猪瘟脾淋毒活疫苗中兔瘟外源病毒检测方法的建立及应用

为检测商品化猪瘟脾淋毒活疫苗中RHDV污染,根据兔出血症病毒VP60基因保守序列设计引物,建立了检测兔出血症病毒一步法反转录一聚合酶链(RT-PCR)方法,并对其特异性、敏感性进行了研究。该一步法RT-PCR对RHDV扩增结果为阳性,对照毒株扩增结果均为阴性;对兔出血症病毒检测的灵敏性为10皮克总RNA量,应用该方法,检测了20批猪瘟脾淋源活疫苗样品,以上结果表明该一步法RT-PCR方法检测     

兔出血症病毒胶体金免疫层析试纸条诊断方法的建立及初步应用

为了建立一种快速、简便的兔出血症病毒(RHDV)的检测方法,用胶体金标记纯化的RHDV多克隆抗体,以杆状病毒表达系统表达的重组RHDV VP60蛋白为免疫原制备RHDV的单克隆抗体(McAh,简称单抗)A3C,将RHDV McAb和羊抗兔IgG抗体包被在硝酸纤维素膜上,分别作为检测线和质控线,经条件优化研制成RHDV免疫胶体金试纸条.该试纸条可以检出红细胞凝集试验(HA)效价为1:10的RHDV悬液,即HA检测为阴性的样品,该试纸条检测为阳性,其敏感性高于HA;特异性试验结果显示,该试纸条不与家兔其他常见病菌发生交叉反应.应用该试纸条对127份疑似兔出血症家兔肝脏样品进行初步检测,同时用HA做平行试验,阳性符合率为100％.因此,该试纸条是一种快速、灵敏、特异的兔出血症病毒检测方法,为兔出血症的现场诊断提供了有效的方法,显示出很好的临床应用前景.     

兔场突发兔出血症诊治报告

兔出血症,俗称兔瘟,是由兔出血症病毒引起的以急性、高度传染性、大面积死亡为特征的家兔烈性传染病。目前,该病可由兔出血症疫苗得到很好防控,但由于免疫程序不当、主观因素导致免疫失败等原因,该病呈零星散发态势,给发病兔场造成严重损失。2010年4月底,江苏溧阳市某兔场发生兔子连续死亡情况,与专家联系,初步判断为疑似兔出血症病例,后经诊断为兔出血症,立即进行兔出血症疫苗紧急免疫,从而避免该兔场发生大规模爆发和死亡。     

西藏林芝地区首次发现兔出血症病毒血清亚型

经交互保护试验发现,用西藏兔出血症病毒制备的疫苗免疫家兔后能抵抗同源病毒和江苏兔出血症病毒攻击,保护率均为１００％;而用江苏兔出血症病毒制备的疫苗对西藏兔出血症病毒却不能提供有效的保护,保护率仅为３３．３％。交互血凝抑制和琼脂扩散试验表明,两者在血凝素抗原及琼脂扩散抗原上均存在较大差异。首次发现兔出血症病毒血清亚型。     

一起急性仔兔病毒性出血症的诊断

兔病毒性出血症,俗称"兔瘟",是由兔病毒性出血症病毒引起的一种急性、高度接触性传染病,常给养兔业造成巨大经济损失。据报道,兔病毒性出血症多发于60日龄以上的青年兔和成年兔,2月龄以内的仔兔敏感性较低。2006年7月17日梧州市蝶山区高旺村黄某饲养的仔兔发病后伴随着尖叫、抽搐后死亡。剖检病变为胃肠高度臌胀,肝脏和肺脏有严重灰白色坏死灶、充血和淤血以及其他实质性器官肿大和充血。经梧州市畜牧兽医站中心实验室综合诊断为兔病毒性出血症,这说明兔病毒性出血症病毒对仔兔的易感性增加,毒力增强。     

兔病毒性出血症诊断方法研究概况

兔病毒性出血症(RHD)是由兔病毒性出血症病毒(RHDV)引起的一种急性、高度致死性传染病,对易感兔致病率可达90%,致死率可达100%。本文对兔病毒性出血症的病原学、流行特点、检测方法等进行了综述,以期为其诊断和防治提供参考。     

一起疑似兔病毒性出血症的诊治

兔病毒性出血症俗称兔瘟、兔出血症，是由兔病毒性出血症病毒引起的家兔的一种急性、高度接触性传染病，主要危害青年兔、成年兔，死亡率较高。本文总结了一例兔病毒性出血症的发病情况，临床症状、剖检变化、诊断以及治疗措施情况，以供参考。     

兔病毒性出血症的诊断与防治

主要介绍了兔病毒性出血症的临床症状、诊断及防治方法,旨在为养殖户提供参考,减少兔病毒性出血症给养兔业带来的损失。     

兔病毒性出血症研究概况

本文对兔病毒性出血症病毒的形态及理化特性、兔病毒性出血症病毒的分子生物学、兔病毒性出血症病毒的诊断、兔病毒性出血症病毒的疫苗等方面进行了简要综述。     

兔瘟疫苗的研究应用现状

兔病毒性出血症(RHD)俗称"兔瘟",或称兔出血症,是由兔病毒性出血症病毒(RHDV)引起的兔的一种急性、高度接触性传染病,特征为呼吸系统出血、肝坏死、实质脏器水肿,瘀血及出血性变化.     

近年我国兔瘟流行特点分析与疫苗研究动态

兔瘟是由兔病毒性出血性败血症病毒引起的一种急性、高度接触性、高致死性的疾病,对养兔业的危害巨大。介绍了兔瘟流行的特点及兔瘟疫苗的研究进展,分析了兔瘟疫苗免疫失败的原因,提出了综合防治的措施。     

醛化人“O”型红细胞的制备及其在兔出血症HA／HI试验中的应用

在兔出血症的检测和免疫监测中,血凝／血凝抑制试验（HA／HI）是常规有效的检测方法。针对人“O”型新鲜红细胞存在质脆易碎、保存期短的缺点,从醛化人的“O”型红细胞制备方法的优化、工作浓度、保存时间三个方面进行研究,并用于兔出血症的HA／HI试验,同时以新鲜的人“O”型红细胞作为对照。结果表明：经戊二醛-甲醛二次醛化的红细胞的醛化效果与只用戊二醛醛化的红细胞效果差异不显著,均优于甲醛醛化效果,且经戊二醛-甲醛二次醛化或戊二醛醛化后的红细胞不溶血,性质不变,易保存;在兔出血症HA/HI试验中,经戊二醛醛化人“O”型红细胞的试验效果与新鲜红细胞差异不大,结果稳定性好。     

兔病毒性出血症研究进展

兔病毒性出血症俗称"兔瘟",是由兔病毒性出血症病毒引起的一种急性,致死性传染病,对易感兔致病率可达90％,病死率可高达100％。文章对兔病毒性出血症的病原学、流行病学、临床症状、病理变化、诊断和防制研究进展作了系统深入综述,并提出了存在的问题和展望。     

兔瘟病毒VP60蛋白原核表达及其应用

为获得活性良好的兔出血症病毒基因工程抗原,本研究对兔出血症病毒ZB分离株的VP60基因进行了原核表达与初步应用。参照ZB株分离病毒VP60基因序列,设计合成一对特异性引物,PCR扩增长876bp的VP60基因片段。将目的片段定向克隆至pET30a表达载体中,经鉴定正确后,重组质粒转化BL21表达菌,经IPTG诱导后获得了以包涵体形式表达的重组蛋白,重组蛋白纯化后,Western blot检测表明具有良好的抗原性与特异性,以该蛋白作为诊断抗原,初步建立了检测兔瘟病毒抗体的间接ELISA诊断方法。本研究为RHDV分子流行病学调查提供了参考,为VP60蛋白结构与功能研究、RHDV抗体检测试剂盒及新型疫苗的研制奠定基础。     

新型兔出血症病毒与经典型病毒的差异

新型兔出血症病毒(RHDV2)在全球范围流行并已在我国出现,给养兔业带来巨大威胁。为了解RHDV2与经典兔出血症病毒(RHDV)的异同,从病原学、流行病学、临床症状、致病机理、诊断与防控等方面,阐述了两种病原的不同及相关研究的最新进展。对比发现:RHDV2与经典RHDV亲缘关系较远,抗原表位也存在明显差异,属于不同的病毒分支;经典RHDV主要感染成年家兔,而RHDV2对不同品种和年龄的兔均易感;经典RHDV感染常表现为急性症状,而新型RHDV感染以亚急性和慢性病症为主。目前针对RHDV2的检测和疫苗研究还相对滞后。鉴于RHDV2与经典RHDV之间免疫交叉性较弱,免疫预防上存在较大空白,下一步应加大RHDV2毒株结构功能研究,加快疫苗开发,做好可疑病例处置和流行病学研究,及时掌握我国疫情动态。本文为我国兔病毒性出血症的预防与控制提供了参考。     

兔病毒性出血症病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及应用

为建立一种快速的兔病毒性出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)病原检测方法,本研究根据GenBank上登录的RHDV VP60基因序列,设计合成内外2对引物,优化PCR反应条件,建立了检测RHDV的巢式RT-PCR方法。该方法对兔轮状病毒、仙台病毒、健康兔肝脏组织的扩增结果均为阴性;该方法第1次扩增的敏感性是10 ng,第2次扩增的敏感性是0.1 ng,第2次比第1次扩增的敏感性高100倍。建立的巢式RT-PCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等优点,可以准确快速检测出极低含量的RHDV,将为兔病毒性出血症的病原检测及分子流行病学调查等提供一种快速、简单、高效、特异、灵敏的检测方法。     

鹿流行性出血病病毒双抗夹心ELISA方法的建立

为建立鹿流行性出血病病毒(EHDV)病原学检测方法,用纯化的抗EHDV特异性单克隆抗体包被ELISA板,用兔抗EHDV IgG作为夹心抗体,IgG作为夹心抗体建立EHDV双抗夹心ELISA方法,并对该方法的特异性和敏感性进行了试验.用ELISA分别检测EHDV、蓝舌病病毒(BTV)、水疱性口炎病毒(VSV)、赤羽病病毒...     

兔出血症病毒遗传与变异的分子基础

兔病毒性出血症是由兔出血症病毒（Rabbit hemorrhagic disease virus，RHDV）引起的一种急性、高度致死性传染病，病死率高达100％。近年来，由于该病毒血凝性、抗原性的变异，病毒感染宿主增多，不仅对该病的防控造成了一定的威胁，更造成了严重的经济损失。国内外研究学者对该病毒的基因组结构、基因组编码的产物和功能，病毒的宿主和受体以及病毒变异等相关进行了大量深入的研究和分析，为该病毒的防控和治疗提供了技术基础。本文就RHDV遗传与变异的分子基础作一综述，希望能为深入了解该病毒，以及日后的防控提供一定的理论支持。     

兔病毒性出血症病毒高免血清的制备与应用效果

以兔病毒性出血症病毒组织灭活疫苗免疫家兔，经五次免疫之后，抗体效价可达12log2以上，采集兔血清，以此治疗攻毒兔，结果大部分兔都存活，临床应用效果表明：以此血清治疗自然感染兔病毒性出血症病毒的发病兔，治愈率达80％以上。     

应用单克隆抗体ELISA阻断试验快速检测兔出血症病毒抗体的研究

利用抗兔出血症病毒(RHDV)的特异性单克隆抗体(McAb)建立了ELISA阻断试验用以检测血清抗体,并与血凝抑制(HI)和琼脂扩散试验(ID)进行了比较。结果ELISA阻断试验敏感性超过HI,更远胜于ID,具有灵敏、特异、准确等优点,适于大批血清样品的快速检测。