西瓜ClPDF2.1蛋白的原核表达及其对香蕉枯萎病菌的抑制活性测定

尖孢镰刀菌古巴专化型侵染香蕉引起的香蕉枯萎病严重危害中国香蕉产业。植物防卫素是一类小的富含半胱氨酸的抗真菌蛋白。本研究旨在了解西瓜（Citrullus lanatus）防卫素蛋白ClPDF2.1对香蕉枯萎病菌的抑制活性。提取西瓜RNA后反转录为cDNA,以西瓜cDNA为模板,克隆ClPDF2.1基因,将测序正确的ClPDF2.1连接到载体pGEX-6P-1,随后转化Trans BL21(DE3)pLysS,IPTG 诱导GST-ClPDF2.1融合蛋白表达16 h后,经SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定GST-ClPDF2.1融合蛋白的表达,进行GST-ClPDF2.1融合蛋白体外抑制香蕉枯萎病菌生长的功能初探。本研究为进一步培育转基因香蕉抗病品种奠定基础。     

GST-MtDef4融合蛋白的原核表达及体外抑菌活性的检测

为研究苜蓿(Medicago truncatula)防卫素基因MtDef4的抑菌功能,以含有该基因片段的质粒pAND-MtDef4为模板,扩增出相应的目的基因,测序正确后将MtDef4基因片段连接到带有GST标签的原核表达载体pGEX6P-1中,转化大肠杆菌TransB(DE3),经IPTG诱导,Glutathione Sepharose 4B亲和纯化,通过SDS-PAGE电泳及Western blot确定融合蛋白的表达。体外抑菌试验表明,MtDef4能够抑制病原真菌Corynespora cassiicola而非Collectotrichum gloeosporioides的生长。本研究结果可为进一步培育转基因橡胶抗病品种奠定基础。     

油菜防卫素和草酸氧化酶基因的克隆与诱导表达水平研究

基于拟南芥、甘蓝及油菜等的植物防卫素(PDF)相关基因序列和已克隆的油菜草酸氧化酶(OXO)基因序列设计PCR引物,对甘蓝型油菜基因组DNA进行扩增,获得了序列大小分别为470bp和629bp的PDF1.2和OXO.生物信息学分析表明,该PDF1.2和GenBank中的相关基因同源性在42%～71%,OXO和GenBank中的相关基因同源性在70%以上.在油菜苗期,油菜黑胫病病原接种后基因PDF1.2表达量增加3倍以上,基因OXO也有不同程度的增强表达;诱导剂acibenzolar-s-methyl诱导基因OXO增强表达,但不能诱导PDF1.2增强表达.诱导的系统表达(非处理叶)高于局部表达(处理叶).这是首次报道油菜PDF1.2克隆和诱导表达结果.     

植物自卫与仿生农药

在生物界,绿色植物从春发芽、夏长叶到秋结果,看起来逍遥自在、与世无争,实际上无时无刻不在遭受害虫的攻击。 其实,草木新生的嫩芽、幼叶、幼果看是害虫不可多得的美餐,但其中却潜藏着种种“秘密武器”。例如：蕃茄碱、茄碱棉粉酚、生氰苷、强心苷等,都是能给害虫以致命一击的“防卫素”。在长大的枝叶中,大量积存着单宁、五羟黄酮、绿原...     

桑树植物防卫素的研究初报

本文用８个桑树品种为材料，接种桑芽枯病菌诱导桑树产生植物防卫素（ｐｈｙｔｏａｌｅｘｉｎ），将抽提液进行抗菌活性鉴定。结果表明，不同桑品种植物防卫素的抗菌活性差异明显。薄板层析（ＴＬＣ）分析表明其不同Ｒｆ值区带的抗菌活性差异明显。田间接种Ｆ．ｓｏｌａｎｉ后，发现不同桑品种抗桑芽枯病菌的能力与不同桑品种枝木的桑植物防卫素的抗菌活性大小完全一致。     

桑树植物防卫素研究：抗桑黄化型萎缩病品种育2号枝皮的分析

以Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｏｌａｎｉｆ．ｓｐ．ｍｏｒｉ菌接种诱导的育２号桑枝皮经丙酮提取，抗菌活性追踪溶剂萃取得乙酸乙酯提取物活性部位，进一步反复柱层析和制备薄层层析得到Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３和Ｍ４４个植物防卫素成分。其中Ｍ２、Ｍ３；和Ｍ４经波谱解析和文献对照，证明为ＭｏｒａｃｉｎＣ，Ｇ和Ｎ。