猪伪狂犬病抗体免疫金标快速检测试纸法

应用免疫学原理与胶体金层析技术相结合，采用双抗原夹心法建立了检测猪伪狂犬病抗体水平的“猪伪狂犬病抗体免疫胶体金快速检测试纸法”，用该法与美国Idexx公司的猪伪狂犬病ELISA试剂盒，同时对16纷猪血液或血清进行抗体水平检测，符合率达100％。同时使用金标法对100份猪血液和对应血清进行检测，结果也相同。试验结果显示．金标法与ELISA一样，具有微量、特异、准确等优点，且操作简易，而金标法不需要任何仪器，检测时间短．结果直观，容易判定，适用于基层兽医站、养猪场使用和大面积猪伪狂犬病抗体普查。     

猪伪狂犬病血清抗体gE-ELISA检测方法的建立

以纯化的猪伪狂犬病病毒gE蛋白为抗原建立了检测猪伪狂犬病血清抗体的间接gE-ELISA方法。最佳反应条件为，抗原包被浓度为1．7μg／mL，待检测血清1：40稀释。与伪狂犬病阳性血清反应为阳性，与猪瘟、猪细小病毒病、猪繁殖与呼吸综合征（猪蓝耳病）、猪乙型脑炎、猪布氏杆菌病5种疾病阳性血清和猪伪狂犬病gE缺失疫苗接种的猪免疫血清及SPF猪阴性血清均无交叉反应。批间、批内试验变异系数分别不超过5％和9％。用该方法与Ingezim ELISA试剂盒和HerdChek ELISA试剂盒同时对172份血清进行了平行检测，总符合率分别达93．6％和83．7％。试验结果表明：猪伪狂犬病血清抗体间接gE-ELISA检测方法具有较高的敏感性和特异性，且重复性好，可用于猪伪狂犬病野毒感染猪的血清抗体检测。     

猪伪狂犬病-传染性胃肠炎二联高免血清最佳免疫程序及保存条件的初步筛选

为了获得高效价的猪伪狂犬病-传染性胃肠炎二联高免血清,试验采用冻融法制备猪免疫血清,ELISA阻断法、血凝试验及血凝抑制试验分别检测各组猪伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒血清抗体效价,比较试验组及空白对照组两种病原的血清抗体效价。将两种病原抗体效价最高组血清分别置不同温度保存不同时间检测其抗体效价,探讨最适保存条件。结果表明:S6组的两种病原血清抗体效价最高,猪伪犬病病毒血清OD630值为0.352、猪传染胃肠炎病毒血清抗体效价为1∶64;试验组与空白对照组之间、S6组与其他试验组之间抗体效价差异显著。说明S6组为此次探讨的猪伪狂犬病-传染性胃肠炎二联高免血清的最佳免疫程序,通过30 d的基础免疫及10~15 d的强化免疫能获得较高效价的猪伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒血清抗体。-20℃和4℃分别适合猪伪狂犬病-传染性胃肠炎二联高免血清抗体液的长期和短期保存。     

自贡市猪伪狂犬病抗体水平的检测及其流行分析

本试验采集2004年11月至2005年10月间四川省自贡市大安区何市镇、大山铺镇、新店镇、三多寨镇、新民镇共5个乡镇养猪场和户养的527头份猪血样，用美国IDEXX公司酶联免疫吸附试剂盒进行猪伪狂犬病血清抗体检测。结果：5个镇的猪伪狂犬病阳性率分别为2．00％、1．02％、0．89％、0．00％和0．00％：其中按年龄共采集2月龄仔猪、3月龄仔猪、青年猪、种公猪、经产母猪的血样共367头份，阳性率分别为0．00％、0．00％、1．83％、1．54％和3．39％，未见可疑血清样本。经调查分析，认为导致猪伪狂犬病抗体阳性的主要原因是可能存在潜在的野毒感染，应引起足够的重视。建议制定综合防制措施，尽快实施猪伪狂犬病的净化工程，以消灭此病。     

泉州市规模化猪场猪伪狂犬病普查

近几年，我市多个规模化养猪场陆续发生猪伪狂犬病，造成严重损失。今年８～９月，我们采用ELISA试验对我市规模化养猪场进行猪伪狂犬病普查，现将检测结果报道如下：１材料和方法１．１血清样品采自全市２３个规模化养猪场（存栏２０００头以上）的猪血清共４９５份，其中生产母猪１７７头份，后备母猪９９头份，种公猪９５头份，不同日龄肉猪１２４头份。１．２诊断试剂及主要仪器诊断试剂为西班牙海博莱大药厂生产的ADVgE－ELISA试剂盒。主要仪器有酶标仪，单道、多道移液器，洗板机等。检测试验按试剂盒使用说明书介绍的方法进行…     

猪伪狂犬病血清抗体检测——Dot-ELISA法和乳胶凝集试验法的比较

Ｄｏｔ -ＥＬＩＳＡ即斑点酶联免疫吸附试验 ,是检测猪伪狂犬病血清抗体的一种常用方法 ,此方法操作比较简便 ,反应快速 ,结果特异准确。对于猪伪狂犬病抗体的检测 ,最近又有人建立了乳胶凝集试验 ,此方法更为简单易行 ,只需一块玻片、一支吸管 ,将待检样品 (血清、全血和乳汁 )置于玻片上 ,加乳胶抗原一滴 ,搅拌并摇动 ,2～ 5分钟内即可观察结果。为了弄清两种方法对猪伪狂犬病血清抗体的检测结果是否一致 ,笔者采用两种方法 ,对采自本市猪场的2 48份猪血清同时进行了抗体检测 ,两种方法的结果基本一致 ,差别只在于对弱抗体血清的反应程度…     

集贸市场肉样中伪狂犬病病毒携带状况的初步调查

从集贸市场随机采集97头份猪肉样本、53头份羊肉样本、50头份牛肉样本,应用双抗体夹心ELISA和PCR方法,平行检测样本可能含有的伪狂犬病病毒。结果97头份猪肉样中,双抗体夹心ELISA方法检出伪狂犬病病毒19份(19.6%),PCR检出25份(25.6%);牛肉样本中ELISA阳性数为0,PCR阳性2份(4%);羊肉样本中两种方法均为阴性。这两种方法均为阳性和阴性的份数为12和170,总符合率为89.2%。结果说明猪伪狂犬病的控制对提高肉食品品质具有重要作用。     

检测猪伪狂犬病血清抗体的斑点酶联免疫吸附试验方法的建立和评价

以斑点酶联免疫吸附试验(简称 Dot-ELISA)检测128份接种伪狂犬病病毒(PRV)前后的实验猪血清及49头份现地猪血清,并与微量病毒中和试验(MIVN)作比较.结果,Dot-ELISA 能检出抗 PRV 特异抗体,与MIVN 的检出符合率为95.9%,两种方法无显著性差异(P>0.05).Dot-ELISA 检出人工感染猪血清抗体的时间(接毒后第5天)早于 MIVN(接毒后第9天).Dot-ELISA 检测猪血清 PRV 抗体,具有特异性强、敏感性高、快速简便等优点,适合于大批检疫和流行病学调查.     

普洱市猪伪狂犬病血清流行病学调查

为了解普洱市猪伪狂犬病病毒(PRV)的感染情况,采用乳胶凝集方法(LAT),对2011~2015年5年间采自10县(区)103个乡(镇)819个行政村、47个规模养猪场(户)次、2 924户散养户的9 454头份未免疫过猪伪狂犬病病毒疫苗的猪血清样品进行了猪伪狂犬病的抗体检测。结果显示,5年间普洱市10县(区)猪伪狂犬病抗体阳性率在10.2%~39.3%之间,平均抗体阳性率为27.8%,其中规模养猪场平均为30.6%,散养户平均为27.7%,规模养猪场抗体阳性率高于农村散养户,种猪抗体阳性率高于育成猪。从检测结果来看,普洱市存在猪伪狂犬病病毒感染,应加强防控。     

Dot-PPA-ELISA检测猪血清伪狂犬病抗体的研究

本研究建立了Dot-PPA-ELISA检测猪伪狂犬病抗体的方法.制备的诊断膜片PRV点样抗原含量为0.5μg,可以检测的最低猪IgG含量为1.398×10-8g,灵敏性高.不与猪瘟、猪细小病毒病、猪衣原体病、布氏杆菌病、日本乙型脑炎、口蹄疫阳性血清发生交叉反应,特异性好.研究初步确定检测猪伪狂犬病抗体的阳性标准为血清效价1:64以上.试验结果表明:该法具有操作方便、快速,结果客观,易于判读等优点,可应用于猪场伪狂犬病的诊断和抗体检测.