全氮（TN）、全磷（TP）以及微生物生物量碳氮磷（MBC、MBN和MBP）。结果表明：（1）试验地各土层微生物生物量碳氮磷分别在447.0～957.1、1.4～56.2和 1.2～3.3 mg(kg^-1之间,并且在不同景观林之间差异显著。其中,栾树人工林0～100 cm土壤具有较高MBC和MBN的平均含量,香樟人工林土壤则有较高的MBP平均含量。（2）林分类型对微生物生物量化学计量比（MBC∶MBN、MBC∶MBP、MBN∶MBP）、熵值（qMBC、qMBN和qMBP）以及土壤与微生物之间化学计量不平衡性有显著影响。其中,针叶林一般具有较高的MBC∶MBN、MBC∶MBP和qMBC,而阔叶林总体具有较高的MBN∶MBP、qMBN、qMBP和土壤-微生物之间化学计量不平衡性。（3）试验地土壤微生物生物量及其化学计量比主要与土壤容重、全碳、全氮以及全磷有显著或极显著相关关系。生态景观林类型显著影响0～100 cm土壤微生物生物量及其化学计量特征;相较于针叶林,阔叶林一般具有较高的MBN、MBP以及土壤-微生物之间化学计量不平衡性,表明阔叶林微生物生物量更易受土壤氮磷的影响。     

弓形虫棒状蛋白ROP54编码基因的生物信息学分析及原核表达

为了能够获得刚地弓形虫RH株棒状蛋白ROP54的重组蛋白，本研究进行了弓形虫RH株ROP54蛋白编码基因的生物信息分析及原核表达。运用RT-PCR方法扩增刚地弓形虫RH株ROP54蛋白编码基因序列，并连接至pMD-18-T载体，构建出克隆质粒pMD-ROP54后，转化入大肠杆菌DH5α感受态细胞中，测序后对基因序列进行生物信息分析。将pMD-ROP54及pET-28a经双酶切及连接，构建出原核表达质粒pET-ROP54,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后，经IPTG诱导表达，SDS-PAGE分析重组蛋白表达情况，Western blot鉴定重组蛋白的反应原性。结果显示，成功扩增出长度约1 440 bp的ROP54蛋白编码基因序列。生物信息学分析显示，测序结果与刚地弓形虫M49株比对同源性为99%。预测ROP54蛋白氨基酸序列1至26个氨基酸为信号肽，亲/疏水性最小值是-2.978,最大值是2.700。成功构建了原核表达质粒pET-ROP54,IPTG诱导后经，SDS-PAGE结果可见约52.94 kDa大小的蛋白表达，且能够被犬抗弓形虫血清识别，具有良好的反应原性。本研究成功...