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1.
2004年初以来,杭州地区的几个规模化猪场陆续发生仔猪腹泻、保育猪呼吸困难的疾病,剖检见肺部呈橡皮样,全身淋巴结水肿,部分猪脾脏边缘梗死等,发病率、死亡率较高。设计针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)的特异性引物,进行RT—PCR或PCR检测;运用伪狂犬病(PR)鉴别试剂盒检测PR,运用免疫荧光法检测猪瘟(HC),并进行了细菌分离培养,通过全面检查认为,这几个猪场发生了猪瘟合并猪PRRSV、PCV2感染。  相似文献
2.
分别用digoxigenin标记的鸡传染性贫血病毒(CAV)和禽网状内皮增生症病毒(REV)核酸探针以及PCR技术对某种鸡场进行检测,检测结果表明,在20个样品中,CAV和REV感染的阳性率分别为10%和5%,这一结果显示,CAV和REV感染是导致该鸡场发生免疫抑制的主要病因之一。  相似文献
3.
新城疫病毒F48E9株及东北地区流行株F基因遗传变异分析   总被引:16,自引:4,他引:12  
采用异硫氰酸胍/酚/氯仿抽提一步法,提取新城疫病毒(NDV)F48E9株及2个东北地区分离株DB3、DB5基因组RNA,并以其为模板经反转录合成F基因cDNA第1链,再利用PCR技术分段增出F基因的cDNA。F48E9、DB3和DB5株F基因的cDNA经酶切修饰后,插入pUC19的多克隆位点中,转化感受态E。cdi DH5a,经相对分子质量比较、酶切分析及PCR等鉴定方法筛选出F48E9、DB3和  相似文献
4.
鸡传染性支气管炎病毒核蛋白基因重组真核表达载体的构建   总被引:10,自引:0,他引:10  
将已经序列测定的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)HB株的核蛋白基因亚克隆到表达载体pcDNA3的KpnⅠ酶切位点,快速筛选鉴定出含有HB核蛋白基因的重组质粒,经酶切、PCR及Southern鉴定为正向插入了HB核蛋白基因,将其命名为pcDNA-N。对重组质粒进行大量扩增,应用聚乙二醇纯化后,对SPF雏鸡进行了免疫攻毒试验,结果表明,IBV核蛋白在抗感染和抗致死方面具有一定的作用。  相似文献
5.
根据GenBank中的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(He-PRRSV)基因组序列设计1对特异性引物,建立一种基于SYBR Green I实时PCR检测HP-PRRSV的方法.结果表明,该方法能够检测到HP-RRSV的存在,不与其它猪源病毒发生非特异性反应,标准曲线线性范围为1011拷贝/反应~102拷贝/反应.与常规PCR方法相比,两者的符合率100%.该方法具有快速、简便、敏感等优点,具有重要的实用价值.  相似文献
6.
探讨了以减毒鼠伤寒沙门氏茵为栽体传递新城疫病毒DNA疫苗的安全性、免疫原性和可行性。将含新城疫病毒(NDV)F48E9株融合蛋白(F)基因的真核表达质粒pcDNA3-F的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌ZJ111株(ZJ111/pcD-NA3一F菌株),以10^8CFU进行首免,2周后二免,三免后4周攻击强毒株F48E9,观察其安全性和免疫原性,同时设只含空载体pcDNA3的ZJ111/pcDNA3菌株对照及口服PBS对照。结果表明:重组ZJ111/pcDNA3-F菌株具有良好的安全性。对强毒株攻击的保护率达64.7%。重组ZJ111/pcDNA3-F菌株不仅能诱导雏鸡产生NDVELISA抗体,而且诱导产生的法氏囊B淋巴细胞和胸腺T淋巴细胞增殖反应显著高于ZJ111/pcDNA3时照组。这些结果提示,减毒沙门氏菌为载体不仅可直接将NDVF基因呈递给鸡体细胞进行表达,产生抗NDV的体液免疫,而且还可诱导细胞免疫应答。  相似文献
7.
浙江部分地区屠宰场待宰猪链球菌的检测及药敏试验   总被引:8,自引:4,他引:4  
对浙江部分地区屠宰场中猪链球菌的分布和耐药情况进行调查.结果表明,猪链球菌的携带率为13.1%(38/290),其中2型猪链球菌为0.69%(2/290);不同地区之间待宰猪的猪链球菌携带率存在明显的差异,义乌地区的猪链球菌携带率为21.0%(22/139),而江山为0;各地区不同分离株的耐药性无明显差异,均对β-内酰胺类药物敏感,50%以上分离株对四环素、强力霉素、红霉素、麦迪霉素等几种药物表现为多重耐药.  相似文献
8.
将生长抑素(SS)和乙肝表面抗原基因(HBsAg)融合后,插入真核表达载体pcDNA3,构建成pcDNA3-SS,再转化减毒沙门氏菌(S.typhimurium,dam^-和phop^-),构建了以减毒沙门氏菌为载体的生长抑素口服DNA疫苗ZJ111/pcDNA3-SS,并通过体外传代、灌服草鱼检验了ZJ111/pcDNA3-SS的侵袭力及体外和侵入草鱼体内过程中的德定性。对草鱼肝脏和脾脏分离菌的生化特性检验和特异性PCR鉴定表明,ZJ111/pcDNA3-SS能很好地侵入草鱼体内;对在Amp^ 、Amp^-平板上传5、10代和灌服7d后草鱼肝、脾脏分离的减毒菌抽提重组质粒进行PCR和酶切鉴定表明.减毒菌中的重组质粒在体外和侵入草鱼体内过程中具有较好的稳定性。  相似文献
9.
鸡γ-干扰素基因的分子克隆与序列测定   总被引:7,自引:0,他引:7  
应用逆转录 -聚合酶链式反应 ( RT-PCR)技术 ,从 Con A诱导培养 2 4 h的鸡脾淋巴细胞中扩增得到了大小约 50 0 bp的基因 ,将其平端连接到 p UC1 9质粒上 ,进行质粒 PCR和 Eco RI、Hind 双酶切鉴定后 ,筛选阳性重组克隆。序列分析表明 ,该基因阅读开放框架由 4 92个核苷酸组成 ,与马和人γ-干扰素基因序列的同源性分别为 3 5%和 3 2 %,与鸡 型干扰素基因的同源性仅为 1 5%,与国外报道的鸡 γ-干扰素基因序列完全一致。表明鸡脾淋巴细胞受到有丝分裂原刺激后 ,其 γ-干扰素基因 m RNA发生了表达 ,试验成功地克隆得到了鸡 γ-干扰素基因  相似文献
10.
猪源链球菌的分离与鉴定   总被引:6,自引:0,他引:6  
从浙江地区98例发病样品猪猪体共分离到56(57%)株猪源链球菌,对12株典型分离株进行培养特性、生化特性及血清型的鉴定,多数具α或β溶血,其中C群链球菌8株。L群链球菌1株,2型猪链球菌2株。未定群1株。小鼠对12株分离株的敏感性有一定的差异。结果表明:浙江地区分离到的猪链球菌已不是单一的C群链球菌,且C群中也不是以往的马链球菌兽疫链球菌亚种。而是停乳链球菌似马亚种。并首次分离到猪链球菌2型。  相似文献
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