二氟沙星对实验性感染猪支原体性肺炎及链球菌病的药效学研究

以试管两倍稀释法测得二氟沙星对猪肺炎支原体（ Ｆ１６ 株）和兰氏 Ｃ 群类马链球菌（ Ｃ５５ １ ２０ ）的最小抑菌浓度分别是０１６ｍ ｇ／ Ｌ及 １６ｍ ｇ／ Ｌ。肌注给药对猪支原体性肺炎及链球菌病的实验性治疗结果表明,低、中、高剂量二氟沙星组（２５、５、１０ｍ ｇ／ｋｇ）及蒽诺沙星组（２５ｍ ｇ／ｋｇ）用药 ５ 天（每隔 １２ 小时给药一次）对猪支原体性肺炎的治愈率分别是 ８０％ 、９０％ 、１００％ 及９０％ ;而支原体感染对照组的自愈率为１０％ 。低、中、高剂量二氟沙星组及蒽诺沙星组（２５ｍ ｇ／ｋｇ）用药 ４ 天（每隔 １２ 小时给药一次）对猪链球菌病的治愈率分别是 ５０％ 、８０％ 、８０％ 及 ８０％ ,而链球菌感染对照组的死亡率为 ５０％ 。     

二氟沙星肺靶向微球制剂的制备

以可生物降解的明胶为载体,液体石蜡为油相,Span-80为乳化剂,选择正交设计优化空白明胶微球生产工艺,并考察其理化性质,采用乳化交联法制备二氟沙星肺靶向明胶微球。采用紫外可见分光光度计法,测定微球中二氟沙星的含量。结果表明,优选所制的二氟沙星肺靶向明胶微球形态圆整,表面光滑,平均粒径为8.33μm,粒径分布在5.0～25.0μm的微球达到95.71%,二氟沙星明胶微球包封率为62.43%,载药量为13.71%。采用动态分析法研究体外释药特性,二氟沙星明胶微球在12h处药物释放量达到65%,24h内药物释放量达到71%。制备工艺稳定可行,所得二氟沙星明胶微球具有良好的缓释效果。     

二氟沙星对3种海洋弧菌的抗菌后效应研究

采用试管二倍稀释法测定二氟沙星对鳗弧菌W-1、副溶血弧菌1614和溶藻弧菌1833的最小抑菌浓度(MIC);采用菌落计数法测定二氟沙星对鳗弧菌、副溶血弧菌和溶藻弧菌的抗菌后效应(PAE)。结果显示,二氟沙星在1×MIC、2×MIC和4×MIC浓度时,对鳗弧菌W-1、副溶血弧菌1614和溶藻弧菌1833的PAE分别为:0·64、1·09和2·16h;0·74、1·73和2·64;0·54、1·08和2·05h。二氟沙星对这3种弧菌具有明显的抗菌后效应,并且随着二氟沙星浓度的增加,抗菌后效应的时间也明显延长。     

二氟沙星残留检测用单克隆抗体的制备及其鉴定

用DFX-BSA免疫BALB/c小鼠,采用显微克隆技术成功筛选出5株特异性分泌细胞株1a6、2b4、4a4、X1和X2。将X1株细胞株直接注入小鼠腹腔获取腹水,腹水纯化后效价达1:1638400。蛋白质含量为6.86mg/ml,单抗X1属IgG2a亚型。X1株单克隆抗体的检测标准曲线方程为Y=0.4813-3.1067X(R=0.9510),最低检测限(LOD)为2ng/ml,线性范围为0.002-5μg/ml,DFX对其IC50为0.085μg/ml。单抗对氟喹诺酮类药物有一定的交叉反应,对沙拉沙星最高可达10.9%,对兽医临床常用抗菌药物氨苄西林、卡那霉素、盐酸四环素、磺胺甲噁唑和氯霉素等没有交叉反应。Ci-ELISA反应中McAb对低浓度的乙腈和丙酮具有良好的耐受性,而低浓度的甲醇对McAb的结合力有一定的影响。     

双氟沙星对小鼠的显性致死试验

本试验研究了双氟沙星对昆明系小鼠的显性致死性。剂量分别为５００ｍｇ／ｋｇｂ．ｗ．、５０ｍｇ／ｋｇ ｂ．ｗ．和５ｍｇ／ｋｇｂ．ｗ．，雄鼠连续给药５ｄ后，与雌鼠按１：２的比例同笼交配，连续交配７批，对检测双氟沙星对遗传物质的损伤。试验各剂量组指标与阴性对照组无显著性差异，表明双氟沙星对昆明系小鼠的显性致死性为阴性。     

二氟沙星在猪体内的药物动力学及生物利用度研究

 7头健康杂种猪 ,按照随机拉丁方设计 ,进行静注、肌注及内服二氟沙星 (5mg·kg-1)的药物动力学研究。血浆样品经甲醇沉淀血浆蛋白 ,高速离心 ,用反相高效液相色谱法测定猪血浆中二氟沙星的浓度 ,MCPKP计算机程序处理血浆药物浓度 时间数据。健康猪静注给药的药时数据适合二室开放模型 ,主要药物动力学参数为 :t1/ 2α1.5 8± 0 .6 4h ;t1/ 2 β17.14± 4.14h ;V11.34± 0 .16L·kg-1;Vd(area) 4.91± 1.88L·kg-1;ClB0 .2 0± 0 .0 6L·kg-1·h-1;AUC2 7.2 4± 8.12mg·L-1·h。健康猪肌注、内服给药的药时数据均适合一级吸收二室模型 ,主要药物动力学参数为 :t1/ 2ka0 .47± 0 .2 2和 0 .5 4± 0 .44h ;t1/ 2 β2 5 .79± 8.10和 16 .6 7± 4.0 4h ;tmax1.2 9± 0 .2 6h和 1.41± 0 .88h ;Cmax1.77±0 .6 6和 2 .2 9± 0 .85mg·L-1;AUC 2 4.98± 9.2 9和 2 6 .5 9± 5 .30mg·L-1·h-1;F (95 .3± 2 8.9) %和 (10 5 .7± 37.1) %。二氟沙星在健康猪体内的主要药物动力学特征为 :吸收迅速 ,达峰时间短 ,表观分布容积大 ,消除半衰期长 ;肌注、内服给药吸收完全 ;生物利用度高。     

二氟沙星抗体的制备

[目的]制备二氟沙星(DIF)抗体。[方法]采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯(NHS)法,将二氟沙星分别与牛血清白蛋白(BSA)、卵清白蛋白(OVA)偶联,制备免疫抗原DIF-BSA和检测抗原DIF-OVA,并用DIF-BSA免疫小鼠以获得高效价的抗体。[结果]免疫抗原DIF-BSA的紫外光谱具有药物和蛋白的叠加特性,其最大吸收峰在波长277 nm处,说明载体蛋白BSA与DIF成功偶联,可用于动物免疫。检测抗原DIF-OVA的最大吸收峰在波长276 nm处,说明载体蛋白OVA与DIF成功偶联,可用作检测抗原进行包被。间接ELISA检测结果表明所得小鼠抗血清效价较高,均达1∶32 000以上,说明有特异性抗体产生。[结论]成功制备了抗二氟沙星抗体,也进一步证明了药物偶联成功。     

Pharmacokinetics after intravenous, intramuscular and subcutaneous administration of difloxacin in sheep

The disposition kinetics of difloxacin, a fluoroquinolone antibiotic, after intravenous (IV), intramuscular (IM) and subcutaneous (SC) administration were determined in sheep at a single dose of 5mg/kg. The concentration-time data were analysed by compartmental (after IV dose) and non-compartmental pharmacokinetics method (after IV, IM and SC administration). Plasma concentrations of difloxacin were determined by high performance liquid chromatography with fluorescence detection. Steady-state volume of distribution (V(ss)) and clearance (Cl) of difloxacin after IV administration were 1.68+/-0.21L/kg and 0.21+/-0.03L/hkg, respectively. Following IM and SC administration difloxacin achieved maximum plasma concentration of 1.89+/-0.55 and 1.39+/-0.14mg/L at 2.42+/-1.28 and 5.33+/-1.03h, respectively. The absolute bioavailabilities after IM and SC routes were 99.92+/-26.50 and 82.35+/-25.65%, respectively. Based on these kinetic parameters, difloxacin is likely to be effective in sheep.     

盐酸双氟沙星对大鼠致畸胎试验

本试验研究了盐酸双氟沙星对ＳＤ大鼠的致畸性。剂量分别为３００ｍｇ／ｋｇ,ｂ．ｗ．;１５０ｍｇ／ｋｇ．ｂ．ｗ．和５０ｍｇ／ｋｇ ｂ．ｗ．,于大鼠受孕７至１５ｄ经口给药,３００ｍｇ／ｋｇ ｂ．ｗ．和１５０ｍｇ／ｋｇ．ｂ．ｗ．剂量的盐酸双氟沙星显著影响胚胎的生长发育,引起胎鼠死亡和骨骼畸形,其严重程度具有剂量效应关系。     

盐酸二氟沙星注射液稳定性研究

本文以紫外—可见分光光度仪测定盐酸二氟沙星注射液中二氟沙星的含量 ,采用经典恒温加速实验和强光照射实验研究该制剂的热稳定性和光稳定性。结果表明 ,该制剂盐酸二氟沙星的热降解反应为一级动力学过程。在40℃ ,5 0℃ ,6 0℃和 70℃时的降解速度常数分别为 :3 92 4× 10 -4 ,8 0 70× 10 -4 ,1 5 91× 10 -3 ,3 0 17× 10 -3 其热降解速度常数R2 98为 :1 2 13× 10 4 贮存有效期t0 9为 2 38年 ,半衰期为 15 6 6年 ,该制剂光稳定性尚属良好。