北美H3N8亚型犬流感病毒双重RT-PCR检测方法的建立

H3N8亚型犬流感病毒在北美地区广泛流行,并引发犬的呼吸道疾病,但目前中国尚未有犬感染H3N8亚型犬流感病毒的报道。随着近几年宠物贸易的繁盛,犬流感流行区域可能逐渐扩大,增加北美H3N8亚型犬流感病毒传入中国的可能。因此,需要建立一种针对北美H3N8亚型犬流感病毒的快速检测方法。本研究中,我们建立了针对北美H3N8亚型犬流感病毒的HA和NA基因片段的双重RT-PCR检测方法。该方法可特异性地检出北美H3N8亚型犬流感病毒HA和NA基因,而未检出H3N2亚型犬流感病毒及其他亚型流感病毒、犬瘟热病毒、传染性肝炎病毒、犬细小病病毒、副流感病毒;检测方法灵敏度可达0.1 pg/μL。利用该方法对临床样本进行了检测,证实该检测方法可靠。该检测方法的建立为监测北美H3N8亚型犬流感病毒提供了良好的技术支撑,可用于外来犬流感病毒的检测。     

犬猫流感病毒的研究进展

能感染犬和猫的流感病毒主要包括H3N8、H3N2、H5N1和H1N1等亚型。虽然目前尚未有关于犬猫流感病毒感染人的报道,但由于犬猫是人类重要的伴侣动物,与人亲密接触,犬猫流感病毒对危害公共卫生健康具有潜在威胁。本文围绕犬、猫流感病毒的流行情况及生物学特性进行综述,旨在为犬猫流感病毒的防控工作提供参考。     

犬流感

早在20世纪70年代,Nikitin A等人通过动物试验证明犬可以感染人H3N2流感病毒,并且在犬血清内检测到相应的抗体[1].之后Romvary J Kilbourne E D Onta T等人也证明了犬可以感染流感病毒,但是一直未从自然发病犬体内分离到流感病毒,或者发现流感病毒在犬群中大量流行[2-7].近10年,关于甲型流感病毒(influenza A virus)感染犬猫的报道频繁出现,包括H3N8、H5N1、H3N2和H1N1共4种亚型流感病毒.     

犬流行性感冒诊治

犬的流行性感冒是犬接触传染的呼吸系统疾病。40年前,H3N8流感病毒首次在马的身上分离得到,2004年在犬的身上首次分离到。H3N8病毒最先出现在灰犬身上,但很快在犬中传播蔓延。1发病原因犬的流行性感冒是由犬流感病毒(H3N8病毒)引起     

济源市宠物犬犬流感的血清学调查

犬流感是由犬流感病毒(canineinfluenzavi-rus,CIV)引起的以体温升高、咳嗽、流鼻涕、呼吸困难为主要临床症状的疾病,是犬新发的一种高度接触性、传染性呼吸道疾病[1].近年来,A型流感病毒对犬和猫的感染引起了人们广泛的关注.2004年1月, H3N8型犬流感病毒首次在美国佛罗里达州的赛犬中被发现[1],该病毒遗传性和抗原性与当时的H3N8马流感病毒非常相似[2].陆续地,在韩国,禽源H3N2亚型病毒引起犬呼吸道感染甚至犬的致死性感染相继被报道[3].由于犬和人的接触比较密切,流感病毒通过在哺乳动物宿主体内的适应使其更容易获得感染人的能力.所以犬流感病毒一旦获得在犬中持续传播的能力,这将对犬的保健、人类的健康构成威胁,因此对犬流感的研究具有较深的公共卫生学意义.     

犬流感的研究进展

犬流感是犬的一种新发传染病,2004年美国首次出现了H3N8亚型犬流感病毒,对犬的致死率高达36%,该病毒随后出现在美国的不同地区;2006—2007年韩国和我国先后在严重呼吸道感染犬中分离到H3N2亚型流感病毒,研究发现该病毒可以在犬之间进行直接传播,表明H3N2亚型犬流感病毒已经进入到韩国和我国的犬群中。犬作为人类主要的伴侣动物之一,与人和野生动物都有亲密接触,犬流感给流感病毒的跨宿主传播提供了更多的机会,因此引起了人们的广泛关注。本文将从犬感染流感病毒的情况、犬流感的临床症状、诊断、治疗和预防几个方面进行综述。     

广东1株H3N2亚型犬流感病毒全基因组遗传进化分析

本试验对1株犬源H3N2亚型流感病毒(A/Canine/Guangdong/10/2014)进行了遗传进化分析。结果显示,本毒株8个基因片段与在中国和泰国分离的H3N2亚型犬流感的关系最近,与当前亚洲分离的毒株高度相似(99%)。基因亚型分析显示8个基因片段和目前流行的H3N2CIVs有相同的基因型(K,G,E,3B,F,2D,F,1E)。本毒株为低致病性的禽源H3N2亚型犬流感,从而证实了禽源犬流感亚型在中国的存在,对流感病毒实施广泛的血清学和流行病学检测,以及对该病的防控具有重要意义。     

马流感病毒A/Equine/Huabei/01/07(H3N8)对灵缇犬的实验性感染

为了解灵缇犬对马流感病毒A/Equine/Huabei/01/2007(H3N8)的易感性,将马流感病毒培养液以1.0 mL(含105.7EID50)经静脉途径接种4条灵缇犬,另以2.0 mL(含2×105.7EID50)经滴鼻、点眼方式接种3条灵缇犬。采用临床症状和病理学观察、免疫酶组织化学染色技术、病毒分离、HI抗体检测和流感病毒受体类型检测技术,对病毒在灵缇犬体内的感染情况进行了系统研究。结果表明,感染的7条犬在整个试验观察期间体温等临床指标均无异常变化,未见明显的肉眼和组织学病变。感染后5 d,4条感染犬的气管、支气管和细支气管上皮细胞内流感病毒M蛋白均为阳性,1条犬的咽拭子病毒分离结果为阳性,1条犬的马流感病毒H3亚型HI抗体阳性。感染后14d,剩余3条感染犬中有2条犬马流感病毒H3亚型HI抗体呈阳性。试验证明,目前流行的A/Equine/Huabei/01/2007(H3N8)病毒可以感染灵缇犬,但不导致灵缇犬出现明显的临床症状。灵缇犬的喉头、气管上皮细胞具有与马流感病毒结合的SAα2,3 Gal受体。     

H3N2与H3N8亚型犬流感病毒研究进展

犬流感病毒(canine influenza virus, CIV)在跨宿主传播后的十余年间,不断发生重组和变异,对于宿主的适应性逐渐增强。而犬作为伴侣动物,其多数组织细胞具有人与禽流感病毒的唾液酸受体,充当着流感病毒"混合器",给公共卫生安全造成极大的潜在威胁。目前可以在犬群中稳定传播的主要有H3N2和H3N8亚型犬流感病毒。本文将对这两种亚型犬流感病毒的流行情况、诊断与防控措施进行阐述,为进一步开展犬流感病毒相关研究工作提供参考。     

犬IFN-γ的原核表达及其对A型流感病毒H3N2亚型的抑制作用

为研究犬的γ干扰素(IFN-γ)对犬流感病毒H3N2亚型的抑制作用,由经ConA诱导过的健康犬淋巴细胞中特异性地扩增犬IFN-γ(cIFN-γ)基因,构建重组原核表达载体pET-cIFN-γ,转化宿主菌BL21(DE3)中进行诱导表达,以MDCK-VSV法对纯化后产物进行抗病毒活性鉴定,并在MDCK细胞上测定对H3N2亚型犬流感病毒的抑制作用。结果表明,表达产物以包涵体形式存在,经变性、复性、纯化后,所制备犬IFN-γ的抗病毒活性为1.1×10~5 U/mg,重组犬IFN-γ稀释2~6倍后对犬流感病毒的增殖仍具有明显抑制作用。本研究成功表达了具备抗H3N2亚型流感病毒活性的犬IFN-γ,为犬流感病毒新型药物的开发奠定了基础。