补体结合酶联免疫吸附试验方法的建立

为改进免疫学诊断技术的准确性,研究了一种基于补体结合的免疫学检测新技术———补体结合酶联免疫吸附试验（CF-ELISA）。CF-ELISA技术采用酶标记抗菊糖纯化豚鼠补体C3抗体及其酶显色系统作为补体参与反应的指示系统,用ELISA方法进行补体结合试验。经对布氏菌病抗体检测的初步试验结果显示,CF-ELISA技术可检测到0.01 IU的布氏菌病抗体,灵敏度与间接酶联免疫吸附试验（iELISA）相当,是虎红平板凝集试验（RBPT）试管凝集试验（SAT）的5 000倍、补体结合试验（CFT）的10 000倍。对349份确诊布氏菌病感染群牛、羊血清的检测结果显示,CF-ELISAi、ELISA、CFT、SAT、RBPT的阳性率分别为35.82%3、6.39%、31.81%、30.09%、36.1%,CF-ELISA与iELISA、CFT、SAT、RBPT的阳性符合率分别为：98.4%、88.8%、80.0%、90.6%。CF-ELISAi、ELISA、CFT、SAT、RBPT对490份布氏菌病阴性群牛、羊血清的阴性率分别为100%、99.6%、100%、99.4%、99.8%,CF-ELISA与iELISA、CFT、SAT、RBPT的阴性符合率分别为：99.6%1、00%、99.4%、99.8%。研究表明,CF-ELISA是具有高特异性和高敏感性的布氏菌病免疫学检测技术。     

布鲁氏菌病补体结合酶联免疫吸附试验抗体检测试剂盒敏感性和特异性评价

为评价布鲁氏菌病补体结合酶联免疫吸附试验抗体检测试剂盒（ CF-ELISA试剂盒）的敏感性、特异性及与其他试剂盒的符合率,用CF-ELISA试剂盒对布病感染地区牛、羊血清各200份,布病净化地区牛、羊群血清各100份进行抗体检测,同时与其他商品化检测试剂进行了比较。结果表明,感染地区牛、羊血清抗体的McNemar检验结果表明CF-ELISA试剂盒与间接酶联免疫吸附试验（ iELISA）试剂盒和CGS的敏感性和特异性差异均不显著（ P＞0．05）,Kappa一致性检验分析结果表明,CF-ELISA试剂盒与iELISA试剂盒检测结果有高度的符合性。检测净化地区牛、羊群血清抗体产品间的特异性和符合率均为100％。