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Comparison of dot blot hybridization, polymerase chain reaction, and virus isolation for detection of bovine herpesvirus-1 (BHV-1) in artificially infected bovine semen. 总被引:2,自引:0,他引:2 下载免费PDF全文
Bovine semen samples spiked with bovine herpesvirus 1 (BHV-1) were used to compare dot blot hybridization, polymerase chain reaction (PCR), and virus isolation for detection of BHV-1 in bovine semen. The PCR amplification used primers targeting the BHV-1 thymidine kinase gene and a nucleic acid releasing cocktail (GeneReleaser); the PCR product was used as the DNA probe in dot blot hybridization; virus isolation was done in primary bovine fetal testis (BFT) cell cultures. Semen diluted 1:20 in tissue culture medium had the least cytotoxicity and inhibition of viral cytopathic effects in BFT cells, allowing detection of 1 TCID50/100 microL of BHV-1 suspension by virus isolation. The presence of foreign DNA such as bovine sperm DNA or salmon sperm DNA increased the sensitivity of dot blot hybridization in detecting BHV-1, allowing detection of 20,000 TCID50/100 microL of neat semen. The inhibition of PCR amplification of BHV-1 DNA in bovine semen was eliminated by diluting the samples 1:20 in tissue culture medium. The best PCR amplification was obtained when semen was diluted 1:20 and when a reaction buffer of pH 9.0, with 1.0 mM MgCl2 was used. Under these conditions, the PCR followed by ethidium bromide staining of agarose gels could detect 1 TCID20/100 microL of sample, whereas PCR followed by Southern blot hybridization could detect 0.01 TCID50/100 microL of sample.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS) 相似文献
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研究了叶面喷施抗蒸剂对盆栽苹果水分状态的影响。结果表明:抗旱剂一号(主要成分为黄腐酸)可明显降低树体蒸腾(最低时为对照的39.21%)、提高气孔阻力(最大时为对照的243.96%)和叶片水势(一般比对照提高0.2-0.4MPa、最大0.7MPa),并对叶温未产生明显的影响(变化一般小于1℃),有效作用期长达15d以上。在果树旱期喷施,可明显改善树体水分状态。腐殖酸效果不明显。 相似文献
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本文从分析同步发电机原动系统基本数学模型入手,提出了一种实现同步发电机原动系统仿真的专用可控硅直流调速系统及其实用装置。该控制系统采用有差调节的模拟调速器,水汽管道特性模拟、自平衡特性模拟和集成块模拟触发器,以及过流与超速保护,并可实现有差-无差调节的转换。 相似文献
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碧峰峡森林土壤性状研究 总被引:1,自引:0,他引:1
碧峰峡不仅是旅游景点,还是多学科研究的天然“实验室”,地处雅安亚热带区,原始森林植被保护完好,土壤垂直分布明显,地质现象复杂,也是大熊猫、金丝猴出没之地。经研究结果:土壤呈酸性,自然肥力高.经相关分析结果:土壤有机质含量和CEC等有关理化特性的相关性,较物理性粘粒与CEC间更加显著。 相似文献
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早生桑品种育151、育237的育成 总被引:1,自引:1,他引:0
采用杂交方法育成早生桑品种育151、育237,具有发芽早、产叶量高,叶质较优、抗黄化型萎缩病较强等特性,发芽期比早青桑捉早2-3天.比湖桑32号早8天左右.产叶量提高6-41%. 相似文献
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‘过山香’香蕉多芽体的诱导及其体细胞胚的发生 总被引:7,自引:2,他引:7
以我国重要香蕉种质‘过山香’ (AAB) 为材料, 研究了香蕉多芽体诱导、多芽体茎尖薄切片即分生组织性的表层结构物( scalp) 愈伤组织诱导和体细胞胚发生的合适条件。结果表明, 该品种单个不定芽茎尖在P4培养基(含BAP 100 μmol·L - 1和IAA 1 μmol·L - 1 ) 中继代5个周期后可诱导获得类似花椰菜结构的多芽体。从30 μmol· m - 2 ·s- 1光强, 光/暗周期(16 h /8 h) 培养的多芽体所获得的scalp在添加2,4-D 5μmol·L - 1和Zeatin 1 μmol·L - 1的愈伤组织诱导培养基中黑暗培养, 45 d后愈伤组织诱导率可达97.6%。诱导20 d后黄色分生小球体类结节状愈伤组织开始发生, 90~120 d后在分生小球体局部可获得白色或浅黄色松散的胚性愈伤组织(诱导率为17.5% ) 。从胚性愈伤组织诱导的体细胞胚在成熟培养基上培养60 d后体胚萌发率和植株转化率分别为14.5%和11.1%。 相似文献