鲢肠道淀粉酶的分离纯化及部分性质研究

以鲢(Hypophthalmichthys molitrix)加工下脚料为原料,分离提纯其中的淀粉酶并对其部分性质进行了研究。结果表明经多级分离,得到了一种相对分子质量约2.15×104的淀粉酶,命名为SCIG1。SCIG1是鲢肠道淀粉酶的一种,酶活性的最适温度为30℃,最适pH5.5。     

Pathogenicity of halophilic Vibrio harveyi in giant freshwater prawns (Macrobrachium rosenbergii De Man)

In this study, the phenotypic and pathogenic properties in freshwater host were characterized in 14 strains of halophilic Vibrio harveyi isolated from infected marine black tiger shrimp, Penaeus monodon. The lysogenic phenotype was assayed via prophage excision and mitomycin C induction. The bacteria were grouped into two types, corresponding to lysogenic and non‐lysogenic strains. The pathogenicity was determined via direct injection of bacterial cultures into post‐larval juvenile giant freshwater prawns, Macrobrachium rosenbergii De Man. All of the infected prawns showed similar symptoms and inflamed hepatopancreas. The V. harveyi isolates derived from the first‐injected infected prawns were re‐isolated and re‐injected into healthy giant freshwater prawns, in which they retained similar infectivity. Both lysogenic and non‐lysogenic Vibrio spp. showed identical virulence associated with 100% mortality within one day post‐injection. TEM micrographs showed hepatopancreatic nuclear deformation and lipid breakdown caused by lysogenic γ‐hemolytic VL19 and non‐lysogenic β‐hemolytic V33. However, the V33 strain was associated with severely disrupted mitochondria. None of the V. harveyi strains was able to produce a biofilm. Together, our findings indicate that the lysogenic and non‐lysogenic halophilic V. harveyi isolated from marine shrimps may use different virulence factors that are responsible for their pathogenicity in freshwater prawns.     

悉生条件下3株嗜盐古菌对卤虫生长及其抗弧菌感染的影响

嗜盐古菌存在于高盐水体中,是高盐环境微生物种群的重要组成部分。本研究利用从日晒盐场结晶池卤水中分离得到的3株红色嗜盐古菌,分别命名为Haloarcula sp.HG-1、Haloferax sp.KN-4和Halorubrum sp.IT-5。采用悉生实验系统,探讨不同盐度(30、100和150)条件下3株古菌能否作为卤虫(Artemia)的唯一饵料,并比较其作为饵料对卤虫存活、生长和抗鳗弧菌(Vibrio anguillarum)感染能力的影响。结果表明,在盐度30的悉生系统中,投喂3株古菌组卤虫存活率和体长均保持较高水平;鳗弧菌攻毒条件下,卤虫存活率有所下降,其中投喂Haloferax sp.KN-4菌株组卤虫抗鳗弧菌感染能力最强。正常和攻毒条件下,在盐度100和盐度150悉生系统中分别投喂3株古菌,卤虫均保持较高存活率和体长,其中投喂Haloarcula sp.HG-1菌株组卤虫具有最高存活率和最长体长,但攻毒组卤虫存活率和生长普遍优于未攻毒组,这可能与高盐条件下V.anguillarum毒力下降有关。本研究利用"卤虫-古菌"悉生实验系统,证实了3株嗜盐古菌均可作为卤虫的唯一饵料,为卤虫提供营养;利用"卤虫-古菌-致病菌"攻毒实验系统,证实3株嗜盐古菌均可以增强卤虫抗鳗弧菌感染能力。本研究结果为研究古菌在高盐环境食物链中的作用提供了基础数据。     

谷物种子萌发时淀粉酶活性测定影响因素分析

采用碘.淀粉比色法,研究不同室温、不同水浴温度、不同萌发天数小麦种子萌发时淀粉酶活性的大小.结果表明:室温20℃左右,水浴40℃,萌发天数5 d时,淀粉酶的活性最强.在一定范围内,随着室温、水浴温度的升高,萌发天数的增长,糖化时间会缩短,淀粉酶的活性也会随之上升.     

甘薯微孔淀粉的制备技术及吸附性能的研究

用淀粉糖化酶、α-淀粉酶、普鲁兰酶水解甘薯淀粉制备一种具有吸附功能的微孔淀粉载体。研究表明,淀粉糖化酶对生甘薯淀粉作用力最强;淀粉糖化酶水解制备甘薯微孔淀粉的最佳工艺条件是：温度45℃,pH值4,酶用量为1％,时间24h,水解率为51．52%。微孔淀粉对色素、水溶性维生素、油脂的吸附能力远远高于原淀粉。通过交联反应能明显提高微孔淀粉的结构性能和吸附性能。     

松香基功能高分子金属离子配合物固定化淀粉酶(英文)

分别以聚马来松香己二醇酯、马来松香乙二醇丙烯酯聚合物和马来松香乙二醇丙烯酯-丙烯酸共聚物为载体,金属离子为桥键配位离子固定化淀粉酶。测定了固定化淀粉酶的性能,探讨了固定化酶反应机理。结果表明金属离子作为桥键配离子的固定化淀粉酶中,PMGAECa(Ⅱ)En和poly(MGAE-AA)Ca(Ⅱ)En效果较好,重复使用5次后,每5 min的活性分别为11.33、9.44 mg/g,相对保留活性为32.78%、37.59%,最适宜温度为60、50℃,最适宜pH值为6.03、5.00。     

短小芽孢杆菌HB-3的分离鉴定及其淀粉酶的纯化特性研究

从湖北省襄阳市三九酿酒厂下水道污泥分离筛选得到产淀粉酶菌株HB-3,根据菌株生长形态和生理生化特征分析,初步鉴定为短小芽孢杆菌。短小芽孢杆菌HB-3在淀粉培养基上培养72 h后,淀粉酶活力达到120.0 U/mL。然后使用DEAE-52和CM-52阴阳离子交换层析柱对短小芽孢杆菌HB-3产生的淀粉酶进行了部分纯化。结果表明,短小芽孢杆菌HB-3中淀粉酶经过部分纯化后,纯化倍数为5.9,酶活力回收率为90.9%。纯化后的淀粉酶使用SDS-PAGE凝胶电泳研究,以标准蛋白为对照,计算出短小芽孢杆菌HB-3中淀粉酶分子量为56.5 kDa。同时对短小芽孢杆菌HB-3的淀粉酶进行了纯化特性研究,结果表明,该酶的酶促反应最适温度为50℃,40～60℃热稳定性良好;该酶的酶促反应最适pH为5.0,pH 4.0～6.0酸碱稳定性良好,该酶对底物淀粉的反应动力学米氏常数K_m为0.062 mmol/L,最大反应速率V_max为3.019 mmol/(L·min)。     

饲料蛋白质水平对克氏原螯虾幼体消化酶活性和肌肉成分的影响

用4种等能不同质量分数的蛋白质饲料(30%、35%、40%和45%)饲喂克氏原螯虾(Procambarus clarkii Girard)幼虾(5.46 g±0.51 g )28 d后,分析不同蛋白水平的饲料对克氏原螯虾幼虾肠道和肝胰脏消化酶活性和体成分的影响.结果表明:(1)饲料蛋白质浓度对脂肪酶和蛋白酶活性均有显著性影响(P<0.05);并随着饲料蛋白水平的提高,两酶活性都呈现先升高后降低的趋势.其中肠道蛋白酶和肝胰脏蛋白酶活性分别在饲料蛋白质浓度为40%和35%时最高;肠道和肝胰脏脂肪酶活性均在饲料蛋白质浓度为40%时最高,且各饲料组肝胰脏脂肪酶活性差异显著(P<0.05),而35%组和40%组之间的肠道脂肪酶活性无显著性差异(P>0.05).克氏原螯虾幼体的肠道和肝胰脏淀粉酶活性随饲料蛋白质水平的升高均呈波浪式变化;35%组与45%组之间的肠道淀粉酶活性和30%与45%组之间的肝胰脏淀粉酶活性均无显著性差异(P>0.05).(2)随着饲料中蛋白水平的升高,克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量只有45%组显著升高(P<0.05),其他饲料组肌肉蛋白含量虽有上升趋势,但差异不显著(P>0.05).随着饲料蛋白浓度的增加,肌肉中脂肪含量反而下降,除30%组外,各组间差异显著(P<0.05).对克氏原螯虾肌肉灰分的测定表明,饲料蛋白浓度对肌肉中灰分含量的影响不显著(P>0.05).     

碱蓬根系嗜盐耐盐真菌的分离与鉴定

为分析耐盐植物碱蓬根系真菌的组成和耐盐程度,采用常规植物组织真菌分离方法对盐碱地中生长健康的碱蓬根系进行真菌分离,将分离得到的真菌在不同NaCl浓度培养基上进行培养,检测菌株的嗜盐耐盐性,并对分离得到的嗜盐耐盐真菌进行形态学鉴定和分子生物学鉴定。结果显示:分离得到耐盐真菌40株,分别属于镰刀菌属(Fusarium sp.)、链格孢属(Alternaria sp.)、曲霉属(Aspergillus sp.)、腐霉属(Pythium sp.)等,其中,棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)和尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)是没有被报道过的耐盐真菌;分离得到嗜盐真菌3株,都属于聚多曲霉(Aspergillus sydowii)。结果表明,耐盐植物碱蓬中嗜盐耐盐真菌多样性丰富。     

绍兴蛋鸭血清淀粉酶同功酶与生产性能关系的研究

测定并比较１６０日龄绍兴产蛋鸭和非产蛋鸭血清淀粉酶的多态性表现型的差异。结果表明：１６０日龄绍鸭血清淀粉酶主要包括：Ａｍｙ－１,Ａｍｙ－２和Ａｍｙ－３三个区域,均表现明显的多态性。Ａｍｙ－１区为鸭血清淀粉酶的主信号区,产蛋绍鸭血清淀粉酶Ａｍｙ－１区以Ｂ型为主,Ａｍｙ－３区为无带型;未产蛋绍鸭Ａｍｙ－１区以Ａ型居多,Ａｍｙ－３区为２条带型的频率为３７％,二者之间差异显著。１６０日龄绍兴蛋鸭血清淀粉酶表现型和体重无显著相关。