Expression of a recombinant crustacean hyperglycemic hormone of the kuruma prawn Penaeus japonicus in methylotrophic yeast Pichia pastoris

ABSTRACT:   Until now, six crustacean hyperglycemic hormones (CHH) designated Pej-SGP-I, -II, -III, -V, -VI and -VII have been characterized in the kuruma prawn Penaeus japonicus . All CHH consist of 72 amino acid residues and have an amidated carboxyl (C)-terminus. In the present study, we expressed Pej-SGP-III in methylotrophic yeast Pichia pastoris in order to obtain a large quantity of recombinant CHH possessing biological activity. A cDNA encoding Pej-SGP-III that had been previously cloned was processed by polymerase chain reaction (PCR) and the resulting product was ligated into an expression vector. Pichia pastoris was transformed with this vector after which a recombinant Pej-SGP-III was expressed having an additional amino acid residue (glycine) at the C-terminus (rPej-SGP-III-Gly), a form considered to be a putative precursor of this hormone. rPej-SGP-III-Gly secreted into the culture medium was purified by reversed-phase HPLC, and amidated using a peptidylglycine alpha-amidating enzyme. The amidated rPej-SGP-III (rPej-SGP-III) showed hyperglycemic activity in in vivo bioassay almost comparable to that of the natural Pej-SGP-III. rPej-SGP-III thus obtained will be a useful tool not only for its physiological study but also for the determination of its 3-D structure.     

糯米糍荔枝果实内源激素与落果的关系

以糯米糍荔枝生理落果期的田间调查和胚胎发育研究为基础,探讨了内源激素与生理落果的关系.结果表明,糯米糍生理落果高峰的主要原因是:第1次因授粉受精不良导致的生长促进类激素尤其是CTK水平过低;第2次与胚乳为胚的发育所利用而消失、IAA和GAs急剧降低有关;第3次与胚的败育造成CTK、GAs和IAA的全面下降有关;第4次发生在假种皮(果肉)迅速生长期,与种皮和假种皮ABA升至高水平有关.此外,还探讨了ABA /(IAA+GAs+CTK)与生理落果的相关性,以及胚囊、珠被和假种皮等果实内部组分内源激素的变化特点.     

团花混交林试验初报

对西双版纳景洪市景哈试验点团花与马占相思混交林4年生的统计分析证实,团花纯林树高年均生长量为2.73 m,是混交林树高的1.26倍,纯林胸径年生长量为3.24 cm,是混交林胸径的1.44倍.混交林伴生树种马占相思对团花树高和胸径的生长影响很大.     

不同熟期荔枝品种的枝梢生长节奏的初步研究

本试验以3-4年生的早熟（‘三月红’）、中熟（‘妃子笑’）、晚熟（‘糯米糍’）及特迟熟（‘马贵荔’）荔枝品种为试材,比较不同成熟期荔枝品种周年的枝梢生长节奏及新叶发育过程中叶绿素指（SPAD）数动态。结果表明：各品种枝梢伸长生长具有一定差异,但都具有一定的节奏性,而枝梢增粗生长周年持续进行,无明显节奏特征;叶绿素指数达到最高值的80%时增加缓慢,因此叶绿素指数达最高值的80%时作为枝梢成熟的标准,用来确定枝梢成熟的时间。     

东北羊草草地土壤-植物间锌的动态研究

对东北羊草草地土壤-植物间锌含量的动态研究结果表明:土壤中全锌含量较低,有效锌含量中等,植物体不缺锌。在生长季各时期,全锌和有效锌含量在土壤剖面分布从上向下呈下降趋势,有效锌含量与有机质含量呈显著正相关而与pH值呈显著负相关。由于淋溶作用土壤深层含量增加。全锌各月平均含量变化在生长季呈“V”型曲线,7月含量最低;有效锌平均含量从5–8月与全锌相似,8月后则逐渐减少。羊草各器官及枯落物全锌和有效锌含量有很大变化,总的趋势是:根>根茎>叶>茎>枯落物;有效锌含量A层与B层的比值比全锌含量A层与B层的比值高2倍多,这说明A层土壤富集有效锌的能力强。羊草根部富集的锌含量平均为土壤有效锌含量的44.17倍。根部的吸收强度与土壤中锌的活性成显著负相关(r=-0.8800,p<0.01)。图5表1参23。     

投喂率对凡纳对虾中间培育生长、生理和水环境的影响

中间培育是凡纳对虾(Penaeus vannamei)养殖的重要阶段,投喂率是影响此阶段养殖成效的重要参数。本研究开展为期30 d的养殖实验,研究3组投喂率(投喂率分别为体重的5%、7.5%、10%,分别命名为T5、T7.5和T10)对凡纳对虾中间培育养殖水质、微生物群落结构、非特异性免疫指标及生长性能的影响。实验期间,水体pH、盐度、温度及溶解氧均保持在适宜对虾生长的范围内。结果显示,随着实验进行,总氨氮(TAN)、亚硝态氮(NO2–-N)和化学需氧量(COD)浓度出现上升趋势,实验结束时,其浓度随投喂率升高呈现显著差异：T10>T7.5>T5。微生物群落结构分析表明,养殖水体的微生物群落丰富度和多样性随投喂率升高呈下降趋势,不同投喂率的优势门类均为变形菌门(Proteobacteria, 50.36%~67.53%)和拟杆菌门(Bacteroidetes, 12.09%~67.53%);在属水平上,对凡纳对虾有害的弧菌(Vibrio)相对丰度在T10组最高(37.33%)、T5组最低(0.13%);对其有益的假交替单胞菌(Pseudoalteromonas)相对丰度在T10组最低(0.28%)、T7.5组最高(9.78%)。凡纳对虾肝胰腺的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活性在T10组最低、T7.5组最高(P<0.05)。T7.5和T10组对虾的体长和体重均显著大于T5组(P<0.05),但T7.5和T10组之间无显著差异(P>0.05),投喂率与存活率呈负相关,且3组间存在显著差异(P<0.05)。利用因子分析对非特异性免疫指标和生长指标进行综合评价,结果表明,T7.5组得分最高,为0.92,凡纳对虾中间培育的投喂率在7.5%左右为宜。     

不结球白菜维生素C和可溶性糖含量的遗传分析

采用主基因—多基因混合遗传模型分析方法,对不结球白菜乌塌菜×矮脚黄、雪克青×矮脚黄两个组合的维生素Ｃ、可溶性糖含量进行单世代和联合世代遗传分析。结果表明,两组合中维生素Ｃ含量遗传符合一个主基因和多基因的混合遗传模型,主基因遗传率为５２６８％～７４１２％。可溶性糖在雪克青×矮脚黄组合中也符合主基因—多基因遗传模型,主基因遗传率为８９７３％～８９７９％。维生素Ｃ和可溶性糖主基因效应均以加性效应为主,在乌塌菜×矮脚黄组合中,两性状主基因有较明显的负向显性效应,在雪克青×矮脚黄组合中,显性效应不明显。育种实践中应注重对主基因加性效应的利用。     

腐殖酸水溶肥配施枯草芽孢杆菌对基质青菜生长的影响

为探究腐殖酸水溶肥、枯草芽孢杆菌对基质青菜生长的影响 本研究以抗热605青菜为试验材料,共设计6组施肥试验,分别为CK1(有机肥2.5g/盆)、CK2(有机肥2.5g/盆+枯草芽孢杆菌0.5g/盆)、T1(有机肥2.5g/盆+枯草芽孢杆菌0.5g/盆+腐殖酸水溶肥100倍液)、T2(有机肥2.5g/盆+枯草芽孢杆菌0.5g/盆+腐殖酸水溶肥200倍液)、T3(有机肥2.5g/盆+枯草芽孢杆菌0.5g/盆+腐殖酸水溶肥400倍液)、T4(有机肥2.5g/盆+枯草芽孢杆菌0.5g/盆+腐殖酸水溶肥800倍液),研究结过表明:腐殖酸水溶肥配施枯草芽孢杆菌可在一定程度上增加基质青菜的株高、叶宽、叶长、冠幅及地上鲜重,其中腐殖酸水溶肥起主导作用,枯草芽孢杆菌作用较为微弱,综合各生长指标考量以T2处理效果最佳。     

4种外源激素处理对羊草种子萌发和幼苗生长的影响

研究了100~600μg/g赤霉素(GA3)和吲哚乙酸(IAA)、25~100μg/g 6-苄氨基嘌呤(6-BA)和脱落酸(ABA)对羊草种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,100~300μg/g GA3和IAA以及25μg/g 6-BA对羊草种子的萌发最终表现为促进作用,总体效果为GA3>IAA>6-BA。当GA3和IAA浓度大于400μg/g或6-BA浓度大于50μg/g时对羊草种子的最终发芽率均表现为不同程度的抑制;25~100μg/g的外源激素ABA对羊草种子萌发没有抑制作用。GA3处理均能显著促进羊草幼苗的伸长,IAA和6-BA则表现为不同程度的抑制作用;GA3、IAA和6-BA 3种促进激素对羊草的根长和根冠比均表现为抑制作用;25~100μg/g ABA对羊草苗长、根长以及根冠比没有显著影响。