构树BpbHLH149转录因子转录酵母的Cd胁迫响应功能

构树(Broussonetia papyifera(Linn.) L’Hert. ex Vent)是我国重要的扶贫攻坚树种,在矿区植被恢复中占有重要地位。为探究构树的抗镉响应适应分子机制,筛选优良抗逆基因,研究结果从构树中克隆获得一条bHLH转录因子(命名为BpbHLH149)基因,对其基本生物信息、Cd胁迫响应及转化酵母的功能进行分析,预测BpbHLH149响应镉的功能。结果显示：基因开放读码框(ORF)长630 bp,推导蛋白的分子质量为22 968.42 u,含有209个氨基酸,理论等电点为11.35。在150μmol·L^-1 CdCl₂处理下,BpbHLH149基因被显著诱导,在12 h时BpbHLH149在根中的表达相对于对照上调了18.2倍。转入BpbHLH149的酵母在Cd胁迫下表现出比对照更高的生存活性。当CdCl₂质量分数高于0.6%时,转基因酵母的生长活力是对照的1.54～1.71倍。表明BpabHLH149基因具有响应镉胁迫的能力,且能提高酵母的抗性,BpabHLH149基因可作为构树逆境应答的重要...     

皱纹盘鲍肽聚糖识别蛋白在免疫防御中的作用

本研究从皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)中鉴定并克隆了一种肽聚糖识别蛋白(PGRP),命名为HdPGRP。HdPGRP的cDNA全长为1467 bp,共编码354个氨基酸,其中含有1个信号肽(1~18氨基酸)、1个SH3b结构域(93~160氨基酸)、1个PGRP结构域(179~322氨基酸)和1个Ami_2结构域(191~332氨基酸)。此外,在HdPGRP序列中发现了4个保守的Zn2+结合位点(H209、Y255、H318和C330)以及5个保守的酰胺酶催化位点(H209、Y255、H318、T328和C330)。经多序列比对和系统发育树分析,表明HdPGRP属于短型PGRP家族成员。在健康鲍鱼中,hdpgrp主要在肝胰腺中表达,其次依次在血细胞、外套膜和鳃中。在鳗弧菌(Vibrio anguillarum)刺激后,血细胞中的hdpgrp表达量在72 h内呈现先上升后下降的趋势,在24 h表达量达到最高。SDS-PAGE结果显示,重组HdPGRP (rHdPGRP)的分子量为30 kDa。rHdPGRP表现为Zn2+依赖酰胺酶活性,可催化降解不溶性肽聚糖。此外,rHdPGRP对革兰氏阳性菌藤黄微球菌(Micrococcus luteus)具有显著的抑制作用,且这种抑制作用可能与其酰胺酶活性有关。本研究表明,HdPGRP在机体抵御入侵细菌等免疫防御中起重要作用。