首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
文章检索
  按 检索   检索词:      
出版年份:   被引次数:   他引次数: 提示:输入*表示无穷大
  收费全文   315篇
  国内免费   6篇
  完全免费   12篇
  畜牧兽医   333篇
  2018年   3篇
  2017年   11篇
  2016年   19篇
  2015年   15篇
  2014年   61篇
  2013年   50篇
  2012年   59篇
  2011年   19篇
  2010年   16篇
  2009年   19篇
  2008年   9篇
  2007年   11篇
  2006年   8篇
  2005年   8篇
  2004年   2篇
  2003年   4篇
  2002年   1篇
  2001年   2篇
  2000年   2篇
  1999年   2篇
  1998年   4篇
  1995年   1篇
  1989年   2篇
  1988年   3篇
  1986年   2篇
排序方式: 共有333条查询结果,搜索用时 31 毫秒
1.
猪流行性腹泻研究概况   总被引:20,自引:1,他引:19  
概述了猪流行性腹泻病毒的病毒特性、基因组结构及主要病毒蛋白、诊断方法、预防和治疗等方面国内外研究情况。  相似文献
2.
应用多重RT-PCR方法检测158例猪粪样中的两种冠状病毒   总被引:6,自引:0,他引:6  
根据GenBank上发表的猪流行性腹泻(PEDV)和猪传染性胃肠炎(TGEV)基因序列,针对其PEDVM(膜蛋白)基因保守区及TGEV的S基因(纤突蛋白基因)5’端保守区,各设计一对引物,可特异扩增出目的条带大小分别为467bp和1062bp。用上述两对引物对同一样品中的PEDV和TGEV可进行鉴别检测,对猪的其它病毒和细菌的PCR扩增结果均为阴性。敏感性测定结果表明:该双重PCR方法能检出PEDV1pg、TGEV0.1pg的模板。同时采用建立的多重RT-PCR及韩国引进的PEDV和TGEV病毒抗原快速诊断试剂盒检测结果显示:此多重RT-PCR方法特异性强,且较快速试剂盒更加敏感。应用多重RT-PCR对158份临床猪粪样的检测结果表明:我国很多猪场普遍存在TGEV和PEDV,尤其以PEDV污染更为严重,感染率达53.2%,但双重感染率较低,仅为4,4%。  相似文献
3.
应用RT—nested PCR检测猪流行性腹泻病毒的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
将猪流行性腹泻病毒分离株HLJ02,经过胰酶处理后,在Vero细胞上增殖。利用Gen-Bank中的基因序列设计合成了2对M基因引物。应用RT-PCR和RT-nested PCR检测分别扩增出HLJ02的854bp的M全基因片段和412bp的M基因部分片段,而在猪传染性胃肠炎病毒中和Vero培养液中未扩增出上述产物。结果表明,RT-nested PCR检测可用于检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)。  相似文献
4.
猪流行性腹泻病毒分子生物学研究进展   总被引:5,自引:0,他引:5  
猪流行性腹泻病毒在Vero细胞上培养成功后,病毒全基因组的序列和分子结构特征,结构蛋白和非结构蛋白的生物学特性和功能,病原学、血清学和分子生物学的诊断技术,体液免疫、细胞免疫和局部黏膜免疫的机理,疫苗和病毒的细胞受体等方面得到了广泛的研究。但是,与其他冠状病毒相比,猪流行腹泻病毒的研究还比较滞后,许多研究还没有开展或不够深入,为了能加快对猪流行性腹泻病毒研究进程,对其最近的分子生物学研究进展做了综述,为猪流行性腹泻病毒的深入研究提供参考。  相似文献
5.
间接ELISA检测猪流行性腹泻病毒的抗体水平   总被引:4,自引:0,他引:4  
本研究以猪流行性腹泻病毒细胞培养物中提纯的抗原,组织毒兔获得的高兔血清建立了间接ELISA检测PEDV抗体水平。结果表明:包被怕浓度为1:20000,酶标羊抗猪IgG浓度选用1:250为测定抗PEDVIgG抗体的最达工作浓度。田间检测结果与临床发病预期结果一致。  相似文献
6.
流行性腹泻病毒M基因与甲病毒载体重组RNA的构建   总被引:4,自引:1,他引:3  
将猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M基因导入甲病毒载体(plasmid Semliki ForestViru,pSFV) ,研究该基因及其编码蛋白的表达。首先将扩增的病毒M 基因导入pSFV的SP6 启动子下游。用Spe Ⅰ酶将pSFV M重组质粒DNA 线性化,再将其体外转录成5′末端含帽子结构的重组RNA。然后通过电穿孔法将此重组RNA转染BHK 21 细胞,收集病毒样粒子用于感染BHK 21 细胞。采用细胞免疫化学的方法对转染和感染细胞的表达产物进行分析。pSFV M RNA 转染和病毒粒子感染哺乳动物细胞表达的M 蛋白,可与PEDV多克隆抗体起特异反应,证明体外转录的重组RNA 含有PEDV M的特异序列。  相似文献
7.
多重RT-PCR检测猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒   总被引:4,自引:0,他引:4  
为了检测、区分猪传染性胃肠炎(TGE)和猪流行性腹泻(PED),建立了同时检测这2种疾病痛原体的多重PCR方法。参考GenBank登录的TGEV和PEDV纤突蛋白S基因序列,经DNAsis 2.0比较分析。分别筛选出TGEV、PEDVS基因相对保守区。以TGEV TH-98株(GenBank登陆号为AF494337)和PEDV CV777株(GenBank登陆号为NC003436)为参考模板,利用软件Primer3设计合成了2对寡核苷酸引物,以ST细胞培养的TGEV和PEDV毒株核酸为模板。利用所设计的2对引物进行多重RT-PCR扩增,结果同时得到与试验设计相符的499bp(TGEV)和199bp(PEDV)的扩增条带。而对其他3种猪病原的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明。建立的多重RT-PCR方法可检测出10pgTGEV RNA和100pg PEDV RNA。  相似文献
8.
2011年猪流行性腹泻病毒的遗传变异分析   总被引:4,自引:0,他引:4  
为分析猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,本研究设计合成2对扩增S1基因的引物,利用套式RT-PCR方法,对2011年分离的17个PEDV S1基因进行扩增、克隆和序列测定;并将其进行比对和遗传演化分析。结果表明:17个PEDV S1基因序列与参考病毒株S1基因核苷酸序列同源性为90.54%~99.96%,与经典病毒株CV777相比,其中有6个S1基因在453 bp~454 bp处存在3个核苷酸的缺失;一个在453 bp~454 bp处缺失6个核苷酸;其它10个S1基因在173 bp~186 bp之间存在12个核苷酸的插入,413 bp~417 bp之间有3个核苷酸的插入,467 bp~468 bp处缺失6个核苷酸,插入和缺失位点与韩国病毒株KNU-0901、KNU-0905、KNU-0801相似。S1基因系统进化树分析表明,PEDV S1基因分为3群,其中7个S1基因属于PEDVⅠ群,另外10个属于PEDVⅢ群。  相似文献
9.
应用猪流行性腹泻(PED)—ELISA直接法(双抗体夹心法)对120头健康猪和5头猪传染性胃肠炎(TGE)病猪粪便标本进行检测,均不出现交叉反应;对15头PED病毒实验感染仔猪粪便标本检测,全部呈阳性;将对3(?)份ELISA阳性粪便标本和3份阴性标本的检测结果与电镜观察结果比较,其阳性符合率为97.37%,阴性符合率为100%;对在PED发病季节从不同地区采集的腹泻病猪粪便标本112份检测结果,阳性率为60.71%,而阴性反应的标本,绝大多数是在病愈后15~20d采集的。  相似文献
10.
应用电镜(EM)和免疫电镜(IEH)技术对猪流行性腹泻病毒(PEDV)和胃肠炎病毒(TGEV)进行了观察。EM结果表明两者在形态上存在有细微差异:PEDV为多形性,粒子大小变化范围较大,纤突短小而密集,核芯呈多形性;TGEV为圆形,或椭圆形,粒子大小较均一,纤突大而稀疏,核芯为环形。IEM结果PEDV与TGEV无免疫交叉反应。可应用EM和IEM对PEDV和TGEV做实验室诊断。  相似文献
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号