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线粒体琥珀酰辅酶A转移酶(SCOT)含有4个酪氨酸残基,其4、76位点酪氨酸(Tyr4、Tyr76)的硝基化可导致其酶活性下降,制备特定的抗体可对其硝基化水平和位点进行检测.应用淋巴细胞杂交瘤技术,以化学合成的含琥珀酰辅酶A转移酶硝基化Tyr4和Tyr76肽段为半抗原,偶联钥孔血蓝蛋白(KLH)后,作为免疫原免疫Bal... 相似文献
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摘 要：线粒体琥珀酰辅酶A转移酶(SCOT)含有4个酪氨酸残基，其4、76位点酪氨酸(Tyr4、Tyr76)的硝基化可导致其酶活性下降，制备特定的抗体可对其硝基化水平和位点进行检测。应用淋巴细胞杂交瘤技术，以化学合成的含琥珀酰辅酶A转移酶硝基化Tyr4和Tyr76肽段为半抗原，偶联钥孔血蓝蛋白(KLH)后, 作为免疫原免疫Balb/c小鼠，分离免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合，获得了多株融合细胞。经对融合细胞多次筛选和检测，最终获得4株单克隆抗体，分别对应SCOT Tyr4和Tyr76硝基化后表位，其间接ELISA检测效价分别达到1∶128 000、1∶32 000、1∶512 000和1∶4 096 000，表明抗体具有较强特异性和灵敏度。 相似文献
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