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1.
氯霉素间接竞争ELISA(ciELISA)检测方法的建立   总被引:31,自引:4,他引:27  
以人工合成的氯霉素-牛血清白蛋白(CAP-BSA)为包被抗原,氯霉素(CAP)为竞争半抗原,两者与一定量的抗CAP-McAb反应。结果表明,理想的包被抗原质量浓度为1.25mg/L,抗CAP-McAb稀释倍数为1∶12000,酶标二抗稀释倍数为1∶5000,最适检测范围为1-100μg/L,最小检测为0.1μg/L,批内和批间变异系数分别为3.62%和5.19%。得到回归方程(y=1.2730-0.6745x,r^2=0.9779)和标准曲线,从而建立了快速定量测定CAP含量的间接竞争酶联免疫吸附试验(ciELISA)。  相似文献
2.
禽流感病毒夹心ELISA快速检测方法的研究   总被引:22,自引:1,他引:21  
以禽流感病毒(AIV)湖北分离株(H9N2亚型)提纯物为免疫原,制备出鸡抗AIV和兔抗AIV抗体,经用琼脂扩散法测得效价分别为1:32和1:16。以纯化的鸡抗AIVIgG为包被抗体,兔抗AIVIgG为第二抗体,建立了检测AIV抗原的夹心ELISA法。结果表明,鸡抗AIVIgG的最佳包被浓度为1μg/mL,兔抗AIV IgG的最适工作浓度为5μg/mL;对已知的阳性样品,用夹心ELISA法测得的病毒滴度比血球凝集滴度高16倍以上,且能检出其它亚型的禽流感病毒;与新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、减蛋综合征病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊病病毒、鸡痘病毒、马立克氏病病毒等无交叉反应,说明本方法有很高的特异性及敏感性。对14个鸡场送检的、患有呼吸道疾病或有腹膜炎、眼炎、产蛋下降、怀疑为禽流感感染的病鸡进行了检测,结果有7个鸡场为阳性。本方法的建立为禽流感病鸡群的临床检验提供了一种方便、敏感、快速的检测方法。  相似文献
3.
猪细小病毒PCR检测方法的建立与应用   总被引:21,自引:0,他引:21  
根据已报道的猪细小病毒基因组序列,设计并合成了1对寡核苷酸引物,通过对影响PCR扩增因素的筛选,成功地从猪细小病毒感染的组织和细胞中扩增出445bp片段,回收该片段用EcoR I酶切得到了预期的结果,证实了该扩增片段的特异性。敏感性试验表明,该方法可以检测出10^-4个TCID50的病毒含量。利用该方法对临床上24份流产病科的检测,查出阳性16份,而同时利用HA检测阳性只有10份。这些结果说明本试验建立的PCR诊断方法灵敏度高、特异性强。  相似文献
4.
氯霉素残留的危害及其检测方法   总被引:20,自引:0,他引:20  
氯霉素属广谱抗生素 ,曾在畜牧业中广为应用。但氯霉素有较强的副作用和毒性作用 ,如果氯霉素在食用动物中残留 ,可通过食物链传给人类 ,长期微量摄入氯霉素 ,不仅使人体肠道正常菌群失调 ,而且还会引起多种疾病 ,对人类的健康造成危害。世界上许多国家禁止此药用于生产食品动物 ,并规定了在畜产品中氯霉素不得检出。对于氯霉素的残留 ,存在多种检测方法 ,不同的检测方法具有不同的检出限。检测限问题已成为关注的焦点 ,发达国家对检出限的要求越来越严格  相似文献
5.
动物红细胞免疫功能的研究进展   总被引:18,自引:0,他引:18  
6.
猪圆环病毒2型套式PCR检测方法的建立及应用   总被引:17,自引:4,他引:13  
根据GenBank登录的猪圆环病毒2型(PCV2)的全基因组序列,设计了2对引物.建立了检测PCV2的套式PCR方法。对该方法用序列分析、酶切等方法进行了鉴定。同时用该套式PCR方法对华南地区287个猪场的1560份样品进行了检测,结果,983份为PCV2阳性,阳性率为63%。  相似文献
7.
8.
根据猪链球菌2型的mrp基因自设计和合成了一对可扩增长度为885bp目的片段的引物,成功地建立了检测溶菌酶释放蛋白(MPR)的PCR方法,用XbaⅠ内切酶进行酶切,获得了与预期一致的578bp和307bp2的2个片段,并进行了PCR的特异性试验和敏感性试验。对马链球菌兽疫亚种、猪丹毒杆菌、猪肺疫巴氏杆菌和猪肺炎支原体的PCR检测结果均呈阴性;检测的敏感度可达100个细菌。另外,对9株从病猪体内分离的猪链球菌2型菌株进行检测了8个呈阳性;对15份正常屠宰猪扁桃体分离物的检测结果是1份为阳性。结果表明此法特异性敏感性均很高,可作为MRP快速诊和流行病学调查的手段。  相似文献
9.
动物产品中牛、羊源性成分多重PCR检测方法的建立   总被引:15,自引:2,他引:13  
以肉骨粉、鱼粉、猪肉干和鱼肉干为研究对象,异硫氰酸胍法提取总DNA,18S rDNA片段的扩增结果表明提取到的DNA中不存在抑制PCR的物质。应用梯度PCR技术对牛、羊源性成分检测的退火温度进行了优化,在单一PCR检测技术的基础上分别进行了18S rDNA片段和牛、羊源性成分的多重PCR分析,得到了预期的结果。试验表明,本建立的多重PCR方法具有快速、简便、准确等特点,对动物产品牛、羊源性成分检测具有重要意义。  相似文献
10.
畜产品中沙门氏菌的危害及检测方法概述   总被引:15,自引:0,他引:15  
在经济全球化条件下,一国畜产品的质量安全问题不仅关系到本国人民的生活与生命安全,而且还关系到整个人类的生活与生命安全。人和动物的沙门氏菌病一直是一个世界性问题,在各种畜产品中,细菌性食物中毒最为常见,而由沙门氏菌引起的食物中毒病例在食物中毒中居于前列。沙门氏菌菌型繁多,分布广泛,是一种重要的人畜共患病的病原体。  相似文献
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