加强产学结合工作,提高学生培养质量

本回顾和总结了郑州牧专动物医药系通过加强产学结合，保证和提高高职教育培养质量的工作情况。通过系产学结合工作领导小组和系专业建设和教学改革旨导委员会建立和完善了产学结合的组织与管理机制。通过建立稳定的校外实训实习基地，结合行业生产特点组织实训学习，举办非学历高职教育与在职培训，创办与服务企业和开展职业技能培训与鉴定工作等形式开展产学结合工作，建立了良好的校企合作运作机制，有力地促进了学生培养质量的提高。     

动物抗菌肽基因工程表达研究进展

抗菌肽是一种具有广谱抗菌活性的多肽,它也是动物防御系统产生的一类对抗外源性病原体致病作用的防御性肽类物质.一般由20～60个氨基酸残基组成,分子量在2 000～7 000 Da左右.抗菌肽合成的速度非常快,肽键合成速度比IgM快100多倍[12],致使机体在受到损伤或者病原微生物入侵时能迅速产生抗菌肽杀伤入侵者.所以抗菌肽又被称为是机体理想的第一道防线.自从20世纪70年代首先由瑞典的科学家Boman H G在用大肠杆菌诱导惜古比天蚕分离到第一个真正意义上的抗菌肽-天蚕素(cecropin)以来,此后人们相继又在两栖类、昆虫、水产动物及包括人在内的哺乳动物甚至植物及细菌等广泛的生物谱中发现了1 700余种抗菌肽[3].多数抗菌肽具有优良的广谱抗菌性能,对于革兰阳性菌和阴性菌都表现出良好的抑菌和抗菌效果;抗菌机理不同于抗生素,对真核细胞几乎没有作用,仅作用于原核细胞,同时不易使病原菌产生耐药性;并且对于一些真菌、病毒、原虫和肿瘤细胞都有一定的杀伤作用,相对于抗生素具有效价高、无残留等特点,因此一直受到各国学者的广泛关注.随着基因工程技术的迅速发展,抗菌肽在体外克隆和转载表达等研究也得到很好的发展,各种转抗菌肽基因动植物及其产品相继问世,为抗菌肽的大规模生产利用提供一条广阔的道路.因此如何更好的开发利用好抗菌肽这一资源,使之为人类健康服务,已受到越来越多的重视.     

鸡传染性支气管炎病毒变异株ZZ2004 RT-PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank已发表的鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV) ZZ2004 3a、3b及E基因序列,设计1对引物,扩增540 bp特异性核酸片段,建立了检测IBV ZZ2004的RT-PCR方法.特异性试验结果表明,IBV ZZ2004能扩增出540 bp的核酸片段,而IBV M41、H120、H52毒株以及新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒(AIV)、传染性腔上囊病病毒(IBDV)均无特异性条带出现.敏感性试验结果表明,该方法的最低检出量为1.525 pg的模板.上述结果表明,本试验所建立的RT-PCR方法敏感性高、特异性强.利用建立的RT-PCR方法对从河南省分离的6株疑似鸡IBVZZ2004进行检测,结果5株为阳性.该方法的建立为IBV ZZ2004的诊断及流行病学调查提供了可靠的方法.     

豆状囊尾蚴头节压片与扫描电镜的比较形态学观察

通过压片、多种染色和扫描电镜对豆状囊尾蚴的头节结构进行了详细地比较观察,发现了豆状囊尾蚴头节的一些新结构和曾被误认的结构特点。在压片上,头节的顶突有2排小钩（假复层状排列）,用瑞氏染色时可见小钩与皮肌柱相连,用伊红染色见2小钩之间有一个相连的结节,用HE染色则见小钩上有蓝色的钙盐沉着。用扫描电镜观察,静止的头节顶突呈伞状,皮肌柱连接齿钩覆盖于头节的前端。从侧面观察可发现齿钩具有鹿角样的分支,覆盖头节的齿钩实际上是一排。4个吸盘呈洞穴状位于顶突之后分布在头节的四周。当头节处于运动状态时,顶突上的皮肌柱收缩,鹿角样的齿突向周围伸展,吸盘也发生环形和纵形收缩,大大增加了头节对宿主的侵袭力。在对培养的豆状囊尾蚴头节进行观察时,发现了无钩豆状囊尾蚴,其顶突较大且厚,表面粗糙,顶突上有一个较大的结节。总之,通过压片、多种染色和扫描电镜的比较观察,使我们对豆状囊尾蚴的头节结构有了更正确的认识。     

鸡传染性支气管炎病毒分型与诊断防治的研究进展

鸡传染性支气管炎是由鸡传染性支气管炎病毒引起的一种急性、高度接触性传染性疾病。以张口呼吸、气管啰音、咳嗽、肾脏病变为主要临床症状,可引起鸡的饲料报酬率降低,蛋鸡产蛋数量和蛋的品质下降。IBV的特点是高频变异,血清型众多,导致疾病的临床和病理变化复杂多样,由于其变异株出现比较快,毒株之间交叉保护力差,给IB的诊断和防治带来了较大困难。从IBV的分型、检测技术、综合防治方面对该病的研究进展进行了综述。     

抗菌肽基因工程表达技术研究进展

抗菌肽是生物体用来抵御外来病原体入侵而产生的具有抗菌作用的一类小分子蛋白质,是很多生物先天非特异性防御系统的重要组成部分,具有抗生素无可比拟的优点,是当前最为理想的抗生素替代品。实践表明,基因工程抗菌肽表达技术是大量获得抗菌肽最为经济、科学的有效途径。抗菌肽的表达目前主要以大肠杆菌和酵母表达系统为主,针对近年来抗菌肽开发的策略和实践,作者对大肠杆菌表达系统和酵母表达系统进行了简要综述,以期为抗菌肽的应用和推广提供参考。     

H5N1型禽流感模型侵染病毒的构建与鉴定

【目的】构建含有H5N1型禽流感病毒HA、NA的侵染模型病毒,并对构建的模型病毒进行侵染活性及特异性检测。【方法】采用PCR方法扩增出H5N1型AIVHA和NA基因,经纯化回收后将其分别克隆至真核表达载体pcDNA4.0中,构建pcDNA-HA、pcDNA-NA。然后采用磷酸钙共转染方法,将pcDNA-HA、pcDNA-NA和含有LUC报告系统的HIV骨架表达载体pNL4-3.Luc.R-E-,共同转染293T细胞,构建HIV/HA-NA模型病毒,对HIV/HA-NA模型病毒进行细胞侵染活性及特异性检测。【结果】HA、NA基因片段真核表达载体pcDNA-HA、pcDNA-NA与HIV骨架载体在293T细胞中成功表达组装,获得了HIV/HA-NA侵染模型病毒;敏感细胞特异性检测及侵染活性分析表明,HIV/HA-NA模型病毒与其野毒具有共同的敏感细胞。报告系统数据显示,模型病毒可以定量检测其对细胞的侵染程度。【结论】成功构建HIV/HA-NA模型侵染病毒,可以模拟H5N1病毒的侵染过程,定量报告病毒的侵染程度,并且该模型病毒不具有增殖能力,安全可靠,可以方便地用于普通实验室AIV抗体检测和特定药物的筛选。     

实时荧光定量PCR技术原理与应用

实时荧光定量PCR(real-ti me fluorescent quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术,它具有特异性强、PCR污染少、自动化程度高等特点。作者就实时荧光定量PCR技术的主要原理及目前在分子生物学领域,病原体和肿瘤等方面的检测和诊断应用进行了概述。     

豫北地区猪源致病性链球菌的分离鉴定及耐药性试验

猪链球菌(Streptococcus suis)病在世界上广泛分布,是由C、D、L群链球菌引起的猪多种疾病的总称,在临床上有败血型、脑膜脑炎型、关节炎型、支气管炎型和淋巴结脓肿型等.本病流行无明显季节性且发病率和死亡率较高,严重危害养猪业的健康发展.     

一株猪圆环病毒2型的分离与分子鉴定

利用PCR技术初步检测疑似PCV2感染的猪肺脏和淋巴结中的病毒.将样品处理后接种于PK-15细胞.从感染PK-15细胞PCR扩增PCV2基因片段,克隆入pMD18-T载体,并进行序列测定和比较.序列分析结果表明,分离病毒的PCR产物与国内多株PCV2核酸同源性大于98%,说明所分离的病毒为PCV2.