微拟球藻抗生素抗性分析和选择标记筛选

为了筛选到微拟球藻Nannochloropsis oculata的筛选标记,研究了微拟球藻对新霉素(Neomycin)、链霉素(Streptomycin)、潮霉素(Hygromycin)、壮观霉素(Spectinomycin)和博来霉素(Zeocin)的敏感性。每种抗生素都设置液体培养和固体培养实验并且浓度梯度相同。新霉素和链霉素的浓度梯度为:0、100、200、400、600、800μg/ml。潮霉素的浓度梯度为0、25、50、100、125、150μg/ml。壮观霉素浓度梯度为0、40、80、100、150、200μg/ml。博来霉素浓度梯度则为0、0.1、0.2、0.4、0.5、1μg/ml。结果表明,微拟球藻对新霉素、链霉素、潮霉素和壮观霉素不敏感,而对博来霉素高度敏感。在固体培养时,0.5μg/ml博来霉素即可完全抑制微拟球藻生长;在液体培养时,1μg/ml博来霉素即可完全抑制其生长。博来霉素可作为微拟球藻遗传转化的选择抗生素。ble基因为其阳性筛选的选择标记基因。