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1.
云南省乙型脑炎病毒宿主和媒介研究   总被引:18,自引:0,他引:18  
于1978年至1997年,从云南猪血液和乳猪脑组织中分离到乙型脑炎(JE)病毒5株,从蝙蝠脑组织中分得JE病毒10株,从鸟类脑组织中分得JE病毒5株,从15种蚊虫体内分离到JE病毒63株,从2种蠓类中分得JE病毒2株。分析认为,猪是JE病毒的主要扩散宿主,蝙蝠和鸟类在该病毒保存和传播中起重要作用;三带喙库蚊是该病毒的主要传播媒介,伪杂鳞库蚊、霜背库蚊、蚊腿库蚊、白蚊伊和刺扰伊蚊为重要媒介,蠓类亦可  相似文献
2.
乙型脑炎诊断方法研究进展   总被引:8,自引:2,他引:6  
乙型脑炎是由黄病毒科的乙型脑炎病毒引起的一种人与动物共患的虫媒病毒性疾病。由于本病对人类和多种动物危害非常严重,因而对其进行确诊很重要。本文对乙脑的病原学和血清学断方法进行了较为全面的综述。  相似文献
3.
乙型脑炎病毒NS1基因重组伪狂犬病毒的构建   总被引:7,自引:0,他引:7  
设计1对引物从含有乙型脑炎病毒NS1基因的质粒pNS1上亚克隆NS1基因,将NS1基因插入到中间转移载体pUSK中,获得重组中间转移质粒pUSK—NS1。将pUSK—NS1与伪狂犬病毒Ea株TK/gG/LacZ^ 突变株基因组共转染真核细胞IBRS-2,通过空斑纯化得到了乙型脑炎病毒NS1基因重组伪狂犬病毒株TK/gG^-/NS^ 1。经检测,重组病毒能表达具有生物活性的NS1蛋白。该重组病毒可作为猪乙型脑炎和伪狂犬病双价基因工程疫苗用毒株。  相似文献
4.
蝙蝠作为流行性乙型脑炎病毒宿主的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
1986、1988、1990和1997年的7-8月,在云南省共捕获653只蝙蝠,其中棕果蝠(Rousettus leschenaulti)593只,金管鼻蝠(Murina aurata)60只,采集血清及剖取脑组织作病毒分离和抗体检查。用细胞法和乳鼠法分离到6株病毒,带毒率为0.96%,其中从捕自景洪的棕果蝠脑组织中分离到3株,从河口的棕果蝠血清中分离到2株,从捕自耿马的金管鼻蝠脑组织中分离出1株。棕果蝠和金管鼻蝠的带毒率分别为0.84%和1.67%。这6株病毒能引起C6/36和BHK21细胞病变和导致乳小白鼠或3-4周龄小白鼠发病和死亡,并具有典型的嗜神经病毒感染症状,经血凝抑制,补体结合,免疫荧光和中和试验鉴定。新分离的6株病毒均为乙脑病毒(JE virus)。同期用血凝抑制试验对采获的425份棕果蝠血清作乙脑病毒抗体检查。阳性153-份,阳性率为36%,人有较高的感染率,。本次从棕果蝠和金管鼻蝠体内分离出乙脑病毒属具有重要流行病学意义。  相似文献
5.
日本乙型脑炎病毒的分离与鉴定   总被引:4,自引:1,他引:3  
收集一例疑为乙型脑炎病毒感染的种公猪肿大的睾丸病料,并将其处理制成匀浆过滤后,用乳鼠脑内接毒和细胞接毒相结合的方法盲传并分离病毒,然后设计一对PrM/E基因的特异性引物,采用RT-PCR方法对所分离的病毒进行鉴定,并将其PrM/E基因扩增产物测序,测序结果与乙型脑炎GenBank登陆的SA14-14-2株(AF315119)和SA14株(U14163)进行比较。结果表明,所分离病毒的PrM/E基因序列与JEV强毒株SA14和弱毒株SA14-14-2相应序列同源性分别为98.1%和97.1%,证实分离毒株为乙型脑炎病毒。  相似文献
6.
收集某猪场1例发病种公猪的睾丸病料,处理后采用细胞培养与乳鼠脑内接毒相结合的方法盲传并结合RT-PCR方法分离鉴定,命名为乙型脑炎病毒(JEV)贵州分离株(GZ株),然后根据GenBank登录的日本乙型脑炎病毒SA14和SA14-14-2株全基因序列设计并合成1对扩增E基因的特异性引物,用RT-PCR方法扩增出JEV贵州分离株E基因,并将E基因克隆到pMD19-T载体上,构建重组质粒pMD19-T-E,经双酶切鉴定、测序及序列分析鉴定后,再将E基因亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体上,成功构建乙脑病毒E基因原核表达质粒pET-32a-E,将构建好的原核表达质粒pET-32a-E转化至宿主菌BL21(DH3)中,诱导表达目的蛋白,表达产物经SDS-PAGE电泳和Western blot分析,得到了约59ku条带,与预期大小相符,进一步提取、纯化和浓缩目的蛋白,并将其加入弗氏佐剂后免疫小鼠,免疫后采血检测抗体。结果显示:乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达目的蛋白能诱导小鼠产生一定抗体水平,该研究为乙型脑炎亚单位疫苗的研究奠定了基础。  相似文献
7.
本文通过RT—PCR扩增了猪乙型脑炎病毒wHe株主要抗原基因NS1(约1.14kb)、prM-E(约2.1kb)、E-NS1-NS2A(约3.0kb),并将NS1、E-NS1-NS2A、PrM-E基因克隆、测序。与Cenbank发表的JEV基因序列进行序列分析,发现WHe株与其他12种典型的JEV强毒株的同源性在88.3%~99.4%之间。wHe株与K94P05株的同源性最低(88.3%),与P3株的同源性最高(99.4%),可认为wHe株是由P3株衍生而来的。在JEV基因组5’端389-3910的长3522nt的决定JEV抗原性的C-prM-E-NS1-NS2A区中,wHe株与P3株仅有21个碱基不同,其中的14个单碱基突变为同义突变,另外7个为错义突变,导致相应的氨基酸序列(1173个)中的6个氨基酸发生了变异,其中的5个氨基政变异出现在含有各关键的抗体中和决定簇的E蛋白内,另一个位于NS1蛋白内。  相似文献
8.
猪日本脑炎病毒RT-PCR检测方法的建立   总被引:2,自引:0,他引:2  
设计了1对引物,利用RT-PCR技术检测乙型脑炎病毒(JEV)。从GenBank中查出收录的31株猪乙型脑炎病毒E基因的已知序列,用DNA star软件对这31株猪乙型脑炎病毒E基因进行同源性分析,以确定扩增的靶序列。以这段靶区域为模板,利用Primer 5软件设计了1对引物,用减毒株SA14-14-2建立了检测乙脑病毒的RT-PCR方法,经敏感性,特异性试验测定,证明该方法敏感,特异;该法可检出样品稀释至256倍的鼠脑毒,相当于0.06个TCID50,对4株河北地区JEV分离株进行检测,结果所设计引物对4株病毒均能扩增出预期的片段。  相似文献
9.
乙脑病毒PrME基因在杆状病毒表达系统中的表达   总被引:2,自引:0,他引:2  
本试验将乙型脑炎病毒(JEV)的PrM/E基因的HindⅢ-BglⅡ片段(2.1kb)插入到杆状病毒载体pAcUW31的BamHI位点,使外源基因置于多角体蛋白启动予下游,构建成转移载体pAcUW31JE,以Lipofectin作为共转染试剂,将纯化的pAcUW31JE与Bsu36I线性化的杆状病毒AcMNPV.LacZDNA共转染昆虫sf9经病毒蚀斑纯化技术和X-gal与中性红双重染色技术,随机  相似文献
10.
猪乙型脑炎乳胶凝集试验与血凝抑制试验方法的比较   总被引:2,自引:0,他引:2  
用血凝抑制试验 (HI)和乳胶凝集试验 (LAT)两种方法检测乙型脑炎弱毒疫苗免疫猪血清 ,结果均呈阳性反应。用LAT对来自 12个猪场的 94份猪血清进行了乙型脑炎病毒 (JEV)抗体检测 ,并与HI进行了对比 ,两种方法检测结果阳性符合率和总符合率分别为 90 .3% (5 6 /6 2 )和 88.3% (83/94 ) ,两种方法检测结果差异不显著 (p >0 .0 5 )。对来自无乙型脑炎的 12头健康猪血清进行检测 ,两种方法检测结果均为阴性。结果表明 ,用LAT与HI检测乙型脑炎结果符合 ,前者更为简便和实用。  相似文献
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