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1.
非洲猪瘟间接ELISA诊断试剂盒的研究   总被引:12,自引:6,他引:6  
用带有编码非洲猪瘟病毒衣壳蛋白P72 基因的重组杆状病毒(Bacp72)作载体,在sf9细胞中表达并得到重组P72蛋白,SDS-PAGE可得到分子量在 72kDa左右的电泳带。用标准阳性非洲猪瘟血清对 P72蛋白进行 ELISA检测,证明该蛋白具有生物学活性。用P72作为间接法的包被抗原,对ELISA反应条件进行了优化。确定最佳包被液为PBS(pH7.2)、最佳封闭液为1%PCT、最佳血清稀释液为4%PEG6000/PBS、最佳冲洗液为0.5M NaCl/0.5%Tween-20/PBS(pH7.2)。本实验反应体系采用50μl的微量法,可节约试剂及抗原。反应在2小时内即可完成,达到了快速诊断的目的。包被了抗原并用封闭液封闭后的酶标板密封后保存于-20℃的冰箱中,至少可以保存5个月。阻断试验和交叉试验表明ELISA法有良好的特异性。间接ELISA比Dot-ELISA法具有更高的灵敏性。血清学调查没有得到阳性结果,与我国实际情况相符。用Bacp72表达的非洲猪瘟病毒P72蛋白抗原作为间接ELISA的检测抗原来检测非洲猪瘟血清具有快速、简单、无感染的特点。本实验为非洲猪瘟ELISA检测试剂盒的最终组装提供了实验依据。  相似文献
2.
非洲猪瘟病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立   总被引:6,自引:1,他引:5       下载免费PDF全文
本试验利用环介导等温扩增技术(LAMP)建立了一种快速高效检测非洲猪瘟病毒的方法。整个反应在水浴锅中恒温进行,不需要其他昂贵仪器,30 min即可得到阳性结果,灵敏度是OIE标准PCR方法的100倍,并且与其他常见猪DNA病毒无交叉反应。该方法非常适合在野外现场或缺乏试验条件的边远地区检测非洲猪瘟病毒。  相似文献
3.
不同非洲猪瘟病毒株j5R基因及其编码蛋白的比较   总被引:5,自引:0,他引:5  
根据非洲猪瘟病毒MalawiLIL20/1株j5R阅读框C端抗原决定簇序列制备的合成肽能被不同毒株感染康复猪的免疫血清识别。多聚酶链反应研究表明,9个不同毒株的j5R基因长度略有差异;蛋白转印杂交试验证明,这种基因长度的差异导致相应蛋白多肽的长度多样性。这些结果进一步证明,长度多样性是非洲猪瘟病毒基因及其编码蛋白较为普遍的特点。  相似文献
4.
非洲猪瘟传入我国危害风险分析   总被引:5,自引:0,他引:5  
近年来,非洲猪瘟病毒疫情不断向非洲以外的欧洲、美洲国家蔓延,亚洲国家也面临非洲猪瘟侵入的严重威胁,引起各国政府及兽医科技工作者的高度关注。剖析目前该病在全球以及我国周边国家的流行状况,分析该病毒的病原学特点和传播特性,以及传入我国的可能途径,再分析我国对该病的防控现状等因素,认为目前我国存在传入非洲猪瘟的较高风险,需要按照我国既定的新发、突发重大动物疫病防控方案加强对非洲猪瘟的防范。  相似文献
5.
应用PCR检测非洲猪瘟病毒的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
6.
非洲猪瘟病毒研究进展   总被引:2,自引:1,他引:1  
非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的猪的一种烈性传染病,曾在非洲和欧洲国家广泛流行,并造成巨大的经济损失。虽然本病目前仅在部分非洲国家呈地方性流行,但由于对养猪业的危害巨大,且无有效的疫苗用于防疫,仍被国际兽疫局列为A类重点防范的传染病。对于ASFV而言,虽是严格的动物病毒,所致疾病的危害也限于非洲部分地区,但由于具有一些独特的特点,尤其是具有复杂的免疫逃逸机制,一直是动物分子病毒学研究的热点,而且取得了突破性研究进展。  相似文献
7.
作者旨在探寻全球尺度上非洲猪瘟的发生状况,并构建其输入的风险模型.在数据挖掘和概率风险评估理论基础上,应用地理学第一定律、风险邻近和地理风险分析的方法开展研究.结果显示:①全球猪的养殖主要分布在中国、美国、巴西、加拿大及欧洲的德国、西班牙、法国等国家,养殖数量占全球猪存栏的76.67%左右.养殖较为密集的国家和地区主要为西班牙、德国、荷兰、比利时及中国、越南等.②基于地理学第一定律,在疫病风险管理和控制中我们提出"风险邻近"的概念,即在空间和时间上邻近的事件对与其相邻的空间单元和时间单元的风险影响要远大于较远的空间和时间单元的影响权重.③几内亚比绍、纳米比亚、俄罗斯、塞内加尔、贝宁、布基纳法索、佛得角、加纳、意大利、马达加斯加、莫桑比克、多哥等国家和地区在近年度报道发生多频次的非洲猪瘟疫情.基于"风险邻近",这些国家被认为是目前全球非洲猪瘟疫情风险最高的地区和国家,从该群体的国家进口和输入猪及其产品会带来较大输入风险.④从具有非洲猪瘟疫情发生风险的区域输入猪及其产品会给输入区域带来输入风险,其输入一批次产品的风险大小可以用模型表达为:PInport=f1.(1-Se)+(1-f1).f2.(1-Se)+(1-f1).(1-f2).f3.(1-Se)+(1-f1).(1-f2).(1-f3).f4.(1-Se)+(1-f1).(1-f2).(1-f3).(1-f4).f5.(1-Se),其中出口国和出口地区的产地检疫所能感知和发现的风险大小--f1是整个输入风险中权重最大的.这提示在动物及其产品移动和贸易中,有效的产地检疫有着极端重要性.目前全球范围内,非洲猪瘟的主要风险来自于几内亚比绍、纳米比亚、俄罗斯、塞内加尔、贝宁、布基纳法索、佛得角、加纳、意大利、马达加斯加、莫桑比克、多哥等国家,其次为喀麦隆、刚果、马拉维、卢旺达、乌干达、安哥拉、肯尼亚、尼日利亚、南非、坦桑尼亚、赞比亚等国家.从非洲猪瘟风险国家输入猪及其产品会带来一定的输入风险.有效强化产地检疫,开展风险区划,对非洲猪瘟等疫病的风险管理具有重要的意义.  相似文献
8.
非洲猪瘟病毒分子流行病学进展   总被引:2,自引:0,他引:2  
非洲猪瘟是以高热、皮肤和内脏器官出血、高死亡率为特征的猪的一种急性、热性、高度致死性传染病,目前主要分布于非洲、欧洲的意大利撒丁岛和俄罗斯的西南部地区。非洲猪瘟病毒只有1个血清型,但利用编码vp72蛋白的B646L基因可以将现有流行毒株分为22个基因型。通过分析基因型差异,可以进一步了解目前毒株在全球的分布以及流行趋势,以便及时采取应对措施。  相似文献
9.
非洲猪瘟—来自热带的威胁   总被引:1,自引:0,他引:1  
10.
用PCR技术快速检测非洲猪瘟病毒   总被引:1,自引:0,他引:1  
选择编码非洲猪瘟病毒结构蛋白VP73的部分基因片段为模板,用PCR技术检测非洲猪瘟病毒DNA,电泳分离可见1条长约1kb的DNA扩增带。本方法具有安全、快速、敏感等特点  相似文献
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