环介导等温扩增技术在畜禽疾病诊断中的应用

环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是2000年由Notomi等[1]建立的一种新的体外核酸扩增技术,该技术可以不需任何PCR仪和检测仪,通过具有链置换活性的DNA聚合酶的合成作用,在60℃左右的恒温条件下特异、高效、快速地扩增靶序列,不到1 h就能扩增109倍,扩增产物可以直接观察.     

环介导等温扩增技术及其在病原检测中的应用

近年来,环介导等温扩增技术已经被开发利用.它采用能特异识别靶序列上6个位点的4条引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶,在恒温条件(60℃～65℃)下,不到1 h的时间里进行核酸扩增,其扩增效率可达到109～1010个数量级,具有特异性强、等温灵敏、操作简单、产物易检测等优点.环介导等温扩增法已经被用来快速检测动物病原(病毒、细菌、寄生虫).论文就环介导等温扩增法的原理、特点及其在动物病原快速检测中的应用等做了简要的综述.     

哺乳仔猪诱食一法

实践证明,仔猪诱食训练得越早,消化吸收能力也就越强,日增重也就越多。下面介绍一种常用的诱食方法。     

龙游乌猪

主要产于浙江省衢州市东部龙游，樟树的占家、安仁、高原、莲花、兰塘、模环、龙游、寺后等地。     

承德无角山羊

承德无角山羊又名“燕山无角山羊”,俗称“秃羊”。是河北省承德市特有的“肉、皮、绒”兼用型山羊品种。承德无角山羊公母羊均无角,头大、额宽、颈粗、胸阔、耳宽大、略向前伸,眼大珠黄略外突,额头上有旋毛,颌下有,毛长绒密,背毛以全黑色居多,约占70%(称黑无角)。其次为全白色(称白无角),另有少数青黑色。体质结实、骨骼粗壮、腿肌充实、蹄质结实、骨骼粗壮,肢势端正、腿肌充实、腰背平直、体躯深广,侧视呈长方形,尾短小上翘。该品种具有体大健壮,生长发育快,产肉性能高的特点。在正常的饲养管理条件下成年公羊体高55cm,体长60cm,胸围78c…     

承德无角山羊

承德无角山羊又名“燕山无角山羊”,俗称“秃羊”。是河北省承德市特有“的肉、皮、绒”兼用型山羊品种。承德无角山羊公母羊均无角,头大、额宽、颈粗、胸阔、耳宽大、略向前伸,眼大珠黄略外突,额头上有旋毛,颌下有髯,毛长绒密,背毛以全黑色居多,约占70%(称黑无角)。其次为全白色(称白无角),另有少数青黑色。体承德无角山羊(公)质结实、骨骼粗壮、腿肌充实、蹄质结实、骨骼粗壮,肢势端正、腿肌充实、腰背平直、体躯深广,侧视呈长方形,尾短小上翘。该品种具有体大健壮,生长发育快,产肉性能高的特点。在正常的饲养管理条件下成年公羊体高55cm,…     

猫疱疹病毒1型部分糖蛋白的研究进展

猫传染性鼻气管炎又名猫疱疹病毒1型感染症,是由猫疱疹病毒1型引起的猫的急性和高度接触性的上呼吸道感染,该病毒是具有囊膜的双股DNA病毒,病毒囊膜糖蛋白对病毒的吸附、侵入和细胞间扩散是必需的,可刺激机体产生中和抗体。囊膜糖蛋白的研究不仅能了解病毒分子生物学的结构和功能,而且对该病的预防和诊断也具有重要意义。笔者就gB蛋白和gD蛋白的结构和分子生物学特性作一综述,并对其研究展进行了展望。     

三聚氰胺及其同系物的毒理学研究进展

三聚氰胺有3种同系物,分别为三聚氰酸、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸二酰胺,均属于三嗪类含氮杂环有机化合物。"三聚氰胺"这个原本对一般人而言很陌生的物质,由于其带来的危害已经引起了全世界的重视。研究者们针对该类化合物的毒性进行了大量研究,并且已取得了较大进展,三聚氰胺及其同系物的肝脏、肾脏、神经细胞等毒性被陆续揭示出来。由于环境、包装及人为因素的影响,三聚氰胺及其同系物对人和动物的危害不容忽视,论文以近年来最新资料为基础,对三聚氰胺及其同系物的毒理学研究概况作以综述,以期为该类化合物的毒理学评价和监测提供参考。     

布鲁氏菌VirB12蛋白纯化及其抗体ELISA方法的初步建立

为获得高纯度布鲁氏菌VirB12蛋白,对VirB12分泌表达蛋白先后进行亲和纯化和离子交换纯化。将其作为抗原包被ELISA板,优化反应条件后初步建立了布鲁氏菌抗体的ELISA检测方法。结果表明:蛋白纯化效果良好,重组蛋白纯度可达到98%以上。在建立的ELISA中,纯化重组蛋白的最佳包被浓度为1μg·mL-1,最适封闭剂为5%脱脂奶粉,血清最佳稀释浓度为1∶25,酶标二抗最佳工作浓度为1∶1500。对20份阳性血清及12份阴性血清的检测结果表明,其与SUANOVIR Brucella-Ab C-ELISA试剂盒的总体符合率达到90.6%,表明本试验建立的以VirB12重组蛋白为抗原的ELISA方法可以检测布氏杆菌感染抗体,有望研制成试剂盒用于养殖场布病的检测和净化。     

基因分析实现CAV VP1基因在大肠杆菌中的高效表达

通过分子生物学软件DNASTAR对CAV VP1的基因分析发现,CAV VP1基因的5端非抗原区编码蛋白的密码子中存在连续的大肠杆菌稀有密码子。为了在大肠杆菌中高效表达CAV VP1,文章研究扩增了不含5’端稀有密码子的CAV VP1基因,并将其插入原核表达载体pGEX-4T-1,构建了重组表达载体pGEX-VP1,成功进行了高效表达。电泳条带分析表明,融合蛋白的表达量在44%左右,为研究CAV VP1的抗原性提供了丰富的来源。