口蹄疫灭活疫苗中蛋白质含量测定方法的比较

口蹄疫灭活疫苗中蛋白质含量的测定，可以反映出疫苗生产工艺的优劣以及疫苗质量。采用凯氏定氮法、改良Lowry法和考马斯亮蓝法三种较常见的蛋白质含量测定方法，对全国六个不同口蹄疫灭活疫苗生厂家共计15批疫苗的总蛋白质含量进行测定，并对测定结果进行比较，同时采用SDS—PAGE对样品中蛋白质含量进行定性，验证以上三种方法测定结果。结果表明，这些疫苗的总蛋白质含量差异比较大，1mL水相样中蛋白质含量在50—2000μg范围内。三种检测方法比较表明，改良Lowry法能较真实的反映口蹄疫灭活疫苗中蛋白质含量；与凯氏定氮法相比，此方法操作简单，工作效率高，而且低耗。  

应用高效体积排阻色谱法测定市场抽检口蹄疫灭活疫苗中的抗原（146S）含量

应用高效体积排阻色谱法对5批市场抽检口蹄疫灭活疫苗中有效抗原(146S)含量进行检测,并使用口蹄疫O型、A型和亚洲1型抗原测试卡对5批疫苗中的抗原进行鉴别。结果显示高效体积排阻色谱法测定146S标准品浓度与峰面积线性关系良好 (R₂ = 0.9937, n = 7),5批疫苗均检测到146S特征吸收峰,经计算得到灭活疫苗中有效抗原含量分别为2.05μg/mL、3.73μg/mL、2.03μg/mL、4.87μg/mL、3.41μg/mL；使用抗原测试卡鉴别了5批疫苗中的抗原类型。结果表明高效体积排阻色谱法简便、高效,准确度较高,有望在口蹄疫灭活疫苗的质量控制中发挥重要作用。  

口蹄疫O型灭活疫苗对不同母源抗体仔猪血清中抗体及细胞因子水平的影响

为了解不同母源抗体水平对仔猪免疫后抗体消长的影响，以及免疫后细胞因子的变化，使用口蹄疫O型灭活疫苗对40头初生仔猪进行免疫，并于初次免疫后28 d二次免疫，采用液相阻断ELISA方法检测血清中抗体滴度,双抗体夹心ELISA法检测血清IL-8和IL-12水平。结果显示，母源抗体水平越高对于初次免疫后仔猪抗体影响越大；二次免疫后抗体水平可长时间维持较高水平。初次免疫后14 d～28 d，血清中IL-8和IL-12水平上升极显著（P＜0.01）；二次免疫后14～28 d，IL-8水平上升极显著（P＜0.01），IL-12水平上升不显著（P＞0.01）。试验表明，母源抗体水平是影响仔猪免疫后抗体消长的因素之一；口蹄疫O型灭活疫苗能有效提高血清中IL-8和IL-12水平。  

口蹄疫灭活疫苗蛋白质含量测定操作程序的确立

为优化用于口蹄疫灭活疫苗蛋白质含量测定的改良Lowry法，进而确立口蹄疫灭活疫苗蛋白质含量测定的操作程序，探索了有机溶剂破乳剂、酚红以及丙酮沉淀对测定结果影响。结果表明：样品中含酚红和有机溶剂均导致测定值较标准值高；有机溶剂破乳后，水相样经过丙酮沉淀测定值较标准值低；丙酮直接沉淀疫苗后测定蛋白质值与标准值符合度最高，丙酮沉淀回收率随蛋白浓度升高而升高，回收率在90％～100％之间。试验首次确立了改良Lowry法检测口蹄疫灭活疫苗中蛋白质含量的操作程序为丙酮直接沉淀疫苗后测定蛋白质浓度。并成功应用于口蹄疫灭活疫苗蛋白质含量的测定。