鸡巨型艾美耳球虫卵囊呼吸作用的研究

采用纯种巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)卵囊,人工感染3周龄的石歧杂雏鸡,及时收集卵囊,以0.1N硫酸溶液悬浮,用微量呼吸检压仪检测卵囊呼吸作用。试验表明:孢子化过程中最初十小时内该球虫卵囊的耗氧量为3.59μl/小时/10~6个卵囊。耗氧量的变化与其细胞分裂过程相对应,耗氧量在三次核分裂前夕降低,但在分裂期升高。最高耗氧量出现于子孢子形成期,达18.91μl/小时/10~6卵囊。孢子化后卵囊的呼吸作用较缓慢,耗氧量为0.85μl/小时/10~6个卵囊。完成孢子化所需时间为26小时。     

斯氏艾美耳球虫ITS1-5.8S rRNA-ITS2序列的克隆及PCR检测方法的建立

通过对多种鸡球虫和松鼠球虫18SrRNA和28SrRNA进行序列比对分析,在18SrRNA 3′端和28SrRNA 5′端保守区设计艾美耳属通用引物,以斯氏艾美耳球虫洛阳分离株LY卵囊基因组DNA为模板首次成功克隆到斯氏艾美耳球虫完整的ITS1-5.8SrRNA-ITS2序列,其大小为1 178bp,其中ITS1序列长度为423bp,5.8SrRNA为155bp,ITS2为600bp,斯氏艾美耳球虫LY株ITS1/2序列高度变异,与鸡球虫、啮齿动物球虫的序列相似性低于60%。然后在斯氏艾美耳球虫ITS1/2序列超变区设计种特异引物,建立了灵敏、特异的PCR检测方法。本研究结果将为兔球虫强致病种的临床诊断和揭示兔球虫种群遗传特征提供有效的分子工具。     

柔嫩艾美尔球虫野外株对3种聚醚类离子载体抗生素的敏感性试验

采用鸡体药效试验法测定了柔嫩艾美尔球虫对３种聚醚类离子载体抗生素的敏感性。试验证明，柔嫩艾美尔球虫野外分离株对盐霉素（６６×１０－６）、莫能菌素（１２０×１０－６）和拉沙菌素（１２５×１０－６）产生了耐药性。上述３种药物的抗球虫指数（ＡＣＩ）分别为１４９．３９、１３４．０４和１５６．１１。但这３种药物对柔嫩艾美尔球虫标准株仍然有效     

鸡柔嫩艾美耳球虫3-1E和CDPK双抗原DNA疫苗的免疫保护效果观察

将构建的含鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)CDPK和3-1E双抗原的真核重组质粒proEC,在14日龄和21日龄分别免疫AA肉鸡,28日龄感染5×104个E.tenella孢子化卵囊,观察其免疫保护效果.结果显示,攻虫后1周,与proC组相比,proEC组能显著增强淋巴细胞转化和血清抗体水平(P＜0.05);与proE组和proC组相比,proEC组卵囊产量最低但差异不显著(P＞0.05),其相对增重低于proE组和proC组.结果表明,proEC双抗原DNA疫苗对E.tenella攻虫表现出一定双抗原协同保护效应.     

Eimeria tenella搭载科学卫星对虫体生物学特性影响的初探

为探讨微重力与太空辐射等因素对鸡球虫生物学特性的影响，我们首次将一株已孢化的柔嫩艾美耳球虫搭载于返回式科学试验卫星。卫星运行７天后返回地面。     

柔嫩艾美球虫（Eimeria tenella）体外细胞培养

试验比较了玻璃珠层析法,ＤＥＡＥ纤维素层析法,Ｇ３漏斗过滤法３种提纯柔嫩艾美球虫（Ｅｉｍｅｒｉａｔｅｎｅｌｌａ）子孢子的方法,柱高８ｃｍ,直径２００μｍ的玻璃株柱用ｐＨ８．０的Ｒｉｎｇｅｒ’ｓ缓冲液作洗脱提纯子孢子,回收率为６４．１％,子孢子洗脱高峰期集中,且易于无菌操作,柱高５ｃｍ的ＤＥＡＥ纤维素柱用ｐＨ８．０的甘氨酸缓冲液作洗脱液,提纯子孢子回收率为６３．２％,但严格无菌操作困难,Ｇ３漏斗法易     

秦皇岛地区鸡球虫抗药性研究

应用艾维茵肉仔鸡，以最适抗球虫活性百分率（POAA）、病变记分减少率（RLS）和相对卵囊产量（ROP）为判定指标，检测了采自河北省秦皇岛地区的6种艾美耳球虫对8种常用抗球虫药物的敏感性。结果表明：6种混合艾美耳球虫对马杜霉素和盐霉素具有轻度抗药性；对拉沙洛菌素和氨丙淋具有中度抗药性；对球痢灵、克球多和常山酮具有重度抗药性；对地克珠利无抗药性。     

NO在雏鸡球虫感染过程中的作用

研究以腹腔注射途径给予试验雏鸡cNOS抑制剂L－NAME、L－NA以及iNOS抑制剂L－AG，通过测定血浆NO2^-水平、肠道粘膜NOS活性、雏鸡日增重以及肠道病变计分、肠道组织切片中球虫数量、O.P.G值、异常粪便百分率等指标，研究了NO在雏鸡感染E.tenella或E.acervulina过程中的作用。试验结果表明，在雏鸡感染E.tenella或E.acervulina后，每日连续给予L－AG或L－NAME，不但加重了雏鸡的肠道组织显微病变，而且使肠道组织切片中的球虫数量增多。此外L－AG或L－NAME处理还使感染雏鸡的O.P.G值和肠道病变记分等指标出现不同程度的升高，但与感染对照组的相比未见显著性影响。另外，无论是NO2^-测定结果，还是NOS活性测定结果均表明，3种NOS抑制剂对感染E.acervulina雏鸡体内NO的生成均有较好的抑制作用，其中以L－AG的抑制作用最为理想，L－AG处理组雏鸡血浆NO2^-水平或肠道粘膜NOS活性值均与给予的L－AG剂量之间呈现较好的剂量依赖性递减关系。结果提示，在雏鸡感染球虫过程中，体内大量生成的NO对球虫具有一定的毒性作用。NO可能是在雏鸡E.tenella和E.acervulina感染过程中发挥作用的一种效应分子。     

青蒿素与青蒿水提液对感染柔嫩艾美耳球虫肉鸡的疗效评价

为评价青蒿素和青蒿水提液抗球虫的效果,选择体重相近20日龄黄羽肉鸡120只,随机分为健康组,病理组,青蒿组和青蒿素组4组.测定血清中一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)含量.结果表明,病理组抗球虫指数为52.7,青蒿组为172.6,青蒿素组为145.4;青蒿和青蒿素能够降低血清中NO和NOS含量.说明青蒿水提液和青...