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1.
猪繁殖与呼吸道综合征RT-PCR诊断方法的建立   总被引:39,自引:0,他引:39  
根据猪繁殖与呼吸道综合征病毒(PRRSV)核衣壳蛋白ORF7的序列,设计了1套引物,对立了检测PRRSV核酸的RT-PCR方法。通过对猪繁殖与呼吸道综合征(PRRS)标准毒株的检测,证明该方法不仅能够扩增出特异性的核酸片段。同时可以从基因水平上区分PRRSV美洲型和欧洲型。使用该方法对国内临床上疑似为PRRS的送检样品进行检测,结果为阳性,并确定基因型均为美洲型。该研究建立的从组织中直接提取细胞总  相似文献
2.
嗅鞘细胞对无血清培养诱导PC12细胞凋亡的作用   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用无血清培养诱导PC12细胞凋亡,研究嗅鞘细胞(Olfactory ensheathing cells,OECs)对去血清后诱导PC12细胞凋亡中的作用。通过MTT法检测细胞的活性,细胞形态学观察,以及结合流式细胞仪检测细胞的凋亡率,井对不同组细胞凋亡率进行比较。结果表明:①OECs培养上清对去血清后PC12细胞的存活有明显的促进作用;②从形态学上观察,OECs对去血清诱导PC12细胞凋亡有明显的抑制作用,使得细胞向死亡过渡受阻;②流式细胞对细胞周期分析,去血清诱导后的PC12细胞,大部分细胞滞留在G1期,细胞向S期过渡受阻,造成G1期细胞的堆积,它们所占比例分别为:73.6%,25.9%,0.5%;而OECs联合培养组所占比例:53%,42.3%,4.7%;OECs上清组:42.1%,52.2%,5.7%;正常有血清培养组:45,6%,41.4%,13%。凋亡细胞所占百分比分别为:60.3%,45,6%,37.4%,0.5%。  相似文献
3.
A dynamic, stochastic model simulating the technical and economic consequences of bovine virus diarrhoea virus (BVDV) infections for a dairy cattle herd for use on a personal computer was developed. The production and state changes of the herd were simulated by state changes of the individual cows and heifers. All discrete events at the cow level were triggered stochastically. Each cow and heifer was characterized by state variables such as stage of lactation, parity, oestrous status, decision for culling, milk production potential, and immune status for BVDV. The model was controlled by 170 decision variables describing biologic and management variables including 21 decision variables describing the effect of BVDV infection on the production of the individual animal. Two markedly different scenarios were simulated to demonstrate the behaviour of the developed model and the potentials of the applied modelling principle. The validation problem in relation to the model was discussed. A comparison between real and simulated data using data from a published case report was shown to illustrate how user acceptance can be obtained.  相似文献
4.
研究嗅神经鞘细胞(OEC)条件培养液对PC12细胞活性和分化的影响。原代培养并纯化OEC,收集其培养上清并制备条件培养液,然后用其培养PC12细胞,随后于倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化,通过MTT检测PC12细胞活性,免疫细胞染色观察β-tubulin的表达变化。结果显示OEC条件培养液可促进PCI2细胞突起生长,增加细胞活性,促进其β-tubulin的表达升高。从而证明OEC能够分泌一些促进PC12细胞和诱导其向神经元分化的营养因子。  相似文献
5.
利用PCR法克隆得到家蚕核型多角体病毒镇江株 (BmNPV ZJ)的iap 1基因。序列同源分析表明 :BmNPV ZJ的iap 1全长为 85 8bp ,与BmNPV T3株的碱基同源性为 96 % ,与BmNPV T3株相比少了一段编码 7个氨基酸的区域 ,该缺失区域的两侧有着独特的结构 :缺失区的 5′侧为连续编码 7个天冬氨酸的序列 ;缺失区的 3′侧为连续编码3个天冬氨酸的序列。NCBI的DART(DomainArchitectureRetrievalTool)功能域搜索表明 ;BmNPV ZJ的iap1含有 2个杆状病毒BIR功能域 ,但不含RING区域。BmNPV的iap是否具有抗凋亡作用迄今尚未见报道。利用以NF κB为探针的凝胶阻滞分析表明 ,BmNPV ZJ的iap1转染鼠的pc12细胞 ,可逆转肿瘤坏死因子TNFα处理pc12细胞引起的核因子 κB(NF κB)的激活。BmNPV ZJ的iap1对NF κB的作用途径及作用方式 ,以及其对哺乳动物细胞的细胞凋亡相关作用的研究正在进行之中  相似文献
6.
A wide variety of clinical and paraclinical methods have been used for diagnosis of equine grass sickness (EGS), but none of them could absolutely confirm the diagnosis, and postmortem pathologic examination is still considered the final step in precise diagnosis of EGS. Use of in vitro cell toxicity caused by EGS serum on neuronal cell lines was investigated. Three well-known cytotoxic methods were used to investigate the cytotoxicity of EGS serum on neuro-2a and genetically engineered PC12 Tet-Off P53 cells. The results of alamar blue reduction as an index for mitochondrial activities and intracellular adenosine triphosphate content assays, but not neutral red uptake, indicate that the EGS serum may affect the mitochondrial function and cellular metabolism at up to 60% of the cases. The results of present study might be used for diagnosis of EGS cases. Further studies with high sample size may lead us to uncover the pathogenesis of EGS and to increase the sensitivity and applicability of in vitro techniques as diagnostic tools.  相似文献
7.
为研究α-硫辛酸(α-lipoid acid,α-LA)对镉致PC12细胞氧化损伤的保护效应,通过不同浓度的醋酸镉染毒PC12细胞,并用100μmol/Lα-LA联合作用,测定PC12细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量。结果表明:与对照组相比,10μmol/L醋酸镉处理24h组细胞MDA含量和CAT活性极显著升高(P〈0.01),SOD和GSH-Px活性极显著降低(P〈0.01);不同浓度镉处理组细胞内MDA含量和CAT活性显著或极显著升高(P〈0.05或P〈0.01),10和20μmol/L组SOD和GSH-Px活性极显著降低(P〈0.01)。α-LA保护组与相应染毒组相比,MDA含量和CAT活性显著降低(P〈0.05),SOD和GSHPx活性有升高趋势,但组间差异不显著(P〉0.05)。说明镉可致PC12细胞发生氧化应激,α-LA可以提高PC12细胞的抗氧化能力,对镉引起的氧化损伤有一定的保护作用。  相似文献
8.
本研究旨在借助微卫星引物PCR和聚类分析软件,建立一种快速准确鉴定兔皮肤病原真菌的分子生物学方法.本试验以寡核苷酸重复序列(GACA)4为引物,首先对3种常见兔皮肤病原真菌(须癣毛癣菌、犬小孢子菌和石膏样小孢子菌)标准菌株的DNA进行扩增,然后用NTSYS-pc2.10软件分析其DNA指纹的多态性,并根据其多态性的差异进行鉴定分析.最后,用上述方法对临床上的分离株进行鉴定分析,并与传统的形态学鉴定方法进行比较.结果表明,3种不同的兔皮肤病原真菌均呈现不同的DNA指纹,且条带差异明显;聚类分析图显示,同种病原真菌的DNA指纹有很高的相似性(90%~100%);该方法对分离株的鉴定结果与形态学鉴定结果一致.可见,通过微卫星引物PCR结合聚类分析软件可以准确、快速地鉴定兔皮肤病原真菌.  相似文献
9.
在体外培养新生sD乳鼠的成骨细胞中暴露不同浓度的醋酸铅(O、20、40、80μmol/L),作用24h后检测细胞磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C(PC-PLC)活性与PC—PLC蛋白的表达量。结果表明:不同浓度的醋酸铅均可使成骨细胞PC—PLC活性和PC-PLC蛋白表达量极显著降低(P〈0.01),呈明显的剂量-效应关系,表明成骨细胞铅暴露可通过抑制PC—PLC而发挥毒性作用。  相似文献
10.
本试验旨在研究饲粮中添加大豆磷脂(SL)对产蛋鸡生产性能和鸡蛋磷脂含量的影响.选用360只22周龄健康产蛋鸡,随机分为5个处理,每个处理6个重复,每个重复12只鸡.5种试验饲粮中分别添加0、0.5%、1.0%、2.0%和4.0%的SL.试验期4周.试验结果表明:1)0.5%SL组平均蛋重最大(P>0.05),1.0%SL组平均日采食量最低(P>0.05),1.0%和2.0%SL组的料蛋比较低(P>0.05),均显著低于对照组(P<0.05),产蛋率以0.5%组最高(P>0.05),即饲粮中添加0.5%~2.0%的SL可改善产蛋鸡的生产性能;2)饲粮添加SL可以降低鸡蛋蛋黄水分含量(约1.7个百分点)(P>0.05)、1.0%、2.0%和4.0%SL组的蛋黄粗脂肪含量显著高于对照组(P<0.05);1.0%、2.0%和4.0%SL组全蛋中总磷脂显著高于对照组(P<0.05),1.0%和2.0%SL组蛋黄中总磷脂含量显著高于对照组(P<0.05),同时蛋黄胆固醇含量略有增加(P>0.05);1.0%、2.0%和4.0%SL组蛋黄和全蛋中磷脂酰胆碱(PC)含量显著高于对照组(P<0.05);2.0%SL组磷脂酰乙醇胺(PE)最高,但各组间差异不显著(P>0.05);PC/PE随饲粮SL添加量的增加而线性升高,0.5%、1.0%和2.0%SL组均显著高于对照组(P<0.05),4.0%SL组显著高于其他组(P<0.05).结果提示,饲粮添加一定水平的SL可改善产蛋鸡的生产性能,提高鸡蛋中总磷脂和PC含量.  相似文献
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