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鉴于ε–聚赖氨酸収酵过程对抗生素压力条件的依赖,尝试基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)构建无选择压力下稳定表达ε–聚赖氨酸的淀粉酶产色链霉菌表达系统:将抗毒素基因relB2sca与ε–聚赖氨酸合成酶基因pls克隆至表达载体,幵导入淀粉酶产色链霉菌pls缺失突变株,将毒素基因relE2sca整合至淀粉酶产色链霉菌的染色体(突变株YY3),获得包含ε–聚赖氨酸稳定表达的突变株YY1。经过多次传代,相比对照组,在不含抗生素压力条件下,突变株YY1依然能够稳定地合成ε–聚赖氨酸。毒素蛋白RelE2sca的表达会导致变铅青链霉菌、阿维链霉菌和链霉菌FR–008等常用链霉菌异源表达宿主的死亡,提示基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)可作为一种通用的遗传标记。 相似文献
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多烯大环类抗生素的生物合成酶属于典型的Ⅰ类聚酮合酶(PKS),这些生物大分子有着非常相似的化学结构和模块合成的形式.在本研究中,每个多烯聚酮合酶的单一结构域被作为系统进化分析的对象.我们发现,各类结构域在进化上出现了不同方向的倾向,其中,KS域在进化树中归成三大类,分别对应多烯结构的三大块区域;相对于KS域和ACP域表... 相似文献
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从蔗渣腐烂域筛选出一株高纤维素酶活力的特异青霉(P.notatum)YB-5,经紫外线和亚硝基胍诱变,获得一突变株YB-7,其生长快,产孢子多且无毒性。并研究了碳源、氮源、金属离子和表面活性剂对产酶的影响。在正交优化的固体培养基和优化培养条件下,60h时CMCase、FPA和β-葡萄糖苷酶活力分别可达29.4IU/ml、8.40IU/ml和25.1IU/ml。 相似文献
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变铅青链霉菌的DNA上存在着一种异常的修饰,使其在含有微量Fe~(++)的缓冲液中电泳时,双链DNA遭到降解。DNA的切割是位点特异性的。与已知修饰特征的DNA进行同步试验发现,变铅青链霉菌的这种特异性修饰与目前所发现的修饰系统(如DNA甲基化)均不相同,很可能是一种新的修饰系统。 相似文献
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链霉菌FR-008产生一种七烯大环内酯类抗生素FR-008,对真菌具有很高的抗菌活性,并对蚊子幼虫有高毒性(袁德军和周启,1990)。负责合成FR-008的基因簇被定位(Hu et al.,1994),有21个基因(共138kb,GenBank accession number AY310323)被确认参与了抗生素FR-008的生物合成以及调节和外运(Chen et al.,2003)。然而,在FR-008基因簇最左端fscO基因上游的基因是否与FR-008抗生素生物合成相关?为此,本研究对FR-008基因簇上游区域进行了序列测定和分析。 相似文献
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对特异青霉(P.notatum)YB-7纤维素酶的一般酶学性质进行了研究。其最适酶作用条件为:pH5.0,50℃,且在小于70℃和pH4.0~9.0的范围内具有稳定性,CMC、FPA和β-葡萄糖苷酶活力变化范围有一定差别。甘油、葡萄糖和纤维二糖的最低抑制浓度(mmol/L)分别为3.25、2.45和1.71,其抑制系数分别为1.01,2.31和2.80。80%饱和度的硫酸铵可较完全地沉淀纤维素酶的有效成份。 相似文献
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链霉菌高拷贝质粒pIJ101DNA的研究 I.在大肠杆菌中的启动子活性 总被引:1,自引:0,他引:1
邓子新 《华中农业大学学报》1990,9(1):37-46
用大肠杆菌座子与Tn5个去除了自身启动子区域的卡那霉素抗性基因(neo)作为指标标记来探测广寄主、高拷贝的链霉菌质粒pIJ101上DNA的启动子活性所做的基因融合试验揭示,pIJ101上至少有两个可大大肠杆菌中行使启动子功能的DNA片段。基因融合后所产生的杂合质粒能够赋予大肠杆菌ED8767较高的卡那霉素抗性。对含质粒菌株在液体培养基中的生长动力学分析揭示,这种菌株在从无药物向有药物的生物环境中过渡时,生长并不受到暂时的抑制。说明这种启动子活性不是pIJ101DNA上DNA的突变所引起。用大肠杆菌的启动子探针载体pKK232-8所做的体外亚克隆试验更进一步证实了这项观察,并把两个启动子功能区分别缩小到0.54kb和1.18kb的范围内。这项试验成功地组建了质粒pIJ101亚克隆库,便于对这个重要的链霉菌质粒进行精细的分子生物学研究。 相似文献
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恶唑霉素(oxazolomycin,OZM)是由白色链霉菌JA3453产生的杂合聚酮聚肽抗生素,其结构特征为螺旋链接的β-内酯/γ-内酰胺,垩唑环,(E,E)二烯和(Z,Z,E)三烯链。恶唑霉素具有抗肿瘤,抗病毒和一定的抗细菌的生物活性。前面工作中我们已经从白色链霉菌JA3453中定位了135kb的DNA区域,这个区域覆盖了整个ozm基因簇,对部分片段测序揭示了负责甲氧丙二酰ACP生物合成位点的6个基因。本文通过突变以及互补分析其中的甲基转移酶基因ozmF并证实其与恶唑霉素生物合成相关。这些结论有助于我们通过组合生物化学的方法产生新的OZM衍生物。 相似文献