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1.
我国犬瘟热病毒的生态学调查研究   总被引:25,自引:0,他引:25  
本研究应用电子显微镜技术检查了17个毛皮动物和野生动物的676份材料,从犬,貂,貉,狐熊,小熊猫,大熊猫,狼,狮,虎,猞狮、金猫等12种动物病料中,检出含有CDV材料487份。应用间接ELISA、免疫荧光和中和试验等技术检测了8种动物158份血清,其中从犬,狐,小熊猫、虎、金猫,狼等6种动物的106份血清中检出了抗CDV抗体。应用RT-PCR和基因探针检查了4种动物的37份材料,其中有29份阳性。  相似文献
2.
犬瘟热病毒抗体检测方法的比较研究   总被引:19,自引:0,他引:19  
用犬瘟热(CD)弱毒和自制的高免犬血清,建立了检测犬瘟热病毒(CDV)抗体的中和(SN)试验、间接荧光抗体技术(IFAT)和间接免疫酶染色法。这3种方法对38份CD弱毒疫苗免疫犬血清抗体效价的测定结果表明,当被检血清稀释度为1∶100时,SN试验、IFAT和间接免疫酶染色法测定时的阳性血清数分别为29,7和31份,IFAT和间接免疫酶染色法测定结果相对于SN试验结果的符合率分别为42.1%和94.7%。同时发现,当SN试验测定的血清效价在1∶100以上时,IFAT测定结果总是在1∶25以上,间接免疫酶染色法测定结果总是在1∶100以上。3种方法以各自初步确定的CDV血清抗体效价完全保护值指标计算所测血清的完全保护率,SN试验为76.3%,IFAT为78.9%,间接免疫酶染色法为81.6%。据此认为,IFAT和间接免疫酶染色法均可部分代替SN试验用于CD疫苗免疫效果的评价、免疫犬抗体水平的监测以及CD的流行病学调查  相似文献
3.
犬瘟热病毒南京分离株的生物学特性鉴定   总被引:14,自引:0,他引:14  
从南京地区临床诊断疑似为犬瘟热的病犬脑组织分离到 1株病毒 ,经鉴定为犬瘟热病毒 ( CDV) ,命名为 CDV-NJ1 5,对其培养特性、细胞毒力、血凝活性、抗原性、结构多肽和对犬的致病性进行了研究。结果表明 ,除 Vero外 ,CDV-NJ1 5还能在 MDCK、BHK-2 1、FE、DJRK、HEp-2等细胞系有限增殖 ,产生的 CPE特征与 Vero细胞类似 ,但不能在 PK1 5细胞系增殖。在 Vero细胞的 TCID5 0 和空斑形成单位分别为 1 0 - 5 .0 /m L和2 .4× 1 0 5 PFU/m L。参考株 CDV-Onderspoort的培养特性和细胞毒力基本与之相似 ;交叉中和试验表明 ,二者之间具有交叉反应和相同的抗原性 ;二者的结构多肽 NP蛋白和 F蛋白用特异性单克隆抗体免疫转印技术分析 ,未显示差异。动物回归试验表明 ,CDV-NJ1 5对犬表现出弱致病力。以上结果提示 ,该分离株是一持续性感染的弱毒株 ,其抗原性与疫苗株未显示差异  相似文献
4.
犬瘟热病毒野毒株融合蛋白主要功能区基因的变异研究   总被引:12,自引:2,他引:10  
根据犬瘟热病毒(CDV)融合蛋白(F)基因的核苷酸序列,设计合成了10条引物。用1对引物从延吉犬病料中扩增出了含F2区基因的314bp的片段。除两端引物序列外为265bp,编码88个氨基酸。它与日本弱毒株(CDV-D,Ooderstepoort弱毒株(CDV-ON)、海豹瘟热病毒2型(PDV2)、1型(PDV1)在核苷酸和氨基酸水平上的同源性,分别为98.1%和95.5%、96.2%和93.2%和  相似文献
5.
犬瘟热病毒当前研究进展   总被引:12,自引:0,他引:12  
犬瘟热(Canine Distemper)是由犬瘟热病毒(Canine Distemper Virus,CDV)引起的多种动物共患的传染病。在自然条件下,CDv能够感染犬科、鼬科、浣熊科、大熊猫科、猫科等多种动物,对我国养犬业、经济动物养殖业、动物园观赏业、野生动物保护业以及实验动物等危害极大。近几年来,在患Paget’s疾病的病人组织中检出了CDV核酸,因此其潜在的公共卫生学意义也已受到广大国内外学者的关注,开展的研究涉及病毒的病理学、免疫学、分子流行病学、检测等方面。  相似文献
6.
Dot—ELISA检测犬瘟热病毒抗原的研究   总被引:12,自引:0,他引:12  
用建立的三抗体夹心法Dot-ELISA检测犬瘟热病毒(CDV)抗原,其抗原最低检出量为1.15μg/mL(0.57625ng/点),经与常规ELISA对104份自然感染犬的血液白细胞样本,60份眼结膜分泌物样本,73份脾、肝、淋巴结等脏器样本进行检出的阳性率分别为92.31%、66.67%、83.56%和90.72%、63.29%、81.86%;两种方法检出的总阳性率分别为83.54%(198/2  相似文献
7.
犬瘟热病毒的检测技术   总被引:12,自引:1,他引:11  
从免疫学和分子生物学两方面对犬瘟热病毒检测技术进行了综述 ,并探讨了今后的研究方向。  相似文献
8.
犬瘟热病毒A株核衣壳蛋白基因的克隆、表达及特性分析   总被引:11,自引:3,他引:8  
根据GenBank中A75/14株犬瘟热病毒(CDV)核衣壳蛋白(N)基因的核苷酸序列设计合成一对引物,经RT-PCRgA病毒总RNA中扩增出1600bp的N基因,将其克隆于pMD18-T载体对其进行序列分析。结果表明A株CDV与其它毒株N基因序列的同源性较高。将N基因定向克隆于原核表达栽体pPROEXX^TM HT,用重组质粒pPROEX^TM HT-N转化感受态E.coli DH5a细胞,用IPTG于37℃诱导表达了分子量约63Ku的重组N蛋白,占菌体总蛋白18%。经Western blot分析证实所表达的重组N蛋白具反应活性,将表达产物用ProBond^TM纯化试剂盒进行了纯化。用所获得的重组蛋白免疫家兔制备的多克隆抗体可与CDV全病毒发生特异性反应,经琼扩试验测定其效价为1:16。本实验为下一步用重组N蛋白作为诊断用抗原,建立特异的CDV抗体检测方法奠定了基础。  相似文献
9.
犬瘟热脏器组织中的抗原定位及病理形态学观察   总被引:11,自引:1,他引:10  
本文采用免疫组化间接BA法,对临诊疑似犬瘟热病犬脏器组织中的抗原,进行了定位检查并进行了系统病理学观察。结果表明:发病犬大脑、小脑、延髓、肺、心、脾、膀胱、肠、肝、胰、肾上腺等组织细胞及血管内皮、支气管上皮细胞胞浆内均可见抗原阳性反应。同时,抗原阳性反应组织、器官均可见不同程度的病理变化。  相似文献
10.
细菌CpG—DNA对犬免疫增强效果的研究   总被引:10,自引:1,他引:9  
以犬瘟热病毒为模式病毒,将CpG-DNA与铝胶、蜂胶2种对照佐剂分别与犬瘟热病毒灭活疫苗配合,给犬接种疫苗前后用微量中和试验抽查血清中和抗体效价,根据抗体效价高低判断佐剂的免疫增强效果。结果表明,3种佐剂疫苗均能诱导产生特异性抗体,但组间抗体效价有显著差异(P<0.01),CpG-DNA的免疫增强作用明显高于其它2种佐剂,CpG-DNA所诱导的抗体效价较蜂胶佐剂高5倍,较铝胶佐剂高7倍。  相似文献
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