诱导牛精子体外获能的培养基及方法

用去透明带金黄地鼠异种精子体外穿透试验,检测冻精复苏经各种处理后的精子穿卵率。发现在４种基本培养基（ＢＯ、ｍＢＷＷ、ＴＹＨ、ＨａｍＦ１０＋ＲＰＭＩ－１６４０）中不加亚牛磺酸时,牛精子不能耐受较高浓度（４μｍｏｌ／Ｌ）钙离子载体（ＩＡ）的刺激（以１０ｍｉｎ计）;而低浓度ＩＡ（低于４μｍｏｌ／Ｌ）处理精子不能诱导获能。生物活性物质,如肝素、咖啡因、亚牛磺酸、肾上腺素单独或联合低浓度ＩＡ处理精子,短期（６ｈ）内也不能诱导获能。当基本培养基中含有亚牛磺酸时,牛精子能耐受高浓度ＩＡ（１０μｍｏｌ／Ｌ）的刺激,并使牛精子获能;亚牛磺酸与肾上腺素、咖啡因联合使用,并在获能液中添加透明质酸酶时,穿卵率进一步提高,获能效果显著改善。以ＨａｍＦ１０＋ＲＰＭＩ１６４０为主的混合培养基,在牛精子的存活时间、穿卵率等方面优于ＢＯ、ｍＢＷＷ、ＴＹＨ培养基。结果表明,用Ｆ１０和１６４０的混合培养基,添加亚牛磺酸、肾上腺素、咖啡因、透明质酸酶,经１０μｍｏｌ／ＬＩＡ处理牛精子１０～１５ｍｉｎ,是快速诱导牛精子体外获能的有效方法     

适合沙地栽培的药用植物

我区沙地多,利用沙地种植药材有很大发展前途。以下介绍几种适合沙地种植,并且有较高经济价值的药材栽培方法。     

丙二醛氧化对核桃分离蛋白结构及乳化性的影响

【目的】研究脂类过氧化作用的最终产物丙二醛（malondialdehyde,MDA）对核桃分离蛋白（walnut protein isolate,WPI）结构和乳化性能的影响,在分子水平上探讨这种氧化对WPI结构修饰与功能影响机制,为核桃蛋白抗油脂产物氧化及对乳化性功能的损伤提供理论依据。【方法】采用酸沉碱溶法分离核桃蛋白,加入1,1,3,3-四乙基环丙烷制备的产物MDA最终浓度分别为0、0.1、1、5、10和20 mmol·L^-1,在室温下与WPI反应24 h,通过透析去除MDA,再真空冷冻干燥制备MDA氧化核桃蛋白。测定氧化蛋白标记性基团（巯基、二硫键、氨基和羰基）、物理化学性质（溶解度、浊度、疏水性、粒径和Zeta电位）及蛋白的乳化功能性等。【结果】MDA氧化造成核桃蛋白溶解度从68.74%下降到11.88%,特别是5—20 mmol·L^-1 MDA对溶解度有显著影响（P<0.05）,但对蛋白溶液的浊度影响不大（其所有值保持在0.32左右）;在蛋白分子基团修饰方面,0—1 mmol·L^-1 MDA对总巯基、二硫键、自由氨基和羰基含量影响不大,但5 mmol·L^-1以上浓度的MDA对总巯基和自由氨基含量的降低及对二硫键和羰基含量的上升影响显著（P<0.05）;聚丙烯酰胺凝胶电泳结果也显示较高浓度MDA对二硫键的含量增加影响显著,并促进核桃蛋白分子间（内）形成了还原性二硫键和非还原性共价键。在低于0.1 mmol·L^-1的MDA中氧化并不影响核桃蛋白二级结构,而在1 mmol·L^-1 MDA以上则能显著降低α-螺旋和β-折叠、β-转角含量,提高无规则卷曲含量;随着MDA浓度增加而引起的蛋白荧光强度变化规律与蛋白二级结构中的有序结构变化规律相同,特别是10 mmol·L^-1以上浓度的MDA能极大地降低蛋白荧光强度。0—1 mmol·L^-1 MDA氧化不改变蛋白疏水性,但1 mmol·L^-1以上浓度的MDA显著降低蛋白疏水性,疏水性最大降低程度为对照组的1/10;同时,低于1 mmol·L^-1 MDA氧化对核桃蛋白粒径和带电量没有显著影响,而浓度超过1 mmol·L^-1MDA则能显著提高蛋白粒径大小,并在10 mmol·L^-1 MDA时达到最大粒径约1 160 nm,且显著降低蛋白带电量,且随着MDA浓度提高而一直降低。在核桃乳化功能性方面,0.1 mmol·L^-1 MDA氧化即可显著降低蛋白乳化活性,而1 mmol·L^-1MDA氧化可显著降低乳化稳定性;随着MDA的浓度上升至20 mmol·L^-1,乳化活性和乳化稳定性持续降低并均能损失约2/3的功能性。【结论】核桃蛋白在脂类氧化产物MDA氧化体系中,随着氧化度的加剧,MDA通过与蛋白反应而显著修饰蛋白分子结构（包括其残基基团）,促进其交联形成大的聚集体进而改变其物化性质,从而显著降低蛋白的乳化功能性。     

黄土高原晚霜气温变化及瑞雪苹果花抗冻性研究

对黄土高原苹果产区花期霜冻天气变化的温度数据进行了实测，获得了自然霜冻的降温速度、低温极限、升温速度等参数，建立了室内模拟苹果花期霜冻的处理条件，据此对苹果新优品种瑞雪的花进行低温处理，分析了瑞雪苹果花对特定霜冻温度的适应能力。结果表明，苹果花期霜冻气温变化可分为Ⅰ型和Ⅱ型两种；Ⅰ型主要包括降温和升温两个阶段，Ⅱ型包括预降温、降温和升温三个阶段；Ⅰ型和Ⅱ型的降温、升温过程温度变化均呈线性。研究确定的Ⅰ型模拟条件为：30 min内，气温从20℃降到9℃,之后以1.2℃/h的速度降到-4℃并维持2 h,再以3℃/h的速度回升到16℃;Ⅱ型模拟条件为：30 min内，气温从20℃降到5.5℃,之后以1.6℃/h的速度降到-1.4℃并维持2 h,再以2.7℃/h的速度回升到16℃。Ⅰ型处理可对瑞雪苹果花造成严重伤害，中心花、边花花柱的冻害比例分别达到66.7%和49.05%;Ⅱ型处理对瑞雪苹果花器官伤害较轻，初步认为瑞雪苹果花可抵御短时间-1.4～-4℃的霜冻低温。